周文武　胡建國　馬燕琳　林　玲　楊進(jìn)?！√啤√?/p>

摘要：為建立hVECF₁₆₅基因轉(zhuǎn)染大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。采用密度梯度離心—貼壁培養(yǎng)法獲Wistar大鼠BMMSC，并測(cè)定其生長曲線和表面標(biāo)志CD34、CD44、CD45及SH3，然后向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化；用脂質(zhì)體介導(dǎo)pcDNA_3.1-hVECF₁₆₅轉(zhuǎn)染BMMSC，觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞形態(tài)和生長情況的變化，通過RT-PCR、Western和ELISA鑒定VEGF在細(xì)胞中的表達(dá)情況。 經(jīng)培養(yǎng)的大鼠BMMSC，CD44、SH3檢測(cè)為陽性，CD45、CD34陰性，可誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞；經(jīng)RT-PCR、Western和ELISA檢測(cè)證實(shí)陽離子脂質(zhì)體能成功地將hVEGF₁₆₅基因轉(zhuǎn)染至大鼠BMMSC中，并獲得有效的表達(dá)．真核表達(dá)載體pcDNA_3.1-hVECF₁₆₅在BMMSC中獲有效表達(dá)，為VEGF基因轉(zhuǎn)染BMMSC移植對(duì)心梗后大鼠心功能及心室重構(gòu)的影響提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：骨髓；間充質(zhì)子細(xì)胞；VECF；轉(zhuǎn)染

中圖分類號(hào)：Q132．3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-7847(2005)04—0301—07