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孕激素對(duì)兔血管平滑肌細(xì)胞AT〈sub〉l〈/sub〉受體基因表達(dá)的作用差異及機(jī)制分析

2005-04-29 02:10:15尚美生喬中東呂吉元趙榮瑞
關(guān)鍵詞:依賴性拮抗劑孕激素

尚美生 喬中東 呂吉元 趙榮瑞

摘要:目的通過(guò)觀察孕激素對(duì)培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)ATlRmRNA表達(dá)的影響,并尋求探索其潛在的分子機(jī)制,為臨床干預(yù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法分別用孕激素及其特異性受體拮抗劑對(duì)培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞行不同時(shí)間、不同濃度的處理,然后用胰蛋白酶—EDTA消化,離心收集,提取總RNA,用RT—PCR對(duì)AT,R mRNA進(jìn)行半定量分析,利用Westem—blot對(duì)其相應(yīng)的蛋白進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果孕酮對(duì)VSMCsATlR的影響呈現(xiàn)明顯的時(shí)間依賴性,12 h達(dá)到最大值為156%±18%,表現(xiàn)為上調(diào);并呈現(xiàn)濃度依賴性,當(dāng)孕酮濃度是10-10M時(shí)對(duì)ATlRmRNA的上調(diào)影響達(dá)到最大為59.9%±4.2%;孕酮對(duì)ATlRmRNA蛋白的上調(diào)以12h為最大,達(dá)到最大值為8.44%±1.08%;孕酮受體拮抗劑0.1 nM的米非司酮對(duì)VSMCsATlRmRNA無(wú)影響,但米非司酮抵消了孕酮對(duì)VSMCsATlR mRNA的上調(diào)作用,而孕酮引起的ATlRmRNA的上調(diào)只能被三磷酸肌醇(IP3)的抑制劑Wortmannin所抑制。結(jié)論孕酮對(duì)VSMCsATlRmRNA表現(xiàn)為上調(diào),其特征呈現(xiàn)時(shí)間和濃度依賴性,其最大上調(diào)作用發(fā)生于12 h,最大作用的濃度為0.1 nM,孕激素的作用機(jī)制可能是與其受體結(jié)合后激活了IP3激酶的第二信號(hào)系統(tǒng)。

關(guān)鍵詞:動(dòng)脈粥樣硬化;平滑肌細(xì)胞;孕激素;ATl受體

中圖分類號(hào):R329.3R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1672—1349(2005)11—0977—04

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