張 洋 謝響明 劉建華
摘要:對一種耐熱性古茵——詹氏甲烷球茼(Methanocaldococetis jennaschii)的DNA連接酶進(jìn)行了克隆、表達(dá)、純化,并對其生物化學(xué)特性和酶學(xué)活性進(jìn)行了初步研究.詹氏甲烷球菌DNA連接酶重組蛋白在ATP及Ma2+二價陽離子存在的條件下具有連接酶活性,能夠封閉DNA鏈上的切割.通過不同溫度下的測試,50~80℃為較適合連接溫度,其耐熱性強,甚至在90℃下加熱5 min后仍有連接酶活性;其發(fā)揮活性的pH值范圍比較寬泛,最適pH值為6.0~9.0.這是國際上對詹氏甲烷球菌DNA連接晦的首次報導(dǎo)。