霍希琴　顏鴻飛　李　軍　周興旺　李　偉　羊小海

摘要：利用分子信標(biāo)被切割后熒光信號的變化，發(fā)展了一種簡便的檢測限制性內(nèi)切酶活性的新型熒光分析方法。以限制性內(nèi)切酶Xsp I為例，將其識別位點嵌入具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的分子信標(biāo)探針(Molecular Beacon，MB)的環(huán)狀部分。利用這種分子信標(biāo)在溶液中形成的瞬時二聚體結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)了限制性內(nèi)切酶對分子信標(biāo)的切割。在優(yōu)化的條件下。反應(yīng)初速度與酶的濃度成正比，線性范圍為0.05～50U/mL，檢測限為0.05U.mL。通過改變分子信標(biāo)環(huán)部的識別位點的序列，還可以檢測其他限制性內(nèi)切酶如Alu I的活性。

關(guān)鍵詞：分子信標(biāo)；熒光分析；限制性內(nèi)切酶

中圖分類號：Q55文獻標(biāo)識碼：A文章編號：1007－7847(2009)01－0006－05