鄧立歡 楊斌

隨著皮膚組織工程研究的逐步深入，毛囊干細(xì)胞有望作為穩(wěn)定的種子細(xì)胞用于組織工程化皮膚的構(gòu)建，并應(yīng)用于臨床。目前的研究表明，皮膚表皮細(xì)胞和毛囊各種細(xì)胞成份都來(lái)源于位于真皮層的毛囊外根鞘隆突區(qū)的毛囊干細(xì)胞，即毛囊干細(xì)胞具有雙向分化的潛能，其分化方向有可能是受細(xì)胞增殖分化的內(nèi)源性生物信號(hào)通路和外源性微環(huán)境調(diào)節(jié)控制的[1-6]。本文就近年來(lái)毛囊干細(xì)胞特性、定向分化生長(zhǎng)的調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展做一綜述。

1 毛囊干細(xì)胞的定義及其特性

研究發(fā)現(xiàn)，表皮下的毛囊外根鞘的突隆區(qū)（Outer root sheath，ORS）存在著周期性增殖和分化的干細(xì)胞。Cotsarelis等[1]通過(guò)3H-TDR給新生和成年Senear小鼠皮下注射，發(fā)現(xiàn)大部分慢周期、標(biāo)記儲(chǔ)留細(xì)胞（Label-retaining cells，LRCs）位于毛囊隆突區(qū)，提出了毛囊突隆區(qū)是干細(xì)胞存儲(chǔ)區(qū)的假設(shè)，稱這類(lèi)細(xì)胞為毛囊干細(xì)胞（Hair follicular stem cells，HFSC）。Kobayashi等[2]及Rocha等[3]采用顯微解剖方法，分別分離鼠和人的毛囊進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，其結(jié)果均支持了這一發(fā)現(xiàn)。Oshirm等[4]通過(guò)轉(zhuǎn)基因小鼠的毛囊嵌合體的研究，證實(shí)每個(gè)毛發(fā)周期性生長(zhǎng)的干細(xì)胞為HFSC。HFSC和表皮干細(xì)胞（ESC）同樣具有極強(qiáng)的修復(fù)和再生能力。HFSC是ESC的先祖細(xì)胞，較后者具有更強(qiáng)的多向分化、增殖能力。

HFSC在一定條件下可分化增殖為皮膚附屬腺體、毛囊等組織的細(xì)胞。Hoffman等[5]發(fā)現(xiàn)，在毛囊外根鞘的隆突區(qū)存在GFP陽(yáng)性細(xì)胞，在體外可以分化成神經(jīng)細(xì)胞、角化細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及黑素細(xì)胞等。

Taylor等[6]HFSC的研究表明，HFSC是一種多能干細(xì)胞（Pluripotent stem cells），具有向毛囊及表皮細(xì)胞雙向分化的潛能，在正常生理?xiàng)l件下可維持表皮細(xì)胞的自我更新。毛囊干細(xì)胞的強(qiáng)大增殖能力與其定向分化作用是分不開(kāi)的。毛囊干細(xì)胞并不直接分化為終末分化細(xì)胞。Soosan等[7]發(fā)現(xiàn)，表皮ESC通過(guò)不對(duì)稱分裂，分化為一種有限分裂循環(huán)的細(xì)胞，稱為短暫擴(kuò)充細(xì)胞（Transient amplifying cells，TAC）。再分化為終末表皮細(xì)胞。因此，HFSC具有分化成所有表皮細(xì)胞的特性，不只是作為毛發(fā)正常生長(zhǎng)周期中的存儲(chǔ)細(xì)胞，在一定條件下可分化增殖為附屬腺體，并參與皮膚損傷的再生修復(fù)。

2 毛囊干細(xì)胞的定位

位于毛囊隆突部的HFSC等同于LRCs。隆突部的細(xì)胞分子標(biāo)記，如CD34表達(dá)及K15活性增加等，可使人們從小鼠毛囊中定位和區(qū)分該細(xì)胞。隆突部細(xì)胞具有干細(xì)胞的典型特性，包括多向分化、強(qiáng)大增殖潛能和靜息狀態(tài)等。細(xì)胞系分析（克隆分析）表明，成體毛囊所有表皮及毛發(fā)源自隆突部細(xì)胞。

Michel等[8]用角蛋白 19（K19）及 3H-TDR雙標(biāo)記表皮細(xì)胞，證實(shí)K19陽(yáng)性的細(xì)胞均為L(zhǎng)RCs，并發(fā)現(xiàn)在有毛表皮中，K19陽(yáng)性細(xì)胞僅出現(xiàn)在毛囊隆突部。Taylor等[6]使用BrdU和HTDR為標(biāo)記物行雙標(biāo)記法，標(biāo)記追蹤HFSC，發(fā)現(xiàn)HFSC可雙向分化，不僅形成毛囊，而且提供一系列增殖性角化細(xì)胞進(jìn)入表皮，形成表皮細(xì)胞。

3 毛囊干細(xì)胞增殖和分化生長(zhǎng)的分子調(diào)控機(jī)制

雖然HFSC具有多項(xiàng)分化能力，但其增殖分化是受到調(diào)控的。表皮組織自身更新及細(xì)胞平衡是通過(guò)源自干細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)，即表皮穩(wěn)態(tài)的維持是組織中新生細(xì)胞形成及衰老細(xì)胞丟失之間的平衡。不同位置的皮膚干細(xì)胞在固有機(jī)制和表皮形態(tài)發(fā)生信號(hào)通路調(diào)控下，重復(fù)不斷地維持表皮穩(wěn)態(tài)。

Oshima等[4]對(duì)成年小鼠胡須毛囊外根部包含的多能干細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，這些干細(xì)胞在相關(guān)信號(hào)下增殖為頭發(fā)毛囊、附屬腺體及表皮等。對(duì)表皮生長(zhǎng)觀察發(fā)現(xiàn)，表皮和皮脂腺的生長(zhǎng)呈連續(xù)性，皮膚基底層細(xì)胞增殖并向外遷移并在表皮停止生長(zhǎng)、生成鱗屑及脫落，此過(guò)程與角化細(xì)胞變化相關(guān)。表明該區(qū)域存在調(diào)控多能干細(xì)胞向胡須生長(zhǎng)的控制干細(xì)胞的交通。Soosan等[7]也指出，皮膚上皮的多能干細(xì)胞在無(wú)嚴(yán)重創(chuàng)傷狀態(tài)下，受到嚴(yán)格的控制。

許多因素對(duì)毛囊干細(xì)胞的增殖分化過(guò)程起調(diào)控作用，包括細(xì)胞間、胞外基質(zhì)以及各種細(xì)胞因子間的相互作用均可影響干細(xì)胞的增殖分化。影響毛囊干細(xì)胞增殖分化的因素分為外源性和內(nèi)源性兩大類(lèi)。

外源性調(diào)控因素系毛囊干細(xì)胞的微環(huán)境“壁龕（Niche）”，包括：①細(xì)胞分泌的多種細(xì)胞因子；②膜介導(dǎo)的胞間作用；③整合素及胞外基質(zhì)。

內(nèi)源性調(diào)控因素包括：①作用于細(xì)胞不對(duì)稱分裂的各種蛋白質(zhì)；②調(diào)控基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子；③胞內(nèi)遺傳物質(zhì)（染色體）的修飾；④在細(xì)胞周期中設(shè)置的，控制短暫性擴(kuò)增分裂的“鐘”。

3.1 外源性調(diào)控因素——微環(huán)境“壁龕（Niche）”

干細(xì)胞在生命過(guò)程中為血液、骨組織、皮膚，神經(jīng)系統(tǒng)、肌組織及其他組織提供充足新細(xì)胞。正常情況下，干細(xì)胞處于靜息狀態(tài)，在特殊的生命周期中可被激活，特別是損傷修復(fù)時(shí)。而所謂的“壁龕”就是內(nèi)部組織微環(huán)境控制的各類(lèi)有效因子，包括鄰近的各種細(xì)胞、細(xì)胞因子、整合素、膜蛋白介導(dǎo)的胞間作用以及胞外基質(zhì)等。干細(xì)胞的分化受其所處的微環(huán)境的影響是毋庸置疑的。

Sean等[9]對(duì)毛發(fā)周期的觀察中發(fā)現(xiàn)，對(duì)于小鼠毛囊干細(xì)胞的Niches，位于Bulge區(qū)域的干細(xì)胞會(huì)促進(jìn)根部毛發(fā)及真皮乳頭新生細(xì)胞的增殖，最終促進(jìn)毛發(fā)的增生。隆突部細(xì)胞同樣可以重建皮脂腺。壁龕中的干細(xì)胞可移行出隆突，參與皮膚創(chuàng)傷修復(fù)。然而在隆突區(qū)單個(gè)干細(xì)胞鑒別以及壁龕的特性仍未有定論。

Toshio等[10]對(duì)Wnt信號(hào)通路進(jìn)行封閉時(shí)發(fā)現(xiàn)，壁龕中的HFSC計(jì)數(shù)增加，同時(shí)降低了被照射小鼠造血系統(tǒng)的造血能力，說(shuō)明了Wnt/β-catenin活力對(duì)骨髓微環(huán)境中HFSC靜息狀態(tài)的維持至關(guān)重要。此外，對(duì)于HFSC而言，細(xì)胞外基質(zhì)成分改變也影響干細(xì)胞的分化，其主要通過(guò)阻礙和/或調(diào)控毛囊干細(xì)胞微環(huán)境中的細(xì)胞因子的濃度來(lái)實(shí)現(xiàn)。

3.1.1 分泌性細(xì)胞因子

TGF-β家族是目前研究較多且對(duì)毛囊發(fā)育較重要的分泌性細(xì)胞因子之一，對(duì)調(diào)控毛囊的形態(tài)學(xué)發(fā)生和周期性循環(huán)具有重要的作用。TGF-β超家族由大量結(jié)構(gòu)相關(guān)的多肽生長(zhǎng)因子組成，包括 TGF-β、激活素（Activin）/抑制素（Inhibin）家族、骨形成蛋白（Bone morphogenetic protein，BMP）和米勒抑制物（Mullerian-inhibiting substance）家族等幾大類(lèi)[11]。 TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路包括Smad蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑/Ras-絲裂原激活蛋白激酶 （Ras-Mitogen-Activated Protein Kinase，Ras-MAPK）途徑和非Smad依賴性途徑。研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β可能通過(guò)促進(jìn)毛囊細(xì)胞凋亡和抑制毛囊細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)毛囊的形態(tài)學(xué)發(fā)生發(fā)育和生后毛囊的周期性循環(huán)，參與雄激素性脫發(fā)的發(fā)生和發(fā)展，介導(dǎo)其他因素和因子對(duì)毛囊生長(zhǎng)發(fā)育的影響。

3.1.2 膜整合蛋白介導(dǎo)的胞間作用

有些細(xì)胞的調(diào)控信息是通過(guò)細(xì)胞-細(xì)胞的直接突觸作用來(lái)進(jìn)行傳導(dǎo)的。跨膜蛋白Notch及其配體Delta或Serrate對(duì)干細(xì)胞分化具有重要作用。當(dāng)Notch與其配體結(jié)合時(shí)，干細(xì)胞進(jìn)行非分化性增殖；Notch通路被抑制時(shí)，干細(xì)胞進(jìn)入分化程序，分化成各種功能細(xì)胞。而對(duì)于隆突部的干細(xì)胞來(lái)說(shuō)，Notch的作用是使干細(xì)胞向過(guò)渡性擴(kuò)充細(xì)胞（TAC）分化[12]。

3.1.3 整合素（Integrin）

從本質(zhì)上來(lái)說(shuō)，HSFC是ESC的前體細(xì)胞，黏附特性也是其特征之一，對(duì)Ⅳ型膠原、層粘連蛋白及胞外基質(zhì)有較強(qiáng)的黏附作用。多數(shù)過(guò)渡性擴(kuò)充細(xì)胞（TAC）的黏附約需20～60min。整合素家族是介導(dǎo)其與胞外基質(zhì)黏附的主要分子，特別是α6和β1整合素為干細(xì)胞的增殖提供了良好的微環(huán)境[13]。Kim等[14]在電子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)快速黏附細(xì)胞體積較小而核漿比率大，利用干細(xì)胞制成的皮膚替代物的基底層表達(dá)α6和β1整合素。此外，胞外基質(zhì)對(duì)β1整合素表達(dá)的調(diào)節(jié)和基底膜中細(xì)胞外機(jī)制成分的局部差異，都會(huì)影響到干細(xì)胞的分布和分化方向。

3.2 內(nèi)源性調(diào)控因素

3.2.1 Wnt家族及β-catenin

Wnt基因編碼的脂類(lèi)、分泌性信號(hào)分子構(gòu)成了一個(gè)大族，哺乳動(dòng)物的基因組編碼19種Wnt蛋白及10余種卷曲7次的跨膜受體，組合傳導(dǎo)不同信號(hào)。按照Wnt的生物行為，可將其分為兩大類(lèi)：一類(lèi)是過(guò)量表達(dá)的Wnts，如Wnt-1、Wnt-3α和Wnt-8等，可誘導(dǎo)C57MG小鼠乳房上皮細(xì)胞形態(tài)改變；另一類(lèi)如Wnt4、Wnt5a、和Wnt11等卻沒(méi)有上述功能[15]。

Wnt/β-catenin信號(hào)調(diào)控生長(zhǎng)發(fā)育和疾病多個(gè)方面。βcatenin蛋白是Wnt信號(hào)途徑中的必需分子，在控制毛囊形成中是不可或缺的。β-catenin基因位于染色體3p 21-22，由CTNN b1基因編碼，長(zhǎng)約40992 bp，表達(dá)產(chǎn)物為92 kD的蛋白，具有高度保守性，含有3個(gè)重要的功能性區(qū)域：含150個(gè)氨基酸的N-末端、550個(gè)氨基酸的中間連接臂重復(fù)區(qū)和100個(gè)氨基酸的C-末端。其中，N-末端是β-catenin受GSK-3β磷酸化降解作用部位；連接臂重復(fù)區(qū)是β-catenin與多種配體，包括 Tcf/Lef、結(jié)腸腺瘤息肉病基因（APC）、Axin、E-鈣粘連素等結(jié)合的重要部位；而C-末端酸性較強(qiáng)，參與β-catenin與轉(zhuǎn)錄活化因子Tcf/Lef的結(jié)合[16]。

目前已知的Wnt蛋白家族成員中，能激活經(jīng)典通路的有Wnt-1、Wnt-3α和 Wnt-8；非經(jīng)典通路的包括 Wnt-5a及Wnt-11。在無(wú)Wnt信號(hào)的情況下，細(xì)胞質(zhì)中的β-catenin和許多蛋白，如 AXIN、酪蛋白激酶 1（casein kinase 1，CK1）、大腸腺瘤息肉蛋白（APC）、糖原合成激酶（GSK-3β），一起形成多蛋白復(fù)合物。GSK-3β對(duì)β-catenin的第41、37和33位殘基進(jìn)行磷酸化后，CK對(duì)β-catenin的第45位殘基進(jìn)行絲氨酸/蘇氨酸磷酸化，啟動(dòng)泛素的共價(jià)修飾，β-catenin被蛋白酶體降解。

當(dāng)Wnt蛋白表達(dá)增加時(shí)，這些Wnt分子與跨膜受體Frizzelds以及共同受體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（LRP-5、LRP-6）結(jié)合，進(jìn)而通過(guò)散亂蛋白（Dishevelled，Dsh）的拮抗作用抑制β-catenin-AXIN-APC-GSK3β復(fù)合物的形成，降低GSK3β的活性，從而抑制β-catenin的磷酸化，使β-catenin在細(xì)胞內(nèi)集聚，最后游離β-catenin進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與Tcf/Lef結(jié)合，激活靶基因（C-myc、cyclin D1、CD44 等）的轉(zhuǎn)錄。 其中，C-myc和 cyclin D1等是Wnt/β-catenin-Lef/Tcf途徑的下游靶基因，它們的激活與細(xì)胞增殖、發(fā)育及腫瘤關(guān)系密切。βcatenin是整個(gè)信號(hào)途徑中重要的中心環(huán)節(jié)[17-18]。

毛發(fā)的生長(zhǎng)周期主要包括3個(gè)時(shí)期，即生長(zhǎng)期、退行期和靜止期。Wnt信號(hào)通路對(duì)胚胎發(fā)育和組織器官形態(tài)發(fā)生起關(guān)鍵作用，特別是在毛囊發(fā)生及分化過(guò)程中。而β-catenin的穩(wěn)定性在經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路中是必需的。若缺乏βcatenin，干細(xì)胞就不能分化為毛囊角化細(xì)胞，而代之以向表皮細(xì)胞方向分化。轉(zhuǎn)基因鼠皮膚中持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)的β-catenin可使靜止期的毛囊向生長(zhǎng)期毛囊轉(zhuǎn)變并過(guò)度生長(zhǎng)；而短暫的β-catenin激活也會(huì)產(chǎn)生正常的毛囊生長(zhǎng)。說(shuō)明Wnt信號(hào)能維持毛乳頭處于毛發(fā)生長(zhǎng)初期的狀態(tài)，保持其誘導(dǎo)毛發(fā)生長(zhǎng)并誘導(dǎo)毛囊由靜止期向生長(zhǎng)期轉(zhuǎn)變的特性。

Waikel等[19]發(fā)現(xiàn)，β-catenin-Lef/Tcf信號(hào)通路及其下游靶點(diǎn)基因C-myc在皮膚干細(xì)胞分化過(guò)程中具有重要作用，C-myc表達(dá)下調(diào)可引起β1整合素表達(dá)減少，從而影響干細(xì)胞的遷移和分化。DasGupta等[20]的研究表明，在Wnt信號(hào)途徑激活的形態(tài)發(fā)生過(guò)程中，表皮細(xì)胞內(nèi)的β-catenin表達(dá)持續(xù)穩(wěn)定，會(huì)激發(fā)毛囊形態(tài)的發(fā)生；而在毛囊隆突部干細(xì)胞群的β-catenin表達(dá)沉默，則β-catenin-Lef/Tcf介導(dǎo)的信號(hào)途徑活動(dòng)喪失，最終引發(fā)毛囊干細(xì)胞向表皮細(xì)胞分化轉(zhuǎn)歸。位于隆突區(qū)的毛囊干細(xì)胞受調(diào)節(jié)后會(huì)向兩個(gè)方向發(fā)展：向上遷移和向下遷移的隆突上皮細(xì)胞沿著各自不同的途徑保持著毛發(fā)的生長(zhǎng)和表皮的更新。當(dāng)向下生長(zhǎng)的毛囊干細(xì)胞推移遠(yuǎn)離隆突后快速分裂的母質(zhì)TA細(xì)胞，隆突部的干細(xì)胞又會(huì)進(jìn)入常態(tài)的慢性周期循環(huán)中。經(jīng)過(guò)一段持續(xù)增長(zhǎng)后，TA細(xì)胞逐漸失去增殖能力，轉(zhuǎn)變?yōu)榻K末細(xì)胞，約2/3的毛囊會(huì)發(fā)生這種衍變。隆突部毛囊干細(xì)胞的后裔不僅能促進(jìn)頭發(fā)生長(zhǎng)，也能促使表皮和皮脂腺的增加，當(dāng)毛囊上部隆突處的子代細(xì)胞移行到表皮層后會(huì)不斷增殖，為表皮細(xì)胞的不斷更新提供了保障。

3.2.2 Tcf 3/Lef 1家族

淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Lymphoid enhancer factor，Lef）/T 細(xì)胞因子（T-cell factor，Tcf）是胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子家族。Tcf 3/Lef 1是Wnt信號(hào)通路下游的轉(zhuǎn)錄因子，激活特異性基因的轉(zhuǎn)錄，可啟動(dòng)下游的C-myc、cyclin D1等基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)。在皮膚中，Tcf 3通常作為轉(zhuǎn)錄的阻遏物，誘導(dǎo)相關(guān)基因負(fù)調(diào)控。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)能使Tcf 3陽(yáng)性毛囊細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)β-Catenin，結(jié)果使毛發(fā)周期過(guò)早激活。故Tcf 3的表達(dá)可能引起表皮細(xì)胞周期調(diào)控基因被抑制。而Lef1在毛囊基質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)豐富，在Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路中的β-Catenin的作用下，充當(dāng)轉(zhuǎn)錄激活物，促進(jìn)毛囊的分化。

Hoang等[21]證實(shí)，Tcf 3的激活，可誘導(dǎo)基因處于未分化、Wnt受抑制狀態(tài)。而且，被抑制的基因也抑制了參與調(diào)控分化的基因和轉(zhuǎn)錄因子（包括表皮、皮脂腺及毛囊分化的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子），使這3個(gè)終末分化通路被抑制。在缺乏Wnt信號(hào)下，Tcf 3會(huì)使皮膚表皮細(xì)胞維持在未分化狀態(tài)。而通過(guò)Wnt信號(hào)的調(diào)控，可使這些細(xì)胞向毛發(fā)方向分化。這些研究表明，Tcf 3可能抑制隆突區(qū)的細(xì)胞增殖及Wnt信號(hào)對(duì)干細(xì)胞活性的激活。

在毛發(fā)生長(zhǎng)周期的增長(zhǎng)階段，Tcf 3不僅在隆突區(qū)干細(xì)胞的靜止期中表達(dá)，同時(shí)在新形成的外根鞘（ORS）的外基底層表達(dá)。這些細(xì)胞被認(rèn)為是游離干細(xì)胞向毛囊基底轉(zhuǎn)化的代表。Tcf 3在轉(zhuǎn)基因鼠表皮的表達(dá)使外根鞘/隆突形態(tài)形成，說(shuō)明Tcf 3指定了某些特征（性狀）。在DNTcf 3表達(dá)而β-catenin缺失的相互作用域可有同樣表型，說(shuō)明在決定這些特性中Tcf 3的作用可能并不依賴于Wnt信號(hào)。

Zhu等[22]利用逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染角朊細(xì)胞，使細(xì)胞表達(dá)不同的β-catenin突變體，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氨基端截短的β-catenin突變體（因沒(méi)有GSK3β結(jié)合位點(diǎn)而不被降解）可增加培養(yǎng)細(xì)胞中干細(xì)胞克隆的比例。當(dāng)β-catenin表達(dá)升高，隆突部細(xì)胞向毛囊基質(zhì)細(xì)胞分化時(shí)，Tcf 3丟失，而Lef 1卻表達(dá)，可能與接受了Wnt信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)。當(dāng)轉(zhuǎn)基因小鼠表皮基底層表達(dá)截?cái)嗟腖ef 1時(shí)，其無(wú)法與β-catenin結(jié)合，毛發(fā)形成被終止，成體表皮基底細(xì)胞向多能胚胎樣外胚層轉(zhuǎn)變。這說(shuō)明Lef 1的表達(dá)使干細(xì)胞向毛發(fā)方向發(fā)展，促進(jìn)毛囊的分化。

Fathke等[23]采用小鼠背部全厚皮膚缺損的模型，檢測(cè)在創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程中不同時(shí)間段的Wnt蛋白表達(dá)情況，并用βgal報(bào)告β-catenin的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)無(wú)機(jī)物氯化鋰（LiCl）可抑制GSK-3β的活性，激活β-catenin/TEF信號(hào)通路，結(jié)果部分樣本觀察到皮膚附屬器的形成，包括簡(jiǎn)單的毛囊及皮脂腺結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步說(shuō)明了Lef在Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路中的β-Catenin作用下，充當(dāng)轉(zhuǎn)錄激活物，促進(jìn)毛囊的分化形成。

隨著毛囊干細(xì)胞作為皮膚組織工程種子細(xì)胞研究的不斷深入，人們對(duì)干細(xì)胞的增殖、分化調(diào)控機(jī)制的探索愈加重視。干細(xì)胞微環(huán)境外源性調(diào)控、內(nèi)源性調(diào)控以及各類(lèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路作用于毛囊干細(xì)胞等問(wèn)題的研究，可為解決臨床難題提供相關(guān)的理論基礎(chǔ)。Wnt信號(hào)通路，特別是Wnt/β-catenin-Lef/Tcf路徑，是毛囊干細(xì)胞重要的生長(zhǎng)調(diào)控信號(hào)，Wnt信號(hào)途徑中各種生物大分子、受體、配體和無(wú)機(jī)分子等以及各信號(hào)通路之間，相互作用而產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)，猶如瀑布級(jí)聯(lián)反應(yīng)。但尚有很多調(diào)控機(jī)制仍不明確，需要更深入地研究探索。

[1]Corsarelis G,Sun TT,Lavker RM,et al.Label-retaining cells reside in the bulge area of pilosebaceous unit:implications for follicular stem cells,hair cycle,and skin carcinogenesis[J].Cell,1990,61:1239-1337.

[2]Kobayashi K,Rochat A,Barrandon Y.Segregation of keratinocyte colony-forming cells in the bulge of the rat virissa[J].Proc Natl Acad Sci,1993,90(15):7391-7395.

[3]Rochat A,Kobayashi K,Barrandon Y.Location of stem cells of human hair follicles by clonal analysis[J].Cell,1994,76(6):1063-1073.

[4]Oshima H,Rochat A,Kedziaet C,et al.Morphogenesis and renewal of hair follicles from adult multipotent stem cells[J].Cell,2001,104(2):233-245.

[5]Li L,Penman S,Enikolopov G,et al.Multipotent nestin-positive,keratin-negative hair-follicle bulge stem cells can form neurons[J].PNAS,2005,102(15):5530-5534.

[6]Taylor G,Ehrer M,Jensen PJ,et al.Involvement of follicular stem cells in forming not only the follicle but also the epidermise[J].Cell,2000,102(4):451-461.

[7]Soosan G,Lorne BT.Multiple classes of stem cells in cutaneous epithelium:a lineage analysis of adult mouse skin[J].EMBO J,2001,20(6):1215-1222.

[8]Michel M,Torok N,Godbout MJ,et al.Keratin 19 as a biochemical marker of skin stem cells in vivo and in vitro:keratin 19 expressing cells are differentially localized in function of anatomic sites,and their number varies with donor age and culture stage[J].Cell Sci,1996,109(5):1017-1028.

[9]Morrison SJ,Spradling AC.Stem cells and niches:mechanisms that promote stem cell maintenance throughout life[J].Cell,2008,132(4):598-611.

[10]Suda T,Arai F.Wnt signaling in the niche[J].Cell,2008,132(5):729-730.

[11]Bartram U,Speer CP.The role of transforming growth factor beta in lung development and disease[J].Chest,2004,125(2):754-765.

[12]Lowell S,Jones P,Le Roux I,et al.Stimulation of human epidermal differentiation by delta-notch signaling at the boundaries of stem-cell clusters[J].Curr Biol,2000,10(9):491-500.

[13]Jones PH,Watt FM.Separation of human epidermal stem cells from transit amplifying cells on the basis of differences in integrin function and expression[J].Cell,1993,73(4):713-724.

[14]Kim DS,Cho HJ,Choi HR,et al.Isolation of human epidermal stem cells by adherence and the reconstruction of skin equivalents[J].Cell Mol Life Sci,2004,61(4):2774-2781.

[15]van Amerongen R,Mikels A,Nusse R.Alternative Wnt signaling is initiated by distinct receptors[J].Sci Signal,2008,1(35):9.

[16]Willert K,Nusse R.β-catenin:a key mediator of Wnt signaling[J].Current Opinion in Genetics&Development,1998,8:95-102.

[17]Kaihong Mi,Philip JD,Gail VW Johnson.The low density lipoprotein receptor-related protein 6 interacts with glycogen synthase kinase 3 and attenuates activity[J].J Biol Chem,2006,281:4787-4794.

[18]DasGupta R,Kaykas A,Moon RT,et al.Functional genomic analysis of the Wnt-wingless signaling pathway[J].Sci,2005,308(5723):801-803.

[19]Waikel RL,Kawachi Y,Waikel PA,et al.Deregulated expression of c-myc depletes epidermal stemcells[J].Nat Genet,2001,28:165-168.

[20]DasGupta R,Rhee H,Fuchs E.A developmental conundrum:astabilized form of β-catenin lacking the transcriptional activation domain triggers features of hair cell fate in epidermal cell and epidermal cell fate in hair follicle cells[J].J Cell Biol,2002,158:331-344.

[21]Hoang N,Michael R,Elaine F.Tcf 3 governs stem cell features and represses cell fate determination in skin[J].J Cell,2006,10(127):171-183.

[22]Zhu AJ,Watt FM.Beta-catenin signaling modulates proliferative potential of human epidermal keratinocytes independently of intercellular adhesion[J].Development,1999,126:2285-2298.

[23]Fathke C,Wilson L,Shah K,et al.Wnt signaling induces epithelial differentiation during cutaneous wound healing[J].BMC Cell Biology,2006,7:4.