沈培奇

（河南省泌陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 河南駐馬店 463700）

血細(xì)胞分析儀檢測各種血細(xì)胞參數(shù)簡單、快捷、重復(fù)性好,但很多外界因素都會(huì)影響其檢測的準(zhǔn)確性。EDTA-K2抗凝可引起少數(shù)人血小板發(fā)生聚集導(dǎo)致EDTA依賴性的假性血小板減少[1],同時(shí)還造成白細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)的偏高,引起臨床誤診。

1 臨床資料

1.1 檢測對象

2007年1月至2009年6月EDTA-K2抗凝有血小板聚集的患者9例,其中男4例,女5例;年齡13～58歲,平均為39歲。臨床表現(xiàn):均無皮膚粘膜出血點(diǎn)、紫癜等明顯出血征象。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 血細(xì)胞分析儀 為雅培CD--37005分類血細(xì)胞分析儀;Ol ympus公司生產(chǎn)的雙目顯微鏡BH-2。

1.2.2 試劑(溶血?jiǎng)⑾♂屢?、清洗? 為儀器配套試劑,EDTA-K2真空抗凝管(滄州永康醫(yī)藥用品有限公司),鹽酸稀釋液、草酸銨血小板稀釋液及瑞氏染液。全血校準(zhǔn)液及全血質(zhì)控物由四川邁克科技有限公司提供。

2 方法

標(biāo)本用CD---3700血液分析儀檢測,對血小板計(jì)數(shù)值低于50×109/L的418例患者的標(biāo)本,經(jīng)儀器初檢同時(shí)取同份血進(jìn)行血涂片觀察血小板分布情況,發(fā)現(xiàn)明顯不符的9例,征得患者同意復(fù)檢:手工血小板計(jì)數(shù)、血涂片觀察血小板數(shù)量、形態(tài)及血小板聚集情況。同時(shí)取血檢測其它有關(guān)檢驗(yàn)如凝血功能、纖維蛋白溶解試驗(yàn)等。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以（±s）表示,應(yīng)用配對t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

EDTA-K2抗凝血用CD-3700血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù),血小板計(jì)數(shù)值明顯降低,僅8×109～45×109/L,手工血小板計(jì)數(shù)復(fù)查結(jié)果為135×109～268×109/L;儀器法血小板計(jì)數(shù)明顯低于手工法,差異均有顯著性(P<0.01)。血涂片鏡檢對照分析:末梢血直接涂片顯示血小板數(shù)量不少,分布無明顯異常,EDTA抗凝血涂片顯示血小板明顯聚集成簇(每簇中血小板數(shù)大于15個(gè))甚至成片(血小板數(shù)約50～100個(gè)),且多分布在片尾部,極少見血小板單獨(dú)存在。二者差異有顯著性(P<0.05)。其它相關(guān)項(xiàng)目正常。

4 結(jié)語

CD-3700血細(xì)胞分析儀的檢測原理是電阻抗法:當(dāng)有血小板聚集或存在大血小板且不被溶血素溶解時(shí),儀器可誤將聚集成團(tuán)的血小板當(dāng)作白細(xì)胞計(jì)數(shù),引起血小板的假性偏低。EDTA-K2偶爾會(huì)引起血小板的聚集,可能與血小板表面存在某種隱匿性抗原有關(guān)。Bragnani G等認(rèn)為,EDTA可導(dǎo)致血小板活化,因而改變血小板膜表面某種隱匿性抗原構(gòu)象,促使血小板與纖維蛋白原聚集成團(tuán),出現(xiàn)使血小板互相凝集現(xiàn)象［2］。EDTA致血小板假性減少發(fā)生率極低,約為0.07%～1%,但一旦發(fā)生,會(huì)導(dǎo)致臨床進(jìn)行大量的進(jìn)一步檢查,甚至可能引起臨床誤診、誤治。血液放置時(shí)間不同也會(huì)引起血小板數(shù)量變化,儀器法測定血小板數(shù)在采血后60min計(jì)數(shù)結(jié)果最準(zhǔn)［3］。另外,采血的過程及血液和抗凝劑的比例都很重要,采血速度慢、多次穿刺和血液比例過高都可能引起血小板凝集,堵塞儀器而無法測得真實(shí)的結(jié)果。對于血小板計(jì)數(shù)值有疑問的標(biāo)本,直接用EDTA抗凝血標(biāo)本進(jìn)行血涂片經(jīng)瑞氏染色后,顯微鏡下觀察血小板分布情況,如見血小板大量聚集或血小板分布并不減少者,可視為可疑病例并進(jìn)一步復(fù)檢確診。當(dāng)出現(xiàn)PTCP(抗凝劑依賴的假性血小板減少癥患者,可在血常規(guī)樣品抽血后1H內(nèi)加入6.5mg/mL丁安卡那霉素能有效解離凝集的血小板,作用機(jī)制可能與抑制患者血小板膜表面CD62P、PAC—1和IgG的表達(dá)有關(guān),此法有助于解決EDTA所致的血小板計(jì)數(shù)的假性減少［4］。

[1]郝婉瑩.EDTA-K2依賴性假性血小板減少癥(PTCP)一例報(bào)道[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,5∶24.

[2]李明,王超.魯家才.EDTA依賴性血小板聚集導(dǎo)致血細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差分析[J].華中醫(yī)學(xué)雜志,2004,28(4)∶269.

［3］程暉,劉更夫,袁桂榮.血小板計(jì)數(shù)偏低誤差實(shí)驗(yàn)探討及對策[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,21(5)∶91～92.

［4］詹榮庭,張明強(qiáng).氯氮平劑量與血小板減少的關(guān)系[J].臨床精神醫(yī)學(xué)雜志,2008,6∶386.