王寶慶,李學(xué)彬,田志發(fā),孫凱云,邢桂菊,高文遠(yuǎn)

(1.天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,天津 300072;2.牡丹江市藥品檢驗(yàn)所,黑龍江 牡丹江 157011)

穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷(Dioscorea nipponica Makino.)的干燥根莖。味甘苦溫,具有祛風(fēng)濕,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效。主治風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,筋骨麻木,大骨節(jié)病,跌撲損傷,慢性支氣管炎、咳嗽氣喘。民間多用其浸酒或煎服,為東北地區(qū)常用草藥。穿山龍中含有薯蕷皂苷元,也是較好的合成甾體激素藥的原料之一[1],現(xiàn)已成為醫(yī)藥工業(yè)原料。本文從7個(gè)方面綜述現(xiàn)代研究進(jìn)展。

1 生藥學(xué)研究

穿山龍?jiān)跉v代本草著作中無(wú)此藥名,《植物名實(shí)圖考》所載穿山龍非薯蕷科植物。今考證《圖經(jīng)本草》中所指的成德軍萆薢很可能就是這一種,因《名醫(yī)別錄》載“生真定山谷”,即今河北正定縣;再?gòu)氖硎毧浦参镌谖覈?guó)的分布來(lái)看,我國(guó)黃河以北,除山藥(Dioscorea opposita Thunb.)外,只有穿龍薯蕷(D.nipponica Miq.)一種。

2 化學(xué)成分

根莖主要含薯蕷皂苷(Dioscin)、薯蕷皂苷元(Diosgenin)、25-△-螺旋甾-3,5-二烯(25-△-Spirosta-3,5-diene)、纖細(xì)薯蕷皂苷(Gracillin)、穗菝葜甾苷(Asperin)、25-D-螺甾-3,5-二烯(25-D-Spirosta-3,5-diene)及對(duì)羥基芐基酒石酸(Piscidic acid)[2-4]?？傇碥账猱a(chǎn)生薯蕷皂苷元(Diosgenin)。薯蕷皂苷元的平均含量為0.93%～2.26%[5]。

3 成分分析

3.1 鑒別

3.1.1 檢查皂苷。取本品粉末約2g,加入水30m L,水浴上加熱10min,濾過(guò)。取水提液2m L,置于具塞試管中,振搖1min,產(chǎn)生大量蜂窩狀泡沫,放置10min,泡沫沒(méi)有明顯的消失。

3.1.2 檢查皂苷。取上述水提取液2m L,加入2%紅血球混懸液5～10滴,放置數(shù)min,血液逐漸被溶解使得提取液呈紅色透明液。

3.1.3 檢查皂苷。取本品粉末2g,加80%乙醇加熱浸提,過(guò)濾,濾液蒸去乙醇,放冷,殘?jiān)苡谏倭看姿嶂?加醋酐和濃硫酸數(shù)滴,應(yīng)呈紫紅色。

3.1.4 薄層色譜。樣品制備:取本品粉末5g,加2mol/L鹽酸約60m L,水浴上加熱水解3.5h,放冷濾過(guò),殘?jiān)盟粗林行?烘干(80～100℃),加石油醚(60～90℃)回流提取4h,提取液蒸干后,殘?jiān)寐确氯芙庵羖0m L。吸附劑;1%CMC硅膠板。展開(kāi)劑∶氯仿-丙酮(93∶7)。顯色劑:3%磷鉬酸溶液,加熱后顯藍(lán)色。結(jié)果有與薯蕷皂苷元和25-D-螺甾-3,5-雙烯相對(duì)應(yīng)的斑點(diǎn)[6]。

3.2 含量測(cè)定

3.2.1 重量法。將新鮮樣品100成薄片,加等量水高速攪拌5min,加3.5mol/L鹽酸溶液115m L回流水解3h,室溫冷卻后,用布氏漏斗過(guò)濾,殘?jiān)盟?0m L洗8～10次后干燥。將此干燥的殘?jiān)蒙呈咸崛∑髦杏檬兔?30～60℃)提取8h,將提取液濃縮至10m L,在室溫放置2h,此時(shí)有薯蕷皂苷元的白色結(jié)晶析出,垂熔漏斗過(guò)濾,結(jié)晶用溶劑洗2次,在室溫放置30min,105℃干燥30min后稱重,計(jì)算薯蕷皂苷元的含量。

3.2.2 比色法。薯蕷皂苷元可與下列試劑顯色;甲醛-硫酸、改良的Liebermann試劑、硫酸、濃硫酸-甲醇、三氯化銻的硝基苯溶液、高氯酸-70%高氯酸-24%五氯化銻的70%高氯酸溶液以及茴香醛乙醇溶液-磷酸,可利用這些顏色反應(yīng)進(jìn)行比色測(cè)定。有濃硫酸-甲醇法、改良的Liebermam試劑法、三氯化銻法。

3.2.3 薄層掃描法。取樣品提取液點(diǎn)在硅膠G薄層板上,以羊毛甾醇為內(nèi)標(biāo)物,濃度為 6.67μg/10μL,以已烷-丙酮(4∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi)后在空氣中干燥10min,噴飽和的三氯化銻氯仿溶液。在 100℃加熱8min,40min后在470nm測(cè)定斑點(diǎn)面積。

3.2.4 高效液相色譜法。穿龍薯蕷中薯蕷皂苷元的含量測(cè)定 。

3.2.4.1 色譜條件。Shim-pacd CLC-Sil色譜柱(150mm×6.0mm),流動(dòng)相:石油醚-異丙醇(98∶2),檢測(cè)波長(zhǎng):206nm,流速:l.2m L/min,靈敏度0.08AUFS,柱溫:室溫。

3.2.4.2 色譜條件[7]。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相∶乙腈-水(55∶45);檢測(cè)波長(zhǎng):203nm。

3.2.5 毛細(xì)管氣相色譜法。穿龍薯蕷總皂苷中薯蕷皂苷元的含量測(cè)定[8]。

色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)。色譜柱為HP-1(Methylsiloxane)30.0m ×320μL×0.25μm 不銹鋼毛細(xì)管柱,柱溫 2700C,柱頭壓23.7kPa,汽化室溫度330℃,檢測(cè)器溫度310℃,載氣(N2)流速2.0m L/min,分流比40∶1,進(jìn)樣量2μL。在本色譜條件下,對(duì)照品峰與雜質(zhì)峰沒(méi)有重疊,分離效果好(分離度為11.21),分析速度快(tR約為6.40min),理論塔板數(shù)按薯蕷皂苷元計(jì)算為28756(n=3,RSD=l.6%)。

4 制劑

其制劑有穿山龍片、穿山龍注射液、穿山龍冠心靈等。

5 藥理研究

5.1 免疫調(diào)節(jié)

穿山龍對(duì)細(xì)胞免疫及體液免疫均有抑制作用。給小鼠連續(xù)7日皮下注射15g/kg煎劑,出現(xiàn)小鼠胸腺萎縮,淋巴細(xì)胞數(shù)減少,井抑制二硝基氯苯誘導(dǎo)皮膚遲發(fā)型超敏反應(yīng)細(xì)胞免疫和溶血素的形成(體液免疫)。穿山龍不但對(duì)特異性免疫功能有抑制作用,還對(duì)非特異性免疫功能有增強(qiáng)作用,使小鼠腹腔巨噬功能及血清溶菌酶水平升高。

5.2 抗動(dòng)脈粥樣硬化

給正常貓及實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣化兔灌服或靜脈注射薯蕷總皂苷5g/kg后,可使血漿膽固醇下降,減輕主動(dòng)脈脂質(zhì)浸潤(rùn)[9]。

5.3 其他藥理作用

5.3.1 毒性。小鼠靜注總皂苷 LD50為750mg/kg,小鼠灌服總苷60～180mg/kg共7周,對(duì)血漿、肝功及主要臟器無(wú)影響[9]。

5.3.2 止咳祛痰、平喘。復(fù)方注射液可用于老年慢性氣管炎[9]。

5.3.3 強(qiáng)心。提取物及總皂苷可使離體和在體蛙心收縮加強(qiáng),使血管擴(kuò)張[9]。

5.3.4 抗菌抗病毒。水煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、卡他球菌、腦膜炎雙球菌,甲鏈球菌及流感病毒等有明顯抑制作用[10]。

6 臨床研究

6.1 治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

穿山龍注射液(1g/m L,2m L)肌注治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎45例,顯效率40%,好轉(zhuǎn)率43.3%,總有效率83.3%,無(wú)明顯副作用,近期療效較好[11]。民間用本品泡酒煎服,治療筋骨麻木,風(fēng)濕痹痛。

6.2 治療冠心病心絞痛

穿山龍根莖以水及乙醇為溶劑提取,經(jīng)乙醚沉淀制得穿龍冠心寧。經(jīng)臨床證明,對(duì)冠心病心絞痛有顯著療效,有效率為90.68%;對(duì)心悸、氣短、胸悶等癥狀有較好療效,有效率為77.30%,能改善冠狀動(dòng)脈供血不足;對(duì)冠心病合并高血壓有一定降壓作用,對(duì)高甘油三酯血癥有較好療效[12]。四川生物研究所用復(fù)方穿山龍冠心靈治療冠心病、心絞痛等也有較好療效。

6.3 治療慢性支氣管炎

穿山龍飲片水煎劑治療37例,總有效率為86%;穿山龍片治療142例者,有效73例,占61%,顯效以上47例,占33%。從分型來(lái)看,對(duì)單純型和虛阻型療效較高,有效率分別為86%和82%。對(duì)咳、喘、痰均效果良好,對(duì)反復(fù)感染的痰阻型效果很差。其作用特點(diǎn)是起效較慢,但持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。此外,還可使患者食欲增加,握力增加。對(duì)感冒引起的急性發(fā)作,合并呼吸道感染咯黃痰者,單用穿山龍效果不夠明顯,加服黃芩水煎液則療效顯著[13]。

6.4 治療慢性布魯菌病

許友璋報(bào)道了用穿山龍、秦艽、黃芪制成復(fù)方穿山龍注射液治療布魯菌病68例,治愈率75%[14]。

6.5 治療脂肪瘤

用穿山龍250g,在2000m L 60度的白酒中浸泡半月,治療一肩周炎患者,結(jié)果對(duì)肩周炎療效不大,但患者臀部20余年的雞蛋大的脂肪瘤竟意外地變軟、縮小,連服3個(gè)月,瘤體全部消失,在此期間患者未服其他藥物[15]。

7 小結(jié)和討論

綜上所述,20世紀(jì)80年代以前對(duì)穿山龍的研究側(cè)重于其有效成分、藥理和臨床應(yīng)用方面,取得了許多有價(jià)值的成果,但多是單味藥的研究。有必要運(yùn)用現(xiàn)代分析手段,加強(qiáng)其復(fù)方配伍的研究。由于甾體激素類(lèi)藥物的臨床療效獨(dú)特,穿山龍中薯蕷皂苷元又是合成甾體激素的主要原料之一,薯蕷皂苷元的發(fā)現(xiàn)和利用為獲得資源豐富和經(jīng)濟(jì)的天然甾體原料開(kāi)辟了途徑。因此,人們逐漸開(kāi)始重視穿山龍的資源開(kāi)發(fā),從穿山龍有性繁殖的研究、生物學(xué)特性、野生變家種的試驗(yàn)等探討其馴化為人工栽培的可能性和必要性;同時(shí),不斷地探索薯蕷皂苷元和薯蕷皂苷的提取工藝,提高其產(chǎn)率。如果能利用現(xiàn)代制劑技術(shù),研制出高效的穿山龍新制劑,提高對(duì)這些疾病的遠(yuǎn)期療效,將有著重要的科學(xué)價(jià)值和社會(huì)意義。

[1]陳延鏞.甾體皂甙元的生產(chǎn)現(xiàn)狀[J].醫(yī)藥工業(yè),1985,16(1):32.

[2]陰健,郭力弓.中藥現(xiàn)代研究與臨床應(yīng)用[M].北京:中醫(yī)古籍出版社,1997:370.

[3]何寶俊,劉振庸,金光石,等.穿山龍水溶性有效成分的研究Ⅰ——對(duì)-羥芐基酒石酸的分離和鑒定[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1980,15(12):764.

[4]方一葦,趙家俊,賀玉珍,等.穿龍薯芋中兩種水難溶性甾體皂甙的結(jié)構(gòu)研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1982,17(5):388.

[5]周繼銘,楊家珍,周澤清.四川地區(qū)薯蕷屬植物中薯蕷皂甙元的含量[J].中藥材,1985(4):20.

[6]肖培根主編.新編中藥志(第一卷)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:745.

[7]中國(guó)藥典2010年版[S].一部.2010:250.

[8]都述虎,王曉華,夏重道,等.RP-HPLC法測(cè)定穿龍薯蕷總皂甙中薯蕷皂甙元的含量[J].藥物分析雜志,2001,21(2):116.

[9]王浴生.中藥藥理與應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1983:817.

[10]冉先德.中華藥典(上冊(cè))[M].哈爾濱:哈爾濱出版社,1998:668.

[11]郭晉才.穿山龍治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J].陜西中醫(yī),1986,7(6):172.

[12]孫學(xué)高,張志敏.穿山龍治療脂肪瘤1例報(bào)告[J].山東醫(yī)藥,1990,30(4):56.