呂長淮，吳 瑋，胡 丹

（安徽省宿州市藥品檢驗所，安徽宿州 234000）

不溶性微粒指除氣泡外可流動的、隨機(jī)存在于液體制劑包括滅菌粉針劑所制成的液體中的不溶性外來物質(zhì)。不溶性微粒檢查指檢查靜脈用注射劑（溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液）及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大小及數(shù)量[1]。檢查注射液中不溶性微粒的方法主要有顯微計數(shù)法和光阻法?！吨袊幍洹?000年版將光阻法收錄作為檢查注射液中不溶性微粒第二法，用以檢查100 ml以上注射液，2005年版將其改為第一法，作為注射液中不溶性微粒檢查的首選方法，適用范圍擴(kuò)大為100 ml以下小容量注射液及注射用無菌粉末，2010年版將適用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大至供靜脈注射用無菌原料藥。光阻法具有操作簡單、快速、靈敏、自動化及智能化程度高、取樣體積準(zhǔn)確等特點，是目前注射液中不溶性微粒檢測較為先進(jìn)的技術(shù)，被各國藥典廣泛收錄作為控制注射液質(zhì)量的重要方法。在近年來的應(yīng)用研究中發(fā)現(xiàn)，光阻法檢查注射液中不溶性微粒過程中存在諸多影響因素，現(xiàn)對其影響因素作一歸納概述，以便在標(biāo)準(zhǔn)修訂時參考，使檢測方法更趨合理完善。

1 取樣方式的影響

光阻法檢測注射液中不溶性微粒的取樣方法，《中國藥典》2005年版和2010年版規(guī)定：25 ml及25 ml以上的注射液，采取直接傾注法檢測；25 ml以下的注射液，采取直接取樣或合并取樣；對于注射用無菌粉末和黏度大的注射液可稀釋后再測定。

1.1 小容量注射液全體積取樣方式的影響

小容量注射液全體積取樣法（單支直測法）能觀察每支情況，污染機(jī)會少，可考察多支安瓿檢查結(jié)果的重現(xiàn)性，體現(xiàn)出瓶間差異，但實際操作中存在以下影響因素。①全體積取樣時，第一瓶或前幾瓶的讀數(shù)應(yīng)棄去，至少需5~10 ml，使管道被所測樣品充滿，有些樣品與管道中水相混的過程可能會產(chǎn)生氣泡、乳光等現(xiàn)象，使測定數(shù)據(jù)偏高。②對于一些水溶性差的樣品，如果用全體積法測定，樣品在管道中與水相混時，可能會在局部析出沉淀，不僅使測定結(jié)果偏高，甚至造成管路堵塞。③全體積取樣操作較難控制，暫停鍵按慢了，管路吸入空氣，使結(jié)果偏高；暫停鍵按早了，樣品不能完全抽取，結(jié)果偏低[2]。④小體積注射液全體積取樣時，偶有劑量不足或取樣頭位置離開液面等原因造成管內(nèi)有氣泡產(chǎn)生。⑤某些安瓿底部中間突起，全體積取樣時，須將取樣針沿安瓿壁插入底部，盡可能多地抽取溶液，一般每支測定時總要剩下0.1 ml藥液，取樣針可保留0.3~0.4 ml的樣品，再加上瓶內(nèi)殘存的死體積，對于1 ml、2 ml等小規(guī)格的樣品，全體積取樣幾乎不可能實施，操作不當(dāng)即可吸入氣泡[3]。⑥安瓿在割鋸掰開時，會大量引入微粒[4]，在開啟瓶口時，瓶口會有碎玻璃屑或粉塵落入瓶中，使測定數(shù)據(jù)偏高。

1.2 小容量注射液合并取樣方式的影響

對于1 ml、2 ml等小規(guī)格不宜采用全體積取樣的樣品，采用合并取樣時也存在影響因素。①小規(guī)格注射液合并取樣時取樣量大，用砂輪割鋸安瓿會大量增加微粒，實際操作中，如果割鋸后直接掰開，會大量引入微粒，使測定數(shù)據(jù)偏高。盡管在用砂輪割鋸安瓿后用微粒檢查用水淋洗劃痕，在安瓿掰開時，仍會有玻璃屑或粉塵落入安瓿內(nèi)，使測定數(shù)據(jù)偏高。②合并取樣體積在30 ml以下測量時，因藥液量少，攪拌器露出水面將氣泡帶入探頭中，使測值出現(xiàn)異常[5]。

2 儀器對測定的影響

微粒檢測儀器自身也存在干擾因素，如微氣泡、靜電凝集等均可產(chǎn)生假性微粒[6]。注射用粉針劑用純凈水溶解后，用兩臺儀器分別測定，結(jié)果差異較大，可能與儀器的傳感器分辨率、微粒計數(shù)的準(zhǔn)確性等因素有關(guān)[7]，還可能與儀器設(shè)計原理、儀器光路以及儀器的標(biāo)定有關(guān)[8]。

3 其他影響因素

3.1 顏色的影響

部分顏色較深的注射液光阻法測定其不溶性微粒計數(shù)結(jié)果偏高，可能是由于光束無法穿透深色樣品池，如復(fù)方丹參注射液和當(dāng)歸注射液，但用顯微計數(shù)法測定計數(shù)結(jié)果相對較低[9]。

3.2 黏度的影響

黏度大的注射液也會影響測定，直接測定會造成儀器管路堵塞，應(yīng)用純化水或適宜溶劑稀釋后測定。

3.3 析出結(jié)晶的影響

易析出結(jié)晶的注射液，易堵塞管路，也不適宜采用光阻法測定。邱逢鋼等[10]探討用光阻法測定甘露醇注射液不溶性微粒，測定時將甘露醇注射液在30℃水浴上加熱20 min，使藥液溫度保持在25~30℃，再采用光阻法檢測，可以克服測試過程中因析出結(jié)晶發(fā)生微孔管堵塞，使測定順利進(jìn)行，為易析出結(jié)晶注射液的測定提供了可行的方法。

3.4 攪拌速度

藥液的攪拌速度對測定結(jié)果也有影響，而且不同品種影響程度不同[11]。

4 結(jié)語

光阻法作為檢測注射液中不溶性微粒的主要方法，已顯示出其優(yōu)越性；但由于存在如上所述的影響因素，使得檢測結(jié)果有時會有偏差，適用范圍有一定的局限性。所以《中國藥典》2005年版和2010年版雖然將光阻法作為首選方法，但仍保留了顯微計數(shù)法，當(dāng)光阻法測定結(jié)果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測定時，應(yīng)采用顯微計數(shù)法進(jìn)行測定，并以顯微計數(shù)法的測定結(jié)果作為判定依據(jù)，保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

正因為光阻法檢測注射液中不溶性微粒存在諸多干擾因素，使其研究領(lǐng)域和范圍不斷向縱深拓展，采用統(tǒng)計學(xué)手段對小容量注射劑不溶性微粒測定結(jié)果進(jìn)行分析，可獲知其不溶性微粒污染的統(tǒng)計學(xué)特征，從而有助于在整體上了解小容量注射劑不溶性微粒污染的現(xiàn)狀[12]。對注射液[13]和注射用無菌粉末[14]不溶性微粒光阻法檢查結(jié)果進(jìn)行不確定度分析，以找出影響不確定度的因素。隨著光阻法技術(shù)應(yīng)用研究的深入，影響測定的因素會逐步得到解決，光阻法檢測注射液中不溶性微粒這一先進(jìn)技術(shù)在控制靜脈用注射劑質(zhì)量上將會發(fā)揮越來越重要的作用。

[1]國家藥典委員會.中國藥典(二部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:附錄71.

[2]陳?？?彭興盛,陳桂良.小容量注射液和注射用無菌粉末中不溶性微粒的測定方法研究[J].藥學(xué)實踐雜志,2004,22(2):89.

[3]傅蘭,趙玉珍,李會娥,等.小容量靜脈注射劑中不溶性微粒檢查的經(jīng)驗體會[J].藥物分析雜志,2005,25(9):1142.

[4]毛璐,甄健存,陳志剛.塑料及玻璃安瓿開啟方法對注射劑不溶性微粒污染的影響[J].中國藥事,2005,19(11):664.

[5]王暉,徐騰.小容量注射液不溶性微粒檢查取樣方法的考察[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報,2009,25(4):377.

[6]吳紅衛(wèi),楊澤民,陳潔生,等.注射液不溶性微粒兩種檢查法的對照[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報,2003,19(2):132.

[7]唐素芳.光阻法考察小容量注射液和注射用無菌粉末中的不溶性微粒[J].中國藥事,2008,22(6):503.

[8]陳?？?彭興盛,陳桂良.小容量注射液和注射用無菌粉末中不溶性微粒的測定方法研究[J].藥學(xué)實踐雜志,2004,22(2):89.

[9]胡漢昆,吳菁,劉萍.光阻法檢查注射液中不溶性微粒時的影響因素[J].中成藥,2003,25(3):257.

[10]邱逢鋼,鄭本忠.光阻法檢查甘露醇注射液不溶性微粒[J].海峽藥學(xué),2004,16(1):56.

[11]任淑玲.關(guān)于《中國藥典》2000年版二部注射液中不溶性微粒檢查法存在的一些問題[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn),2003,4(5):12.

[12]葉小敏,諶敏,高秋芳,等.小容量注射劑不溶性微粒污染特征的統(tǒng)計學(xué)分析[J].藥物分析雜志,2009,29(6):984.

[13]范志云,程春雷,劉琦,等.對丹參注射液不溶性微粒檢查的不確定度的評定[J].中國藥事,2008,22(3):235.

[14]邱海強(qiáng),劉曉瑜.注射用頭孢呋辛鈉不溶性微粒檢查的不確定度分析[J].藥學(xué)與臨床研究,2008,16(4):325.