陳先榮，李 智，劉一平

(株洲市二醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 株州 412005)

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展使得具有測(cè)定速度快、結(jié)果穩(wěn)定、使用方便等優(yōu)點(diǎn)的全自動(dòng)生化分析儀大量進(jìn)入各醫(yī)療單位。由于標(biāo)本量大、各種技術(shù)檢測(cè)項(xiàng)目不一等原因，在一些大、中型實(shí)驗(yàn)室里特別是標(biāo)本量很大的獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室里常擁有多臺(tái)生化分析系統(tǒng)。我實(shí)驗(yàn)室除了現(xiàn)使用的德國(guó)羅氏Modular P800全自動(dòng)生化分析儀外，近期又新安裝了羅氏Cobas6000 C501全自動(dòng)生化分析儀。該分析儀是羅氏診斷公司于近年推出的一款新產(chǎn)品，具有試劑完全條形碼掃描功能、自動(dòng)化程度很高、精密度高等特點(diǎn)。為保證檢測(cè)結(jié)果的一致性，我實(shí)驗(yàn)室按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)EP9-A文件的要求[1]，對(duì)兩臺(tái)不同型號(hào)的生化分析儀檢測(cè)的常規(guī)生化項(xiàng)目結(jié)果進(jìn)行了比對(duì)分析，結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1儀器和試劑 德國(guó)羅氏Modular P800全自動(dòng)生化分析儀及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、肌酐(CREA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、葡萄糖(GLU)、淀粉酶(AMY)、鉀(K)、鈉(NA)、氯(CL)、總鈣(CA)、鎂(MG)20個(gè)生化項(xiàng)目的的原裝配套試劑及校準(zhǔn)品；德國(guó)羅氏Cobas6000 C501全自動(dòng)生化分析儀及上述20個(gè)項(xiàng)目的原裝配套試劑、校準(zhǔn)品。

1.1 .2質(zhì)控品 美國(guó)伯樂公司質(zhì)控品。

1.1 .3樣本 為我醫(yī)院送檢的新鮮病人標(biāo)本，其濃度選擇按照EP9-A文件中方法對(duì)比試驗(yàn)數(shù)據(jù)分布建議表的要求，盡可能覆蓋檢測(cè)范圍，特別注意地覆蓋了醫(yī)學(xué)決定水平，并且留有足夠的量利于重復(fù)性檢測(cè)。

1.2 方法

1.2 .1方法的選擇 以德國(guó)羅氏Modular P800全自動(dòng)生化分析儀為比對(duì)儀器(X)，以羅氏Cobas6000 C501全自動(dòng)生化分析儀為實(shí)驗(yàn)儀器(Y)。

1.2 .2儀器校準(zhǔn) 在熟悉評(píng)價(jià)方案后，用各自原裝配套的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，保證儀器檢測(cè)結(jié)果的量值溯源性。

1.2 .3質(zhì)量控制 使用伯樂公司的第三方質(zhì)控品為質(zhì)控血清分別在兩臺(tái)生化分析儀上做日常室內(nèi)質(zhì)控，保證結(jié)果的穩(wěn)定性。

1.2 .4樣品的測(cè)定 由專業(yè)技術(shù)人員嚴(yán)格按照本檢驗(yàn)中心的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程分別用羅氏Modular P800和羅氏Cobas6000 C501每日選8個(gè)病人樣本，每個(gè)病人樣本進(jìn)行雙份測(cè)定，分成5天進(jìn)行，共完成40個(gè)標(biāo)本測(cè)定。

2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)血清測(cè)定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析按照NCCLS EP9-A的要求在EXCEL 2003上編制程序進(jìn)行分析，將40個(gè)標(biāo)本在兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)定結(jié)果(Xij，Yij)輸入X、Y列，電腦EXCEL2003軟件自動(dòng)計(jì)算并繪制成相應(yīng)的圖表。主要內(nèi)容有：(1)進(jìn)行方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢驗(yàn)；(2)比對(duì)方法(X)測(cè)定范圍的檢驗(yàn)，如 γ≥0.975(或 γ2≥0.95)，則認(rèn)為 X 取值范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠；(3)計(jì)算回歸方程y=bx+a；(4)計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差：根據(jù)臨床需要，將常規(guī)化學(xué)20個(gè)項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平濃度(Xc)代入回歸方程，計(jì)算實(shí)驗(yàn)方法(Y)與比對(duì)方法(X)之間的系統(tǒng)誤差(SE)，SE=|Yc-Xc|=|(b-1)Xc+a|；SE%=(SE/Xc)×100%。按照美國(guó)國(guó)會(huì)通過的臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案(Clinical Laboratory Amendment,CLIA’88)允許變異偏差進(jìn)行結(jié)果判斷。

3 結(jié)果

3.1 病人標(biāo)本20項(xiàng)常規(guī)化學(xué)測(cè)定結(jié)果的離群點(diǎn)檢驗(yàn)：通過方法內(nèi)和方法間離群點(diǎn)的分析，比對(duì)方法(X)絕對(duì)偏差限值、相對(duì)偏差限值、實(shí)驗(yàn)方法(Y)絕對(duì)限值、相對(duì)偏差限值、方法間絕對(duì)偏差限值、方法間相對(duì)偏差限值分別見表1。經(jīng)比較，本實(shí)驗(yàn)中兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)20個(gè)常規(guī)化學(xué)測(cè)定數(shù)據(jù)無離群點(diǎn)存在。

3.2 線性相關(guān)性的檢驗(yàn)：在EXCEL2003軟件中，用函數(shù)CORREL計(jì)算得到各個(gè)項(xiàng)目的相關(guān)系數(shù)(γ)，見表2。從表2中可判斷所有項(xiàng)目的相關(guān)系數(shù)γ均滿足EP9-A文件中γ≥0.975的要求，則可判斷X值取值范圍合適，可用簡(jiǎn)單的直線回歸來估計(jì)斜率和截距。

3.3 回歸方程：在EXCEL2003軟件中，分別用函數(shù)LINEST和INTERCEPT計(jì)算斜率和截距，得到相應(yīng)的回歸方程，見表2。

結(jié)果顯示，兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)病人血清20個(gè)常規(guī)化學(xué)測(cè)定結(jié)果間具有良好的相關(guān)性和可比性。

表1 方法內(nèi)和方法間離群點(diǎn)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.4 羅氏Coabas6000 C501檢測(cè)系統(tǒng)常規(guī)化學(xué)檢測(cè)結(jié)果偏倚分析：本研究選定20個(gè)常規(guī)化學(xué)項(xiàng)目的CLIA’88醫(yī)學(xué)決定水平[2]計(jì)算羅氏Coabas6000 C501檢測(cè)系統(tǒng)的預(yù)期偏差。向20個(gè)常規(guī)化學(xué)定值欄中分別輸入各個(gè)項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平數(shù)值，EXCEL2003按照編制程序計(jì)算其系統(tǒng)預(yù)期偏差和相對(duì)偏差的結(jié)果，見表2。結(jié)果顯示，所有20個(gè)項(xiàng)目的預(yù)期偏差和相對(duì)偏均小于CLIA’88允許誤差的二分之一，證實(shí)兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的20個(gè)常規(guī)化學(xué)結(jié)果具有良好的一致性，兩個(gè)系統(tǒng)所測(cè)常規(guī)生化20個(gè)項(xiàng)目在分析范圍內(nèi)的相對(duì)偏差較小可滿足臨床要求。

4 討論

隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，檢驗(yàn)技術(shù)的不斷分支，檢測(cè)項(xiàng)目的不斷增多，檢驗(yàn)質(zhì)量的控制變得越來越重要，ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)展的必經(jīng)之路。ISO 15189文件指出：“當(dāng)同樣的檢驗(yàn)應(yīng)用不同程序或設(shè)備，或在不同地點(diǎn)進(jìn)行，或以上各項(xiàng)均不同時(shí)，應(yīng)有確切機(jī)制以驗(yàn)證在整個(gè)臨床適用區(qū)間內(nèi)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性”。應(yīng)按適合于程序和設(shè)備特性的規(guī)定周期驗(yàn)證[3]。因?yàn)榧词姑颗_(tái)儀器工作性能穩(wěn)定、室內(nèi)質(zhì)控正常，但不同的檢測(cè)系統(tǒng)相同項(xiàng)目之間的結(jié)果也可能存在系統(tǒng)誤差[4-5]，因此要使每一項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果符合質(zhì)量要求，除了要有標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)格的質(zhì)量控制外，還必須要對(duì)使用的檢測(cè)系統(tǒng)做嚴(yán)格的選擇和評(píng)價(jià)，確定它的不精密度、不準(zhǔn)確度、患者結(jié)果可報(bào)告范圍、分析靈敏度、分析干擾、參考范圍和其他需說明的性能，為保證不同檢測(cè)系統(tǒng)之間的結(jié)果具有可比性有必要對(duì)不同的檢測(cè)系統(tǒng)之間的結(jié)果一致性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

表2 相關(guān)系數(shù)和回歸方程及誤差

本研究按照EP9-A文件的要求，對(duì)我實(shí)驗(yàn)室的羅氏Cobas6000 C501和羅氏Modular P800生化分析儀進(jìn)行比對(duì)分析和偏倚評(píng)估，結(jié)果表明在做好室內(nèi)質(zhì)控基礎(chǔ)上，由于使用了配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，兩臺(tái)分析儀20項(xiàng)常規(guī)化學(xué)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果之間的偏倚評(píng)估在線性范圍之內(nèi)，顯示良好的相關(guān)性，線性回歸方程良好,究其原因在于該兩臺(tái)分析儀使用的是相同的校準(zhǔn)品,結(jié)果可以溯源到同一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),因此該20個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目可以在兩臺(tái)儀器上任意檢測(cè)而得到一致性很高的結(jié)果。通過對(duì)這兩臺(tái)儀器的比對(duì)分析，我們對(duì)檢測(cè)結(jié)果在兩分析系統(tǒng)間的偏倚有了明確的了解，對(duì)其準(zhǔn)確性的判斷有了評(píng)估依據(jù)，保證了同一實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠性，使病人的檢測(cè)結(jié)果在不同的時(shí)間前后有了可比性，滿足了臨床的需要，使檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)可以更好地為臨床服務(wù)。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples,approved guideline,EP9-2A,Pennsylvania.NCCLS,1986:1-14.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:59-60.

[3]魏 昊,叢玉隆.醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理與認(rèn)可指南.北京:中國(guó)計(jì)量出版社,2004,72-75.

[4]邱 玲,程歆琦,劉 荔,等.多臺(tái)生化分析儀多項(xiàng)目同時(shí)進(jìn)行比對(duì)的實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)及應(yīng)用.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30:1001-1004.

[5]Chen Y,WuW,Li LJ,et al.Comparison of the result for three automated immunoassay system in determining serum HBV markers.Clin Chim Acta,2006,372:129-133.