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紫外分光光度法測定刺五加口服液中總黃酮含量

2010-04-03 00:59孫玉艷崔玉海李紹銘王萍萍
中國新技術(shù)新產(chǎn)品 2010年14期
關(guān)鍵詞:刺五加定容蘆丁

孫玉艷 崔玉海 張 穎 李紹銘 王萍萍

(哈爾濱仁皇藥業(yè)股份有限公司,黑龍江 哈爾濱150300)

刺五加口服液是以刺五加浸膏、蔗糖、苯甲酸鈉經(jīng)加工而制成口服液體劑型。產(chǎn)品具有增強機體免疫力、緩解體力疲勞的功效。其中所含的功效性成分為刺五加總黃酮,經(jīng)現(xiàn)代藥理學研究表明刺五加總黃酮具有增加紅細胞膜流動性,從而降低血液粘度,改善血液流變學指標[1];刺五加總黃酮還能提高TGF-131蛋白表達,減少腦缺血區(qū)細胞凋亡的發(fā)生[2]。

1 儀器、試藥與試劑

TU-1901型紫外分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);刺五加口服液(哈爾濱仁皇藥業(yè)股份有限公司,批號:20090801,20090802,20090803);蘆丁對照品(中國生物制品檢定所,批號:100080-200707,含量92.5%);試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

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2.1 試驗條件的選擇

2.1.1 標準溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品5.40mg,加甲醇溶解并定容至100ml,即得50μg/ml。

2.1.2 測定波長的選擇 取蘆丁對照品溶液2ml置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,于200~400nm范圍內(nèi)進行紫外掃描,在360nm處有最大吸收。

2.1.3 樣品測定波長的選擇 取2.2.2項下的樣品溶液于200~400nm范圍內(nèi)進行掃描,在360nm處有最大吸收。

2.2 測定法

2.2.1 標準曲線的制備

量取蘆丁標準溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中,加甲醇至刻度,搖勻,于360nm處測定吸收度,以濃度(μg/ml)為x,吸收度值為y,計算回歸方程為y=0.0265x-0.0021,(r=0.9998,n=5),顯示在5.08μg/ml~25.40μg/ml的范圍內(nèi),蘆丁的濃度和吸光度呈良好的線性關(guān)系。結(jié)果如下表1、表2。

2.2.2 樣品測定

稱取10ml的試樣,加乙醇定容至25ml,搖勻后,超聲提取20min,放置,吸取上清液1.0ml,于蒸發(fā)皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于水浴上揮去乙醇,然后轉(zhuǎn)入層析柱。先用20ml苯洗,苯液棄去,然后用甲醇洗脫黃酮,定容至25ml。此液于波長360nm測定吸收度值。按下述公式計算測定結(jié)果。見表3。

2.2.3 加樣回收率試驗

準確稱取已知含量的刺五加口服液5ml(含量為148.30mg/100ml),加入蘆丁標準品適量,按樣品溶液配制方法平行做6次,按樣品測定方法測定吸光度,并求得總黃酮含量。計算加樣回收率,平均回收率為99.43%,RSD為0.7%(n=6),結(jié)果見表4。

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2.2.4 重現(xiàn)性試驗

精密量取5份同一批號(批號:20090801)樣品10ml,制成供試液并按含量測定項下操作,結(jié)果見表5。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗

取上述供試品溶液每間隔一定時間測定其吸光度,8小時內(nèi)測定結(jié)果見表6。

3 結(jié)果與討論

本實驗通過紫外分光光度法測定刺五加口服液中總黃酮的含量,實驗結(jié)果表明此方法簡單,穩(wěn)定性與重現(xiàn)性好,可有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。

[1]溫筱煦,程麗靜等.刺五加總黃酮對小鼠紅細胞膜流動性的影響.中國基層醫(yī)藥,2006,13(8)

[2]石學魁,王雅賢等.刺五加總黃酮和針刺對腦缺血后TG一61的影響.牡丹江醫(yī)學院學報,2006,27(6)

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