馬志遠(yuǎn)

(甘肅省家畜繁育中心,甘肅 武威733000)

牛的胚胎移植技術(shù)是加快良種繁育的有效途徑[1]。長(zhǎng)期以來(lái),如何提高受體牛的利用率、受胎率一直是廣大技術(shù)人員努力的方向:我們通過(guò)對(duì)不同品種受體牛進(jìn)行胚胎移植對(duì)比試驗(yàn),尋找最佳的胚胎移植受體牛品種,以此來(lái)提高牛胚胎移植的效果。

1 材料與方法

1.1 材料

2005年4月～2006年6月在甘肅地區(qū)農(nóng)戶和部分養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。

1.1.1 冷凍胚胎的來(lái)源 冷凍荷斯坦胚胎來(lái)源于新疆金牛生物股份有限公司,采用乙二醇為冷凍液。

1.1.2 受體牛選擇[2]受體牛根據(jù)當(dāng)?shù)氐膶?shí)際情況,選用西雜牛和秦川牛,符合以下條件的牛作為受體:①年齡在2～8歲之間,經(jīng)產(chǎn)牛分娩在90 d以上,恢復(fù)較好、發(fā)育正常、體格較大;②擁有正常的發(fā)情周期、無(wú)繁殖疾病、經(jīng)檢疫無(wú)傳染病、無(wú)流產(chǎn)史、健康、膘情六成以上。③易于飼養(yǎng)、適應(yīng)性強(qiáng)。④產(chǎn)犢性能好、哺乳能力良好、乳量多。⑤人工受精超過(guò)兩次不孕的牛不能選用。

1.2 方法

1.2.1 受體牛的同期發(fā)情處理與發(fā)情觀察 同期處理用PGF2α(氯前列烯醇;上海)2次注射法即根據(jù)牛體格大小間隔11天2次肌肉注射,每次0.4～0.5 mg,第二次注射48 h后觀察發(fā)情。對(duì)同期處理發(fā)情牛群每天6∶00～22∶00進(jìn)行不少于5次的發(fā)情觀察,每次至少30 min以上,以穩(wěn)定站立接受其他牛的爬跨為發(fā)情標(biāo)準(zhǔn),并準(zhǔn)確記錄開(kāi)始穩(wěn)定接受爬跨時(shí)間和基本結(jié)束時(shí)間(以小時(shí)為單位記錄)。

1.2.2 子宮、卵巢的檢查及黃體等級(jí)的判定[3]用直腸檢查法依次檢查子宮頸、左右兩側(cè)子宮角、卵巢的發(fā)育情況,對(duì)符合條件的受體牛同時(shí)要檢查卵巢的黃體,根據(jù)黃體大小、質(zhì)地軟硬、卵巢基礎(chǔ)和有無(wú)排卵點(diǎn)分為A、B、C三級(jí)。A級(jí)為正常,卵巢基礎(chǔ)好黃體直徑在1.5 cm以上,質(zhì)地軟硬適中,觸摸感覺(jué)如豬肝;B級(jí)為黃體直徑在1～1.5 cm之間,質(zhì)地稍軟或稍硬,與卵巢連接痕跡隱性黃體與排卵點(diǎn)不明顯,卵巢基礎(chǔ)薄弱;C級(jí)為黃體過(guò)小,與卵巢連接痕跡明顯,有小卵泡或卵巢基礎(chǔ)過(guò)差。C級(jí)不能作為黃體移植,視為放棄,A、B級(jí)分別進(jìn)行胚胎移植。

1.2.3 胚胎移植 根據(jù)發(fā)情穩(wěn)定時(shí)間,以發(fā)情天為0 d,第6～8 d實(shí)施胚胎移植,先作好受體牛消毒工作;再將胚胎投入33～35℃的溫水中10 s左右解凍,取出擦干,裝入移植槍(FHK,日本)外裝專用硬外套(FHK,日本)及近無(wú)菌軟外套(FHK,日本),最后用非手術(shù)法將胚胎移入有黃體一側(cè)的子宮角的上1/2～1/3處,5～8 min完成。

1.2.4 妊娠檢查及妊娠母牛的飼養(yǎng)管理 認(rèn)真做好胚胎移植記錄,在60 d后用直檢法進(jìn)行妊檢,經(jīng)直檢確診妊娠的受體母牛,分群飼養(yǎng)管理,供給充足的飼料以保證滿足胎兒和母牛的營(yíng)養(yǎng)需要。防止頂撞、滑到等預(yù)防流產(chǎn);保持舍內(nèi)和牛體的清潔衛(wèi)生。

2 結(jié)果統(tǒng)計(jì)

以受體牛同期率、黃體合格率和受胎率為技術(shù)指標(biāo),用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析,得出結(jié)果[4]。

2.1 不同品種受體牛同期發(fā)情效果

用PGF2α(氯前列烯醇;上海)2次注射法,西雜牛同期發(fā)情率為90.4%(76/84),秦川牛同期發(fā)情率為83.1%(64/77),西雜牛比秦川牛的同期發(fā)情率高7.3%,差異顯著(P<0.05),黃體合格率為64.5%(49/76)、53.1%(34/64),西雜牛比秦川牛的黃體合格率高10.4%,二者之間差異顯著(P<0.05)見(jiàn)表1。

表1 不同品種受體牛同期發(fā)情的效果比較

2.2 不同品種受體牛重復(fù)使用對(duì)受胎率的影響

對(duì)黃體合格的49頭西雜牛和34頭秦川牛進(jìn)行胚胎移植,移植60 d后受胎頭數(shù)分別為31頭和18頭,受胎率分別為63.3%、52.9%,二者之間差異顯著(P﹤0.05)見(jiàn)表2。

表2 受體牛重復(fù)使用對(duì)受胎率的影響結(jié)果比較

3 分析與討論

3.1 不同品種受體牛同期發(fā)情效果比較

采用PGF2α按照同一程序?qū)ξ麟s牛和秦川牛進(jìn)行同期發(fā)情處理,西雜牛比秦川牛的同期發(fā)情率高7.3%,西雜牛比秦川牛的黃體合格率高10.4%,同期率和黃體合格率均差異顯著。受體牛雖然不受品種限制,但是選擇合適的品種做為受體,可以起到良好的效果。

3.2 不同品種受體牛在受胎率方面的比較

對(duì)西雜牛和秦川牛進(jìn)行胚胎移植,受胎率分別為63.3%、52.9%,二者之間差異顯著(P<0.05)。因此選擇合適的受體,這對(duì)降低生產(chǎn)成本,提高胚胎移植經(jīng)濟(jì)效益具有一定的實(shí)際意義。

[1]楊國(guó)義.牛胚胎生物技術(shù)研究與應(yīng)用[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2004,31(9):31-34.

[2]郭志勤.家畜胚胎工程[M].中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,1998,12.

[3]馬志遠(yuǎn),張靈芝.受體牛重復(fù)使用對(duì)同期發(fā)情效果和胚胎移植受胎率的影響[J].黑龍江動(dòng)物繁殖,2006,14(1):20-21.

[4]俞渭江主編.生物統(tǒng)計(jì)附實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)[M].貴州農(nóng)學(xué)院,1986.