楊 敏，廖志鐘

(廣東羅浮山國藥股份有限公司，廣東惠州 516133)

感冒安片為廣東羅浮山國藥股份有限公司生產(chǎn)的品種，該品處方中由野菊花、倒扣草、水楊梅、地膽草、佛手、千里光、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、咖啡因等組成，具有解熱鎮(zhèn)痛之功效，用于感冒引起的頭痛發(fā)熱，鼻塞，咳嗽，咽喉痛。方中野菊花具有疏風(fēng)清熱，消腫解毒，治風(fēng)熱感冒頭痛的作用，為主要藥物，經(jīng)研究，可采用高效液相色譜法測定野菊花中的蒙花苷成分，方法操作簡單、專屬性強，線性關(guān)系良好，可作為該品的含量測定方法，以更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本島津公司LC系列高效液相色譜儀（SPD-M20A二極管陣列檢測器、SIL-10AD自動進樣器、LC Solution色譜工作站）。

1.2 試藥

蒙花苷對照品（批號：111528-200504，中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，以95.5%計）；感冒安片（廣東羅浮山藥業(yè)有限公司）；甲醇（色譜純），水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil-C18（4.6 mm×200 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水-磷酸（52∶48∶0.8）為流動相；檢測波長：334 nm；流速：1.0 ml/min；進樣量：10 μl。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取蒙花苷對照品適量（以95.5%計），加甲醇溶解制成每毫升含15 μg的溶液，即得對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取粉末2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇50 ml，密塞，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.4 陰性對照溶液的制備

按感冒安片處方及制法，取除野菊花外的其余藥材，按制備工藝要求，制成缺野菊花的陰性對照樣品，再按供試品溶液制備方法制成野菊花陰性對照溶液。

2.5 系統(tǒng)適用性試驗

分別精密吸取上述對照品、供試品及陰性對照溶液各10 μl，注入液相色譜儀，照上述色譜方法進行測定，HPLC色譜圖見圖1。

2.6 線性關(guān)系考察

精密稱取蒙花苷對照品適量，加甲醇溶解制成每毫升含0.05706 mg 的溶液，分別精密吸取 1、2、4、6、8、10 μl，注入液相色譜儀，測定峰面積積分值，并以進樣濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得蒙花苷回歸方程：Y=1922145.0144X-8573.2384（r=1.0000）。 蒙花苷在0.05706～0.57060 μg濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.7 精密度試驗

精密吸取蒙花苷對照品溶液10 μl，重復(fù)進樣5次，測定色譜峰面積，RSD=0.20%，結(jié)果表明本法精密度良好。

2.8 重現(xiàn)性試驗

精密稱取同一批樣品6份，按“2.3”項下方法制備樣品溶液，精密吸取樣品溶液、對照品溶液各10 μl進樣，記錄峰面積，結(jié)果蒙花苷峰面積積分值RSD=1.61%。結(jié)果表明本法重復(fù)性良好。

2.9 穩(wěn)定性試驗

圖1 HPLC色譜圖（A.對照品；B.供試品；C.陰性樣品）Fig.1 HPLC chromatography(A.Reference substance;B.Sample;C.Negative sample)

分別精密吸取同一供試品溶液，于 0、1、3、6、10、14 h 后分別進樣10 μl，記錄峰面積，RSD=1.52%。結(jié)果表明樣品在14 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.10 回收率試驗

取已知含量的感冒安片樣品（含量：0.4241 mg/g），精密稱取6份，每份1 g，分別精密加入約等量的蒙花苷對照品，按供試品溶液制備方法制備并進行測定。試驗結(jié)果表明，平均回收率為99.65%，RSD=1.2%，結(jié)果見表1，表明本法準(zhǔn)確性良好。

表1 回收率試驗結(jié)果（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.11 樣品含量測定

取5批樣品，照“2.3”項下方法制備供試品溶液，精密量取供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積按外標(biāo)法計算含量，結(jié)果見表2。

3 討論

感冒安片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第14冊，為中西藥組方制劑，原標(biāo)準(zhǔn)中沒有建立方中的中藥成分含量測定方法，為控制產(chǎn)品質(zhì)量，提高質(zhì)量控制水平，有必要研究制訂處方中的中藥含量測定方法。處方中野菊花具有疏風(fēng)清熱，消腫解毒，治風(fēng)熱感冒頭痛的作用，為方中主要藥物，有效成分蒙花苷明確，故選擇野菊花中的蒙花苷成分為含量測定指標(biāo)成分也是科學(xué)合理的。

表2 樣品含量測定結(jié)果（%，n=5）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=5)

曾經(jīng)試用乙腈-磷酸二氫鈉-磷酸（30∶70∶0.06）作為流動相，結(jié)果分離度不好，參考《中國藥典》2005年版一部野菊花“密蒙花”項下流動相，試用甲醇-水-磷酸系統(tǒng)，選用流動相甲醇-水-磷酸（48∶52∶0.8），峰純度檢測為重疊峰。 重新調(diào)整流動相比例為甲醇-水-磷酸（52∶48∶0.8），在該色譜條件下，樣品峰純度檢查為單峰，陰性對照對測定無干擾，且蒙花苷與其相鄰峰的分離度＞1.5，理論板數(shù)大于2000，分離效果較好。

經(jīng)試驗柱溫在25～40℃范圍內(nèi)變動，對含量測定結(jié)果無明顯影響，但隨著柱溫的升高，分離度逐漸降低，在25℃分離度較好，30℃和40℃時分離度＜1.5，拖尾因子良好。

綜上所述，本法簡便、靈敏、準(zhǔn)確、方法耐用性好，可用于感冒安片的質(zhì)量控制。

[1]謝敏.肉桂中有機氯農(nóng)藥殘留量的含量測定[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2007,45(5):34-35.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.

[3]朱小燕,王鋒.不同產(chǎn)地野菊花中蒙花苷含量的比較研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(34):1504.

[4]王伯濤,王鋒.反相高效液相色譜法測定野菊花中蒙花苷的含量[J].時珍國醫(yī)國藥,2009,20(1):166.

[5]朱小燕,王鋒.不同產(chǎn)地野菊花中蒙花苷含量的比較研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(34):150.

[6]陳蕾,朱霽虹.高效液相色譜法測定野菊花中蒙花苷的含量[J].中國藥事,2005,19(2):97-98.

[7]譚曉杰,賈英,陳曉輝,等.RP-HPLVC法測定野菊花中蒙花苷含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2004,21(6):434-435.

[8]孫寶興,吉剛峰.HPLC法測定感冒靈膠囊中蒙花苷的含量研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報,2007,13(2):70-71.

[9]劉麗,趙玉江,柳森國.HPLC法測定刺五加注射液中總異嗪皮啶的含量[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2007,45(9):52-53.

[10]林冬杰.中藥退黃外洗液中大黃酸的含量測定[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2009,16(4):42-43.