王 軍 內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)學(xué)系 010021

寄生性線蟲是家畜的一種主要寄生蟲病，長期以來對畜牧業(yè)的發(fā)展造成了巨大的影響。年復(fù)一年，控制家畜寄生性線蟲病的傳統(tǒng)方法是用化學(xué)藥物驅(qū)蟲。長期反復(fù)的使用驅(qū)蟲藥，使蟲體產(chǎn)生抗藥性，結(jié)果驅(qū)蟲藥的藥效下降，年年驅(qū)蟲，年年研制開發(fā)新藥，化學(xué)驅(qū)蟲藥的大量使用，造成畜產(chǎn)品的藥物殘留，嚴重的危害人畜健康同時。被驅(qū)蟲動物體排出的降解或未經(jīng)改變的化學(xué)藥物污染環(huán)境，破壞生態(tài)平衡，進一步形成不可估量的惡性循環(huán)。

捕食線蟲性真菌可有效的預(yù)防家畜寄生性線蟲，從而可以解決化學(xué)藥物驅(qū)蟲帶來的諸多問題。利用生物控制家畜寄生性線蟲對畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展、維護自然界的生態(tài)平衡、發(fā)展無污染的綠色動物畜產(chǎn)品，具有極為重要的意義。

家畜感染寄生性線蟲的途徑是攝食了外界環(huán)境中的感染性幼蟲，幼蟲在家畜體內(nèi)發(fā)育為成蟲，成蟲排卵于外界環(huán)境中，卵在外界發(fā)育為感染性幼蟲，感染性幼蟲被家畜食入而造成感染。臨床應(yīng)用捕食性真菌孢子飼喂給家畜，孢子隨家畜糞便和寄生蟲蟲卵排到外界環(huán)境中，孢子發(fā)育產(chǎn)生菌絲，進而產(chǎn)生捕獲殺死線蟲的捕食性器官，將蟲卵孵出的幼蟲殺死，這樣避免了蟲體在草場上的擴散，從而起到了預(yù)防寄生性線蟲病的作用。

捕食線蟲性真菌廣泛存在于自然界，對糞便降解無任何影響（Fernandez，1999）[1]；經(jīng)調(diào)查，人工應(yīng)用對土壤線蟲種群也無害（Baudena 等，2000）[2]；不會影響土壤和環(huán)境中的生態(tài)種群 （Faedo et al，2000）[3]。更不會造成對自然生態(tài)平衡的破壞。由于真菌孢子在動物體內(nèi)不生長繁殖，因而不對人畜造成任何危害；捕食線蟲性真菌作用的對象是自由生活階段的幼蟲，即在蟲體感染前發(fā)生作用。所以，避免了感染后才殺滅的弊端，防止了寄生蟲在動物體內(nèi)的危害。此外，還抑制了糞便中幼蟲向周圍環(huán)境的傳播擴散，減輕了草場的污染，降低了家畜對寄生蟲的感染率和感染強度，減少了動物消化道寄生蟲的感染數(shù)量，降低了動物糞便中排出的蟲卵數(shù)，減輕了動物臟器的病變，從而提高動物的增重率（蔣金書，2000）。由于捕食線蟲性真菌殺蟲率不是100%[4]，如此環(huán)境中仍保持一定數(shù)量蟲體，對動物產(chǎn)生一定的臨床免疫力，將寄生蟲感染控制在亞臨床水平，達到了預(yù)防臨床寄生蟲病發(fā)生的效果。

捕食線蟲性真菌對動物寄生性線蟲捕食作用的研究最早始于1939年，Roubaud和Deschiens在實驗室內(nèi)試驗，證明紡錘隔指孢菌（Dactylella ellipsospora）對類圓線蟲屬和鉤口線蟲屬感染期幼蟲的殺蟲作用。1941年，他們又進行簡單的臨床試驗，在面積為25m2的草場上，加入紡錘隔指孢菌（Dactylella ellipsospora）及少孢節(jié)叢孢菌（Arthrobotrygs oligospora）兩種捕食線蟲性真菌后，結(jié)果羔羊感染乳突類圓線蟲和仰口線蟲的數(shù)量明顯減少。捕食線蟲性真菌主要的代表種類有3種[5]。捕食線蟲的方式有套捕型(hooping)捕食線蟲性真菌和粘捕型(sticking)捕食線蟲性真菌。套捕型捕食線蟲性真菌代表種為少孢節(jié)叢孢菌(Arthrobotrys oligospora)和梨形指環(huán)菌(Dactylaria pyriform is)，它們以菌環(huán)、菌網(wǎng)作為捕食性結(jié)構(gòu)(器官)，以套捕方式殺滅線蟲幼蟲。梨形指環(huán)菌可產(chǎn)生多量厚垣孢子(chlamydospore)。粘捕型捕食線蟲性真菌代表種為紡錘隔指孢菌(Dactylella ellipsospora)?？尚纬删Y(jié)捕食線蟲性結(jié)構(gòu)，以粘捕的方式殺滅線蟲幼蟲。捕食線蟲性真菌多生活在陰暗、潮濕、富含腐植質(zhì)的土壤環(huán)境中。在溫暖季節(jié)時，即雨季開始和結(jié)束時[6]，夏秋溫暖季節(jié)，采用0.4g/L玉米粉瓊脂培養(yǎng)基(CMA)，一般從樹木下、花園、果園等地方的土壤中，容易進行分離培養(yǎng)捕食線蟲性真菌。將采樣灑在0.4 g/L玉米粉瓊脂雙抗培養(yǎng)基上，將培養(yǎng)皿保持一定的濕度，在(20±1)℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)3-7d后，真菌菌絲長至培養(yǎng)皿的2/3以上時，分別于培養(yǎng)皿內(nèi)加入有活力的線蟲第3期幼蟲2000～4000條，放于溫箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)，每天用倒置顯微鏡觀察，從出現(xiàn)菌環(huán)、菌網(wǎng)或菌結(jié)等捕食線蟲性結(jié)構(gòu)(器官)，同時有幼蟲被捕獲的培養(yǎng)皿中，鏡下切取5mm×5mm含有捕食線蟲性結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種于0.4g/L玉米粉瓊脂培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)，待菌絲生長布滿平皿后，再加入2000～4000條幼蟲，每日觀察1次，再進行轉(zhuǎn)接種。如此反復(fù)多次進行分離純化，即可獲得捕食線蟲性真菌純培養(yǎng)物[5，7]。將獲得捕食線蟲性真菌純培養(yǎng)物長有菌絲的瓊脂塊切成約5mm×5mm的小塊，接種于玉米粒培養(yǎng)基中，進行擴大培養(yǎng)，約經(jīng)3周，待分生孢子大量形成后，以含孢子9×107的玉米粒培養(yǎng)物飼喂家畜，可有效的防制家畜寄生性線蟲病[8]-[10]。

[1]Fernandez，A.S.，Larsen，M.，Henningsen，E.et al.，Effect of Duddingtonia flagrans againstostertagia ostertagi in cattle grazing at different stocking rates.parasitology ，999，119：105-111.

[2]Baudena，M.A.，Chapman，M.R.，Larsen，M.et al.，Efficacy of the nematophagous Duddingtonia flagrans in reducing equine cyathostome Larvae on pasture in southern Lonisiana.Veterinary Parasitology ，2000，89：219-230.

[3]Faedo，M.，Larsen，M.，&Thamsborg，S.，Effect of different times of adm inistration of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans on the transm ission of ovine parasitic nematodes on pasture-a plot study.Veterinary Parasitology，2000，94：55-65.

[4]楊曉野，吳彩艷，楊蓮茹，等.口服少孢節(jié)叢孢菌孢子對家畜糞便中線蟲幼蟲的殺滅研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2005，36(9)：927-930.

[5]楊曉野，楊蓮茹，劉珍蓮，等.捕食線蟲性真菌的分離培養(yǎng)及分布規(guī)律[J].中國獸醫(yī)學(xué)報，2003，23(4)：344-346.

[6]Saumell C A， Padilha T， Santos C， et al.Nematophagous fungi in fresh faeces of cattlein the Mata region of Minas Gerais state，Brazil[J].Vet Parasitol，1999，82：217-220.

[7]楊蓮茹，楊曉野，劉珍蓮，等.捕食線蟲性真菌生長特性的觀察研究[J].中國獸醫(yī)科技，2003，33(2)：3-7.

[8]楊曉野，吳彩艷，楊蓮茹，等.口服少孢節(jié)叢孢菌孢子對家畜糞便中線蟲幼蟲的殺滅研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2005，36(9)：927-930.

[9]郭子茂，烏曉學(xué).豬冠層線蟲病-豬賢蟲病的診斷與防治[j].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30(Z1)：180-182.

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