陳國(guó)光 馬 琴

(1太原市第四人民醫(yī)院,山西省太原市西礦街 231號(hào),030053;2山西醫(yī)科大學(xué))

全蝎又名全蟲(chóng),為鉗蝎科動(dòng)物東亞鉗蝎(Buthus martensiikirsch)的干燥體 。性味咸 、辛 、平,有毒 ,具有清熱解毒、熄風(fēng)止痙、祛風(fēng)除濕之功效,符合中醫(yī)扶正固本、軟堅(jiān)散結(jié)、活血祛瘀、清熱解毒治療腫瘤的原則[1]。筆者以全蝎酶提物和全蝎原粉作用于 H22肝癌、S180肉瘤移植瘤小鼠,觀察其對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響,為全蝎抗腫瘤和全蝎在現(xiàn)代中藥制劑中的提取方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物 昆明種小鼠,雌性,體重 18～22g,北京醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物室提供。合格證號(hào)碼:(京動(dòng)字)scxk-2002-001。本室動(dòng)物室自然飼養(yǎng)。

1.2 腫瘤細(xì)胞株 S180小鼠肉瘤腹水型荷瘤小鼠、H22小鼠肝癌腹水型荷瘤小鼠。均引自北大醫(yī)院腫瘤研究所。

1.3 實(shí)驗(yàn)用藥 全蝎酶解提取物,由北京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院王玉蓉教授提供,每 m L含酶提物 0.0669g,相當(dāng)于生藥 0.08g。復(fù)方天仙膠囊,通化白山藥業(yè)股份有限公司出品,批號(hào):0310061。環(huán)磷酰胺(MTX)注射液:江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司,批號(hào):04111221。

2 方法

2.1 腫瘤接種 據(jù)文獻(xiàn)[2-3]稍加改動(dòng),無(wú)菌條件下抽取傳代 7天的腫瘤腹水液,無(wú)菌生理鹽水 1∶3稀釋,混勻,冰浴中放置,取 0.2mL注入小鼠右腋皮下為移植性實(shí)體瘤。

2.2 動(dòng)物分組 實(shí)驗(yàn)分兩批進(jìn)行,第一批接種 S180肉瘤腹水,接種次日荷瘤鼠隨機(jī)分腫瘤對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、全蝎酶提物大、中、小劑量組 5組,每組最少 10只。全蝎酶提物大、中、小劑量組分別按成人臨床劑量的40倍、20倍和 10倍,灌服全蝎酶提物 1.616g/kg、0.808g/kg和 0.404g/kg;灌服體積為 0.5mL,每天 1次,連續(xù) 10天。陽(yáng)性對(duì)照組灌服復(fù)方天仙膠囊0.75g/kg,相當(dāng)于成人用藥量的 20倍,每天 1次,連續(xù)10天。腫瘤對(duì)照組灌服等體積蒸餾水,每天 1次,連續(xù) 10天。第二批接種 H22小鼠肝癌腹水,接種次日荷瘤鼠隨機(jī)分腫瘤對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、全蝎酶提物大、中、小劑量組 5組,每組最少 10只。全蝎酶提物大、中、小劑量組和腫瘤對(duì)照組同第一批。陽(yáng)性對(duì)照組一次性皮下注射環(huán)磷酰胺 80mg/kg,相當(dāng)于臨床成人用藥量的 6倍。

2.3 觀察抑瘤率 停藥次日,移植性實(shí)體瘤動(dòng)物脫頸椎處死,稱體重后剝離皮下完整瘤塊,萬(wàn)分之一電子天平上稱重并計(jì)算抑瘤率。

表1 各組藥物對(duì)小鼠 S180肉瘤的抑制試驗(yàn)結(jié)果

表2 各組藥物對(duì)小鼠H22肝癌的抑制試驗(yàn)結(jié)果

表3 各組藥物對(duì) H22肝癌移植瘤小鼠一般狀態(tài)和器官指數(shù)的影響

2.4 觀察藥物對(duì)荷瘤小鼠一般狀態(tài)的影響 腫瘤接種后每天觀察記錄動(dòng)物的精神、運(yùn)動(dòng)、生存的狀況,隔日稱體重。

2.5 觀察藥物對(duì)荷瘤小鼠免疫器官的影響 摘取小鼠的脾臟和胸腺并稱重(mg),并計(jì)算器官指數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 各實(shí)驗(yàn)組藥物對(duì)小鼠 S180肉瘤移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小劑量對(duì) S180肉瘤有一定的抑制腫瘤生長(zhǎng)的趨勢(shì),抑瘤率分別為 11.54%、8.40%和29.78%,見(jiàn)表 1所示。

3.2 各實(shí)驗(yàn)組藥物對(duì) H22小鼠肝癌移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小劑量對(duì) H22小鼠肝癌移植瘤均表現(xiàn)出明顯的抑制生長(zhǎng)作用,全蝎酶提物的抑瘤作用好于全蝎原粉。其抑瘤率分別為 35.58%、42.09%、39.61%,隨著全蝎酶解提取物劑量的增大,其抗 H22移植瘤的療效變化不明顯,甚至高劑量組(1.616g/kg)要低于其他兩組。對(duì)照藥環(huán)磷酰胺表現(xiàn)出十分明顯的抑瘤作用,抑瘤率達(dá) 76.10%。見(jiàn)表 2。

3.3 實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)荷瘤小鼠一般狀況和器官指數(shù)的影響 試驗(yàn)所用藥物對(duì) S180肉瘤移植瘤小鼠和 H22肝癌移植瘤小鼠的一般狀況(活動(dòng)、精神、皮毛)都無(wú)明顯的不良影響。實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性對(duì)照藥環(huán)磷酰胺在用藥的前六天明顯抑制 H22肝癌移植瘤小鼠的體重增長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)小鼠的體重明顯低于腫瘤對(duì)照組。全蝎酶提物中劑量組在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)荷瘤小鼠體重也低于腫瘤對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)藥物對(duì) H22肝癌移植瘤小鼠器官指數(shù)的影響見(jiàn)表 3所示。

4 討論

全蝎是一味名貴中藥,民間素有口服蝎毒稀釋液治療癌癥的經(jīng)驗(yàn)。大量的臨床研究也證明,全蝎、全蝎復(fù)方、粗制蝎毒及蝎毒抗癌因子,對(duì)肝癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等均有較好的治療效果[4]。既往研究表明蝎毒具有明顯的細(xì)胞毒性及保護(hù)血管內(nèi)皮,削弱腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)生長(zhǎng)的能力[5]。田愛(ài)琴等用不同濃度的蝎毒(SVC)培養(yǎng)基培養(yǎng)人食管癌 Eca109細(xì)胞株細(xì)胞引起 DNA合成抑制,阻斷 G0/G1向 S期的增殖[6]。另有報(bào)道,全蝎乙醇粗提物能防止荷瘤小鼠胸腺萎縮,恢復(fù)并增強(qiáng)胸腺免疫功能,故停藥后機(jī)體對(duì)腫瘤生長(zhǎng)仍有較高的抑制作用[7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明全蝎有明顯的抑制 H22肝癌生長(zhǎng)的作用,且從全蝎酶提物對(duì)荷瘤小鼠一般狀況和體重的增長(zhǎng)情況看其毒副作用明顯小于陽(yáng)性對(duì)照藥(環(huán)磷酰胺)。

全蝎的傳統(tǒng)臨床應(yīng)用主要有打粉、用水煎煮等方法,這些方法存在服用劑量大、不利儲(chǔ)存、微生物難以控制等諸多弊端。若入煎劑經(jīng)高溫煎煮,其有效成分是否被破壞,此用藥方式是否合理也未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道[8]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察全蝎生物酶提取物的抗腫瘤效果。為全蝎在現(xiàn)代中藥中的提取方法提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。全蝎生物酶解提取物具有一定優(yōu)勢(shì)的抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用已初步在實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí),但其提取工藝有待進(jìn)一步完善,具體的作用機(jī)理尚有待進(jìn)一步深入研究。

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[2]湯宇,崔雪梅,袁玫,等.小鼠 S180肉瘤腫瘤模型生長(zhǎng)規(guī)律及熱休克蛋白的表達(dá).醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2004,17(5):408-412.

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