談 艷,陳文鶴,孫慶艷

(1.南京郵電大學(xué)體育部,江蘇南京210046;2.上海體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)科學(xué)學(xué)院,上海200438)

伴有LEP抵抗、IR現(xiàn)象肥胖大鼠動(dòng)物模型建立的研究

談 艷1,陳文鶴2,孫慶艷2

(1.南京郵電大學(xué)體育部,江蘇南京210046;2.上海體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)科學(xué)學(xué)院,上海200438)

目的:通過(guò)高脂膳食喂養(yǎng),誘導(dǎo)伴有LEP抵抗、I R現(xiàn)象肥胖大鼠動(dòng)物模型的建立。方法:采用改進(jìn)后的高脂膳食喂養(yǎng)大鼠8周,根據(jù)體重剔除肥胖抵抗大鼠,選取體重排序前1/3大鼠,觀察體重、Lees指數(shù)、空腹血糖(FBG)、血清胰島素(Ins)、胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、血清瘦素(Lep)、口服糖耐量試驗(yàn)(OGTT)、胰島素釋放試驗(yàn)(I RT)等指標(biāo),且與對(duì)照組比較。結(jié)果:除空腹血糖外,模型組各指標(biāo)均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論:富含飽和脂肪酸的高脂膳食可以導(dǎo)致大鼠發(fā)生肥胖并引起瘦素抵抗、胰島素抵抗現(xiàn)象。

高脂膳食;肥胖大鼠模型;瘦素抵抗;胰島素抵抗

脂類代謝紊亂是肥胖癥、糖尿病等代謝性疾病的共同病理基礎(chǔ)之一。大部分肥胖者同時(shí)伴有瘦素(Lep)抵抗和胰島素抵抗(IR)現(xiàn)象,即體內(nèi)組織、器官對(duì)Lep及Ins敏感性降低。肥胖動(dòng)物模型的制備是進(jìn)行各類肥胖癥及代謝綜合征基礎(chǔ)研究的前提之一,由于取材具有一定的損傷性,且肥胖形成周期過(guò)長(zhǎng),以人體為受試對(duì)象的相關(guān)肥胖研究具有一定的局限性[1]。而利用各種方法在短期內(nèi)誘導(dǎo)肥胖動(dòng)物模型則不受這些限制,特別是取材方面的限制,這就使得關(guān)于肥胖癥的研究可以深入到具體組織器官的分子水平。但以往大多數(shù)研究未能重視同時(shí)具備Lep抵抗和IR現(xiàn)象肥胖動(dòng)物模型的建立與篩選。因此,筆者試圖通過(guò)高脂膳食建立肥胖大鼠動(dòng)物模型并從中篩選出具有這兩種抵抗現(xiàn)象的大鼠,初步探討模型建立的方法和理論,為肥胖癥及代謝類疾病治療和預(yù)防的進(jìn)一步研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

健康、雄性純系7周齡Sprague-Dawley(SD)大鼠130只,體重206～257g,購(gòu)于上海西普爾—必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司,許可證號(hào):準(zhǔn)SCXK(滬)2003-0002。參照隨機(jī)數(shù)字表分組,空白對(duì)照組(C組,n=10);高脂膳食模型組(H組,n=120)。分籠飼養(yǎng),每籠5只。室溫(22±2)℃,相對(duì)濕度55.6%±4%。每日光照黑暗時(shí)間各為12小時(shí)。自由飲水、活動(dòng),不限飼料量,每天早晚兩次添加飼料,保證飼料供應(yīng)。

1.2 動(dòng)物喂養(yǎng)

標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,然后分別給予對(duì)照組和建模組不同成分飼料喂養(yǎng),連續(xù)喂養(yǎng)8周。普通標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類飼料由中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,高脂飼料由中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。高脂飼料配方在參考孫志、錢伯初等人方法的基礎(chǔ)上改進(jìn)而成[2-4]。普通飼料中添加10%豬油,15%蔗糖,0.2%膽固醇,0.2%蛋黃及少量維生素和礦物質(zhì)。高脂飼料低溫保存,喂養(yǎng)前復(fù)溫24小時(shí)后給食。普通飼料與高脂飼料主要成分質(zhì)量與熱量比見(jiàn)表1。

1.3 取材

于實(shí)驗(yàn)第8周末,大鼠禁食12小時(shí)后,空腹進(jìn)行口服糖耐量試驗(yàn)(OGTT)、胰島素釋放試驗(yàn)(IRT)。以50%的葡萄糖2 g/kg對(duì)大鼠進(jìn)行灌服,分別于灌服葡萄糖15、30、60、120分鐘后眼眶靜脈取血,以自動(dòng)血糖儀測(cè)即刻及各時(shí)間點(diǎn)血糖值,同時(shí)分別留取0.5ml血液,離心分離血清后于-20℃保存,以待測(cè)血清胰島素水平。

表1 不同組飼料主要成分質(zhì)量與熱量百分比

1.4 指標(biāo)測(cè)試與方法

1.4.1 體重、Lees指數(shù)測(cè)定 每周周二統(tǒng)一時(shí)間稱量體重、測(cè)量鼻尖到肛門的長(zhǎng)度,計(jì)算Lees指數(shù)。

Lees指數(shù)=體重(g)-3/體長(zhǎng)(cm)×103

1.4.2 OGTT試驗(yàn) 自動(dòng)血糖測(cè)試儀測(cè)定,血糖試紙為美國(guó)Terasense公司提供。

1.4.3 血清 Lep水平以雙抗體夾心EL ISA酶聯(lián)接免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)測(cè)試,試劑盒為美國(guó)R&D公司產(chǎn)品。

1.4.4 I RT試驗(yàn) 以放射免疫法測(cè)定血清胰島素水平,試劑盒為美國(guó)L INCO Research公司提供。所測(cè)胰島素值單位為ng/ml,將其轉(zhuǎn)化為mU/L[5]。以上血液指標(biāo)測(cè)定方法、步驟均按試劑盒要求操作。

1.4.5 胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-I R)計(jì)算 HOMA-IR=空腹胰島素(F INS)×空腹血糖(FBG)/22.5。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)表示,用SPSS13.0 forwindows統(tǒng)計(jì)軟件處理,采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,P＜0.05為顯著性差異,P＜0.01為非常顯著性差異。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠一般狀態(tài)

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中建模組大鼠體重增長(zhǎng)明顯快于對(duì)照組,但兩組大鼠精神狀態(tài)都良好,皆活動(dòng)自如,毛發(fā)光澤、濃密,緊貼于皮膚表面,眼神明亮,攝食和飲水正常,大小便亦正常。

2.2 造模期間大鼠體重、Lees指數(shù)變化

采用不同喂養(yǎng)方式8周后,建模組大鼠體重明顯高于對(duì)照組,篩選建模組體重排序前1/3的40只大鼠與對(duì)照組比較[6]。建模組體重與Lees指數(shù)與之都具有顯著性差異(P＜0.01),提示高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠動(dòng)物模型建模成功(表2)。

表2 喂養(yǎng)8周后建模組與對(duì)照組體重、Lees指數(shù)比較(M eans±SD)

2.3 建模后大鼠血清瘦素、血糖和胰島素、胰島素抵抗指數(shù)的變化

不同種類膳食喂養(yǎng)8周后,除FBG外其余各指標(biāo),建模組較對(duì)照組都有顯著性差異(P＜0.01)(表3)。

表3 喂養(yǎng)8周后建模組與對(duì)照組血糖、血清瘦素、胰島素及胰島素抵抗指數(shù)比較(M eans±SD)

2.4 大鼠OGTT試驗(yàn)

由表4及圖1可見(jiàn),建模組與對(duì)照組大鼠在空腹時(shí)血糖水平無(wú)差異性,但在15min、30min、60min及120min各時(shí)間點(diǎn),建模組大鼠血糖明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。兩組大鼠血糖濃度均在60min時(shí)達(dá)到峰值。

表4 建模組與對(duì)照組OGTT試驗(yàn)結(jié)果(mmol/L)(M eans±SD)

圖1 建模組與對(duì)照組大鼠OGTT試驗(yàn)結(jié)果

2.5 大鼠IRT試驗(yàn)

如表5及圖2所示,整個(gè)I RT各時(shí)間點(diǎn),建模組與對(duì)照組均具有顯著性差異(P＜0.01),兩組大鼠血清胰島素濃度均在15min時(shí)出現(xiàn)峰值。

表5 建模組與對(duì)照組IRT試驗(yàn)(mU/L)(M eans±SD)

圖2 建模組與對(duì)照組IRT試驗(yàn)結(jié)果

3 分析與討論

1959年,Masek首次通過(guò)高脂膳食干預(yù)誘導(dǎo)了大白鼠肥胖動(dòng)物模型,并對(duì)高脂膳食進(jìn)行了描述[7]。后續(xù)的研究也發(fā)現(xiàn),高脂膳食不僅能夠造成肥胖,同時(shí)還能夠引起機(jī)體高血糖癥、脂代謝紊亂及胰島素抵抗等[8,9]。大多數(shù)研究中的高脂膳食是相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)普通膳食而言的,沒(méi)有具體分析不同脂肪成分對(duì)動(dòng)物模型的影響,造成了不同的研究結(jié)果。Buettner[10]給予W istar大鼠42%能量來(lái)源于不同脂肪成分的高脂飲食,包括豬油(HF-L)、橄欖油(HF-O)、椰子油(HF-C)和魚油(HF-F),結(jié)果HF-L、HF-O大鼠出現(xiàn)預(yù)期的肥胖和胰島素抵抗,而HF-C、HF-F組的胰島素敏感指數(shù)接近于正常。該實(shí)驗(yàn)提示富含飽和脂肪酸的動(dòng)物脂肪更容易誘導(dǎo)肥胖。因此,本實(shí)驗(yàn)中采用以豬油為主要脂肪來(lái)源的高脂飼料,以利于肥胖大鼠動(dòng)物模型的建立。

高脂飼料配制比例是否合理是營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物模型是否成功的決定因素之一。以往文獻(xiàn)中高脂膳食誘導(dǎo)肥胖模型中脂肪質(zhì)量比通常在20%～35%之間,熱量比占45%～60%[2,11]。但實(shí)際操作中,由于含有較高的油脂,大鼠飼料松散易碎很難成形,不僅造成了大量飼料浪費(fèi),而且不適于有喜用硬物磨牙習(xí)性的大鼠,導(dǎo)致大鼠不愛(ài)啃食,進(jìn)食量減少,所以很難達(dá)到較好的實(shí)驗(yàn)效果。參考已有的飼料配方,反復(fù)配制比較,本研究將脂肪質(zhì)量比調(diào)至13.9%,碳水化合物質(zhì)量比升至53.8%,以增加熱量的攝入。但同時(shí)也保證蛋白供應(yīng)量,避免蛋白質(zhì)比例過(guò)度下降,影響大鼠的生長(zhǎng)發(fā)育。改進(jìn)后的高脂飼料干燥成形,松軟適度,符合大鼠進(jìn)食磨牙的生活習(xí)性,保證了其膳食攝入量,同時(shí)飼料成本降低,易于儲(chǔ)存。

高脂膳食并不能絕對(duì)地引起大鼠發(fā)生肥胖。1983年,人們首次提出了“肥胖抵抗”(D IO-R)的概念[12]。D IO-R是指進(jìn)食高脂膳食而不發(fā)生肥胖的現(xiàn)象。已有的研究也證實(shí)了高脂飲食誘導(dǎo)肥胖動(dòng)物模型時(shí)D IO-R的存在,通常認(rèn)為它的發(fā)生率是30%～40%左右[2,13]。高脂膳食誘導(dǎo)下發(fā)生D IO-R的機(jī)制有[14-16]:①脂肪氧化速率不同,D IO-R個(gè)體具有較強(qiáng)的脂肪氧化能力,從而避免了脂肪沉積和肥胖的發(fā)生。②D IO-R個(gè)體神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)中含有較多的抑制外源性脂肪攝入及促進(jìn)脂解的激素,如:γ-氨基丁酸(GABA)、生長(zhǎng)激素(GH)等。③大鼠體內(nèi)的肌纖維類型比例不同。④遺傳因素的不同。本研究參考已有的文獻(xiàn),高脂膳食喂養(yǎng)8周后,把造模組體重在后1/3位的判定為D IOR大鼠,中間1/3大鼠棄之不用[6,17]。前1/3的40只大鼠對(duì)空白對(duì)照組比較,體重與Lees指數(shù)與之都有顯著性的增高,提示高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠造模成功。

瘦素是脂肪組織分泌的眾多脂肪細(xì)胞因子之一,在中樞主要生理功能是通過(guò)和受體結(jié)合,抑制攝食行為及增加能量消耗,這也是瘦素最重要的生理功能。在外周作用則包括對(duì)糖代謝平衡的調(diào)節(jié)、促進(jìn)脂肪分解、抑制脂肪合成等。雖瘦素在中樞和外周可以通過(guò)各種途徑調(diào)節(jié)能量平衡,控制體重,但是大多數(shù)肥胖者體內(nèi)卻存在高瘦素水平,只有約5%的肥胖者體內(nèi)呈低瘦素水平[18]。這提示肥胖者大多存在瘦素抵抗現(xiàn)象,瘦素抵抗可能是形成肥胖癥的病理基礎(chǔ)之一。

血液循環(huán)中瘦素濃度受晝夜節(jié)律、機(jī)體脂肪含量、激素、胰島素等多種因素的影響。有研究認(rèn)為循環(huán)瘦素水平與機(jī)體攝入碳水化合物總量有顯著的相關(guān)性[19]。本實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)8周高脂膳食喂養(yǎng),造模組大鼠血清瘦素水平顯著高于對(duì)照組,提示造模組大鼠體內(nèi)存在瘦素抵抗現(xiàn)象。造模組大鼠體內(nèi)高瘦素水平,可能是由于熱能攝入過(guò)多,導(dǎo)致體重上升,脂肪堆積,從而使脂源性的細(xì)胞因子瘦素濃度上升。同時(shí),脂肪組織中的巨噬細(xì)胞的數(shù)量可以在高脂膳食誘導(dǎo)下上升,從而導(dǎo)致機(jī)體處于一種炎性狀態(tài),白介素-6( IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平增加,這些炎性因子可以刺激瘦素分泌,加重瘦素抵抗現(xiàn)象。當(dāng)內(nèi)源性瘦素水平持續(xù)增高后,機(jī)體可能出于一種自我防御機(jī)制,降低對(duì)瘦素的敏感性,或者存在瘦素受體及受體后缺陷,瘦素不能發(fā)揮其正常的生理調(diào)節(jié)作用,從而使建模組大鼠一直處于肥胖且伴瘦素抵抗?fàn)顟B(tài)。

流行病學(xué)表明,大多數(shù)肥胖者同時(shí)具有瘦素抵抗和胰島素抵抗現(xiàn)象。胰島素抵抗通常是指胰島素作用的靶組織或器官對(duì)于胰島素的敏感性下降或者體內(nèi)正常水平的胰島素不能產(chǎn)生相適應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)。高脂、高熱量食物的大量攝入被認(rèn)為是胰島素抵抗形成的主要因素之一。本實(shí)驗(yàn)中建模組大鼠經(jīng)過(guò)8周高脂飼料喂養(yǎng)后,與對(duì)照組相比,體重、F INS與HOMA-IR都具有顯著差異,提示建模組大鼠具有高胰島素血癥、胰島素抵抗現(xiàn)象。這與以往4～6周高脂膳食導(dǎo)致大鼠發(fā)生胰島素抵抗研究結(jié)果相符[20,21]。血糖鉗夾技術(shù)是目前評(píng)價(jià)胰島素抵抗的金標(biāo)準(zhǔn),但是由于操作的復(fù)雜性、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)實(shí)條件等原因,本研究采用了穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估的HOMA-I R間接評(píng)價(jià)胰島素抵抗。而已有實(shí)驗(yàn)證明,以大鼠為受試對(duì)象,HOMA-I R與血糖鉗夾技術(shù)測(cè)定的胰島素抵抗指數(shù)(clamp-I R)具有高度的相關(guān)性[22]。圖2所示的IRT試驗(yàn)中,建模組與對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)上都有顯著性差異,這提示了建模組大鼠胰島β細(xì)胞的分泌功能還未顯著受到高脂飲食的影響,在血糖的刺激下仍具有正常分泌功能,大鼠還處于胰島素抵抗階段并未發(fā)展成2型糖尿病。但也有許多觀點(diǎn)認(rèn)為高脂膳食可以導(dǎo)致機(jī)體胰島β細(xì)胞功能在2型糖尿病發(fā)生之前出現(xiàn)代償性功能下降[23,24]。

OGTT通過(guò)觀察機(jī)體在進(jìn)食葡萄糖后對(duì)血糖的調(diào)節(jié)能力,是一種用于早期發(fā)現(xiàn)糖代謝異常的經(jīng)典方法[25]。Andrikopoulos對(duì)高脂膳食飼養(yǎng)八周后的大鼠以2g/kg體重的葡萄糖量進(jìn)行OGTT試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)相對(duì)于普通膳食對(duì)照組,其血糖濃度顯著上升[26]。本實(shí)驗(yàn)中,在進(jìn)食葡萄糖后,兩組大鼠血糖均有升高趨勢(shì),同時(shí)在1小時(shí)后達(dá)到峰值,后血糖水平逐漸回落。但高脂膳食除空腹外,造模組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖值均顯著高于對(duì)照組,提示造模組大鼠葡萄糖耐量降低,存在血糖調(diào)節(jié)異常。

建模組大鼠FBG與對(duì)照組無(wú)顯著性差異,說(shuō)明此時(shí)胰島素對(duì)機(jī)體血糖還具有一定的調(diào)節(jié)作用,大鼠并未出現(xiàn)糖代謝異常。但是肥胖大鼠由于存在胰島素抵抗現(xiàn)象,效應(yīng)器官對(duì)胰島素的敏感性下降,高脂膳食后胰島素作用不足,降低了通過(guò)門靜脈的葡萄糖攝取能力,導(dǎo)致血糖升高。OGTT試驗(yàn)中除了空腹血糖,其他各時(shí)間點(diǎn)建模組大鼠血糖濃度高于對(duì)照組,且具有顯著性差異,表明了建模組大鼠血糖調(diào)節(jié)能力低下,胰島素的分泌不能及時(shí)地適應(yīng)和調(diào)節(jié)機(jī)體突然增加的血糖濃度,導(dǎo)致血糖水平急劇上升,而這符合胰島素抵抗特征。

4 結(jié)論與建議

1)富含飽和脂肪酸的高脂膳食可以誘導(dǎo)建立大鼠肥胖模型,并引起瘦素抵抗、胰島素抵抗現(xiàn)象,該動(dòng)物模型的建立為肥胖癥及代謝類疾病的發(fā)病機(jī)制、治療和預(yù)防措施等理論研究奠定了基礎(chǔ)。

2)大鼠喂養(yǎng)過(guò)程中存在D IO-R現(xiàn)象,在模型制備前應(yīng)考慮到D IO-R大鼠的發(fā)生率及剔除。

[1]王從容,譚 健,楊錫讓.高脂飼料誘發(fā)大鼠肥胖模型的建立及間接推測(cè)體脂法[J].北京體育大學(xué)學(xué)報(bào),1994,17(3):20-23.

[2]孫 志,張中成,劉志誠(chéng).營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2002,18(4):466-467.

[3]錢伯初,史 紅,呂燕萍.肥胖動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志,2007,16(15):1159-1162.

[4]王芃芃,黃 磊,伍曉雄,等.高脂飲食對(duì)小鼠脂質(zhì)代謝和leptin基因表達(dá)水平的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2008,16(1):40-44.

[5]Al-AwwadiNA,Araiz C,BornetA,et al.Extracts Enriched in Different Polyphenolic Families Nor malize Increased Cardiac NADPH Oxidase Expressionwhile HavingDifferential Effectson Insulin Resistance,Hypertension,and Cardiac Hypertrophy in High-Fructose-Fed Rats[J].J Agric Food Chem,2005,53(1):151-157.

[6]Lauterio TJ,Bond JP,Ulman EA.Development and characrization of a purified diet to identify obesity-susceptible and resistant rat[J].J Nutr,1994,124(11):2172-2178.

[7]MASEK J&FABRY P.Hight-fat diet and the development of obesity in albino rats[J].Experientia,1959,15(15):444-445.

[8]Araújo EP,De Souza CT,UenoM,et al.Infliximab restores glucose homeostasis in an animalmodel of diet-induced obesity and diabetes[J].Endocrinology,2007,148(12):5991-5997.

[9]Woods SC,Seeley RJ,Rushing PA,et al.A controlled high-fat diet induces an obese syndrome in rats[J].J Nutr,2003,133(4):1081-1087.

[10]Buettner R,Parhofer KG,WoenckhausM,et al.Defining high-fatdiet rat models:metabolic and molecular effects of different fat types[J].J Mol Endocrinol,2006,36(3):485-501.

[11]申瑞玲,馬 婧.四種肥胖動(dòng)物造模方法的比較[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2007,28(3):105-108.

[12]Levin BE,Triscari J,Sullivan AC.Altered sympathetic activity during development of diet-induced in rats[J].Am J Physiol,1983,244(3):R347-355.

[13]Levin BE&Dunn-Meynell AA.Defense of body weight against chronic caloric restriction in obesity-prone and-resistant rats[J].Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2000,278(1):R231-237.

[14]AbouMrad J,Yakubu F,Lin D,et al.Skeletal muscle composition in dietary obesity-susceptible and dietary obesity-resistant rats[J].Am J Physiol,1992,262(4 Pt 2):R684-8.

[15]何曉燁,石鳳英.高脂飲食在誘導(dǎo)大鼠肥胖及肥胖抵抗中的作用[J].中國(guó)臨床康復(fù),2002(6):60-61.

[16]孫長(zhǎng)顥,劉 榮,李 穎,等.飲食誘導(dǎo)肥胖抵抗大鼠激素敏感脂肪酶基因的表達(dá)[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2004,38(5):330-341.[17]Levin BE.Arcuate NPY neurons and energy homeostasis in diet-induced obese and resistant rats[J].Am J Physiol,1999,276(2 Pt 2):R382-7.

[18]SinhaMK.Human Leptin:the hor mone of adipose tissue[J].Eur J Endocrinol,1997,136(5):461-64.

[19]MagniP,LiuzziA,DozioE,et a.l Free and bound plasma leptin in normalweight and obese men and women:relationship with body composition,resting energy expenditure,insulin-sensitivity,lipid profile and macronutrient preference[J].Clin Endocrinol(Oxf),2005,62(2):189-196.

[20]Ghatta S,Srinivasan K,Kaul CL,et al.Astudy on alpha-adrenoceptormediated contractile responsesof high fat diet fed rat thoracic aorta[J].Pharmazie,2005,60:142-146.

[21]Viswanad B,Srinivasan K,Kaul CL,et al.Effect of tempol on altered angiotensinⅡand acetylcholine-mediated vascular responses in thoracic aorta isolated from ratswith insulin resistance[J].Pharmacol Res,2006,53:209-215.

[22]Cacho J,Sevillano J,de Castro J,et al.Validation of simple indexes to assess insulin sensitivity during pregnancy in W istar and Sprague-Dawley rats[J].Am J Physiol Endocrinol Metab,2008,295(5):E1269-1276.

[23]張 貝,袁 莉,曹玲玲,等.長(zhǎng)期高脂飼養(yǎng)大鼠胰島形態(tài)功能改變與外周胰島素抵抗的關(guān)系[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志,2006,22(5):467-471.

[24]Kim SP,EllmererM,Kirkman EL,et al.Beta-cell"rest"accompanies reduced first-pass hepatic insulin extraction in the insulin-resistant,fat-fed canine model[J].Am J Physiol EndocrinolMetab,2007,292(6):E1581-1589.

[25]Metter EJ,W indham BG,Maggio M,et al.Glucose and insulin measurements from the oral glucose tolerance test andmortalityprediction[J].Diabetes Care,2008,31(5):1026-1030.

[26]Andrikopoulos S,BlairAR,Deluca N,et al.Evaluating the glucose tolerance test in mice[J].Am J Physiol EndocrinolMetab,2008,295(6):E1323-1332.

責(zé)任編輯:喬艷春

Establishment of Obesity Rat An imalM odel with Leptin Resistance and Insul in Resistance

TAN Yan1,CHEN W enhe2,SUN Q ingyan2
(1.P.E.School,N anjing U niversity of Posts and Telecomm unications,N anjing210046,Jiangsu,China;2.School of Kinesiology,Shanghai Sport U niversity,Shanghai200438,China)

Objective:To establish the obesity rat anim alm odelw ith leptin resistance and insulin resistance through high fat diet.M ethods:Rats w ere fed w ith improved high fat diet for8w eeks.To observe the indexes:weight,Lees index,fasting blood glucose,insulin,HOMA-IR,leptin,oral glucose tolerance test,insulin release test and compared w ith control group rats.Results:Besides FBG,the indexes of m odel group rats w ere significantly higher than control group rats(P＜0.05).Conclusions:H igh saturated fatty acid diet can induce obesity rat w ith leptin resistance and insulin resistance.

high fat diet;obesity rat m odel;leptin resistance;insulin resistance

G804.2

A

1004-0560(2010)06-0087-04

2010-09-13;

2010-10-15

上海體育學(xué)院研究生教育創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(yjscx2009b03)。

談 艷(1974-),女,講師,博士研究生,主要研究方向?yàn)檫\(yùn)動(dòng)生理學(xué)。