楊 梅 ，汪立琴 ，陳 童 ，郭志勤 ，郝 根 ，莎 拉 ，郭 立

（1.大連市金州區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督管理局，遼寧 大連 116100；2.新疆畜牧科學(xué)院農(nóng)業(yè)部家畜繁育生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830000；3.新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所，新疆 烏魯木齊 830000）

當(dāng)前，綿羊同期發(fā)情大多采用經(jīng)孕激素處理的陰道栓（CIDR、海綿栓）或注射PGF2α結(jié)合PMSG的方法。該方法存在繁瑣、費(fèi)時(shí)、成本高，且陰道栓易造成綿羊生殖道感染等問題。為此，我們?cè)诰d羊的繁殖季節(jié)，結(jié)合胚胎移植的同時(shí)，采用GnRH+PGF2α對(duì)受體綿羊進(jìn)行同期發(fā)情處理試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 受體羊 選擇2～4歲，健康、膘情中等經(jīng)產(chǎn)綿羊?yàn)槭荏w羊。

1.1.2 試驗(yàn)藥品 注射用促排卵素3號(hào)（杭州動(dòng)物藥品廠，批號(hào)：050403）；氯前列烯醇（齊魯動(dòng)物保健品廠）。胚胎解凍液、胚胎移植液（實(shí)驗(yàn)室配制）。

1.1.3 器械 外科手術(shù)器械，手術(shù)保定架，體式顯微鏡，加熱板，檢卵針，移植管等。

1.1.4 試情公羊 體格健壯，體重在70 kg以上的性欲較好的公羊?yàn)樵嚽檠颉?/p>

1.1.5 胚胎 為OPS玻璃化冷凍薩?？搜蚺咛?。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 受體羊同期發(fā)情 采用注射促排卵素3號(hào)和PG對(duì)受體綿羊進(jìn)行發(fā)情處理。受體綿羊在飼養(yǎng)管理?xiàng)l件、體況基本相同的情況下，隨即分為3個(gè)試驗(yàn)組。受體羊從11月6～8日注射促排卵3號(hào)，每只羊注射劑量為5 μg，第9天注射氯前列烯醇。根據(jù)PG劑量不同，試驗(yàn)分3個(gè)組。1組PG劑量0.161 mg/只，2組PG劑量0.2146 mg/只，3組PG劑量0.322 mg/只。24 h后，將試情公羊系試情布打入受體羊群，每日早晚兩次試情，觀察并記錄受體羊發(fā)情時(shí)間。

1.2.2 胚胎解凍 將OPS管從液氮中取出，迅速浸入含有0.35 mol/L蔗糖溶液的培養(yǎng)皿中，回收胚胎并迅速移入新鮮的0.20 mol/L蔗糖溶液中平衡5 min，最后在MPBS中平衡5min，洗凈后稍做培養(yǎng)，準(zhǔn)備移植。

1.2.3 胚胎移植 采用手術(shù)法移植。受體羊在手術(shù)前24 h禁食，羊麻醉后保定在手術(shù)架上，在乳房的前上方腹中線處刮毛、消毒，用手術(shù)刀切開一個(gè)約5 cm的切口，用食指和中指從腹腔中夾出子宮和卵巢，檢查、記錄受體羊卵巢上黃體發(fā)育情況。將黃體發(fā)育良好一側(cè)的子宮角取出體外，用12#針頭在子宮角戳一口，用移植管吸1～2枚優(yōu)質(zhì)胚胎于開口處移入子宮角內(nèi)，上涂抹油制劑青霉素，將子宮還原腹腔并縫合創(chuàng)口。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 同期發(fā)情效果

采用促排卵3號(hào)+PG誘導(dǎo)繁殖季節(jié)綿羊同期發(fā)情的試驗(yàn)結(jié)果表明，在注射PG后的72 h內(nèi)，3組羊均表現(xiàn)發(fā)情，發(fā)情率為100%；發(fā)情集中在48 h，分別為68.57%、57.58%和61.29%，3組間無顯著差異（P＞0.05）（表 1）。

表1 不同試驗(yàn)組同期發(fā)情效果

2.2 排卵結(jié)果

根據(jù)受體羊發(fā)情后胚胎移植時(shí)的黃體觀察，3組的發(fā)情羊的排卵率均在90%以上，組間無顯著差異（P＞0.05）；第1組的平均黃體為2.77±1.29個(gè)/只，與第2、3組平均黃體數(shù)比較，差異極顯著（P＜0.01）（表2）。

表2 不同試驗(yàn)組排卵數(shù)比較

2.3 移植結(jié)果

根據(jù)受體羊排卵和黃體發(fā)育情況，對(duì)86只受體羊的黃體側(cè)子宮角，移入兩枚經(jīng)玻璃化冷凍-解凍后的胚胎，其總受胎率為38.37%，產(chǎn)羔率為112.12%，組間無差異（P＞0.05）（表3）。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)得出，采用促排卵3號(hào)+PG在繁殖季節(jié)誘導(dǎo)綿羊同期發(fā)情的方法是有效的，72 h內(nèi)發(fā)情率達(dá)100%，排卵羊在90%以上，平均為93.94%（93/99）；3種不同PG劑量試驗(yàn)組之間，發(fā)情率無顯著差異，發(fā)情集中在PG注射后48 h。從表2、3結(jié)果可看出，低劑量PG誘導(dǎo)同期發(fā)情，排卵率高，黃體發(fā)育好，受胎率亦高。

上述結(jié)果說明，在綿羊繁殖季節(jié)，由于羊都處在發(fā)情周期，卵巢具備充分活性，所以采用促排卵3號(hào)+PG誘導(dǎo)綿羊同期發(fā)情方法是可行的。而且，每只羊僅需促排卵3號(hào)5μg和PG 0.161 mg，成本低、方法簡便，利于推廣應(yīng)用。

[1] 王光亞.山羊胚胎工程[M].楊凌:天則出版社，1993.

[2] 郭志勤.家畜胚胎工程 [M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社1998.

[3] 楊梅.利用CIDR+PMSG對(duì)乏情期綿羊同期發(fā)情處理的研究[J].草食家畜，2004.3.