青島市市立醫(yī)院（266071）莊安士 丁虹

α受體頡頏劑的經(jīng)典作用是通過(guò)阻斷α1、α2受體產(chǎn)生血管擴(kuò)張、血壓降低、興奮心功能以及擬膽堿和組胺樣作用。其興奮心功能作用是通過(guò)阻斷α2受體促進(jìn)去甲腎上腺素釋放，進(jìn)而加強(qiáng)了β1作用，使心臟興奮。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，α2受體不僅與促去甲腎上腺素釋放有關(guān)，還與其他參與痛覺(jué)過(guò)程的物質(zhì)如前列腺素等的釋放有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)，疼痛的發(fā)生與痛覺(jué)傳遞與交感神經(jīng)有密切關(guān)系。但是以上結(jié)論還沒(méi)有得到臨床的證實(shí)。吲哚拉明是α受體頡頏劑，它能阻斷α1、α2受體，能夠?qū)桓猩窠?jīng)產(chǎn)生阻滯作用。現(xiàn)在對(duì)其是否具有鎮(zhèn)痛作用尚無(wú)定論，也沒(méi)有臨床確切的鎮(zhèn)痛效果。筆者采用小鼠扭體實(shí)驗(yàn)和熱板法，以小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)和小鼠神經(jīng)模型縮爪反應(yīng)潛伏期（HWL）為痛閾指標(biāo)，對(duì)吲哚拉明在內(nèi)臟痛和神經(jīng)源性痛的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究。

1材料與方法

1.1 材料 體重18～24g的小鼠75只，均為雄性，由青島大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。所有小鼠都按HWL<3s或>5s和扭體次數(shù)15min內(nèi)小于40或大于20為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了篩選，去除了對(duì)刺激反應(yīng)遲鈍和過(guò)于敏感的小鼠。實(shí)驗(yàn)期間都正常自由取食和飲水，光暗周期12h/12h。實(shí)驗(yàn)藥品是吲哚拉明和0.55%冰醋酸溶液。以上藥品在進(jìn)行注射時(shí)均用生理鹽水配置成對(duì)應(yīng)的濃度。

1.2 方法 實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分，熱板實(shí)驗(yàn)和扭體實(shí)驗(yàn)。熱板法：取18只小鼠隨機(jī)分為三組，每組6只，分別為正常組、對(duì)照組（生理鹽水組）和實(shí)驗(yàn)給藥組（吲哚拉明組）。首先，對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行4天的熱板刺激適應(yīng)性訓(xùn)練，使小鼠的對(duì)熱刺激反應(yīng)較為平穩(wěn)。實(shí)驗(yàn)用熱板溫度為55攝氏度并維持。其次，制備神經(jīng)痛模型，將對(duì)照組和吲哚拉明組的小鼠進(jìn)行外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)痛模型。對(duì)小鼠腹腔內(nèi)注射魯米那（35mg/kg）麻醉，而后分離左側(cè)坐骨神經(jīng)，在坐骨神經(jīng)的中段2mm處用4號(hào)羊線疏松結(jié)扎5線，縫合好皮膚。然后飼養(yǎng)6天后進(jìn)行熱刺激實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組腹腔注射吲哚拉明3mg/kg，對(duì)照組同樣腹腔注射同體積生理鹽水。分別在給藥的第1、2、3、4天測(cè)試小鼠對(duì)熱刺激的縮爪反應(yīng)潛伏期（HWL）。

醋酸扭體法：取48只小鼠隨機(jī)分為8組，每組6只。8組小鼠再隨機(jī)分為2大組，每大組有4小組。兩大組分別為對(duì)照醋酸組和吲哚拉明組。吲哚拉明組腹腔注射3.5mg/kg吲哚拉明，對(duì)照醋酸組腹腔注射同體積的生理鹽水。然后所有兩大組中的4小組又隨機(jī)分別在吲哚拉明組注射吲哚拉明后的第1d、2d、3d、4d接受腹腔注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml，產(chǎn)生扭體反應(yīng)，記錄小鼠15min內(nèi)扭體次數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 研究和處理只選取實(shí)驗(yàn)中的第1、2、3、4天的數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)均為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，統(tǒng)計(jì)分析用完全隨機(jī)的方差分析（單因素方差分析），各組均數(shù)間比較用Student-Newman-Keuls法。所有統(tǒng)計(jì)分析H0均為沒(méi)有差別，H1為有差別，均以P<0.01為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 吲哚拉明明顯增加小鼠對(duì)熱刺激的縮爪反應(yīng)潛伏期（HWL）在1～4天的熱刺激實(shí)驗(yàn)中，坐骨神經(jīng)結(jié)扎的對(duì)照組（生理鹽水組）和吲哚拉明組的HWL都明顯低于正常未被結(jié)扎小鼠的HWL值，P<0.01。對(duì)照組與吲哚拉明組的HWL值明顯具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別，表現(xiàn)為在1～4天的熱板實(shí)驗(yàn)中，吲哚拉明組HWL都顯高于對(duì)照組的HWL，P<0.01。熱板實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)附表1。

2.2 吲哚拉明明顯抑制小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù) 在1～4天的腹腔內(nèi)注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml后，吲哚拉明組和對(duì)照醋酸組的扭體反應(yīng)次數(shù)具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表現(xiàn)為每天的吲哚拉明組小鼠明顯扭體反應(yīng)次數(shù)都明顯低于醋酸對(duì)照組，P<0.01。扭體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)附表2。

3 討論

交感神經(jīng)的功能障礙、神經(jīng)節(jié)的受損等與交感神經(jīng)性疼痛有關(guān)。這種疼痛的神經(jīng)病理學(xué)的主要表現(xiàn)為交感神經(jīng)介導(dǎo)性[1]。目前在臨床中所遇到的部分急性疼痛和多數(shù)慢性疼痛，大都是混合性疼痛。其疼痛機(jī)理復(fù)雜，有多種化學(xué)物質(zhì)、遞質(zhì)、受體、神經(jīng)纖維、激素等參與其中。痛因不同而有不同的臨床表現(xiàn)[2]。本實(shí)驗(yàn)觀察到，在注射吲哚拉明后，外創(chuàng)性慢性神經(jīng)痛模型的小鼠在熱板法中明顯產(chǎn)生了HWL延長(zhǎng)的現(xiàn)象；而在醋酸法中，注射了吲哚拉明的小鼠明顯較少了扭體次數(shù)。這些都說(shuō)明作為α受體阻斷劑的吲哚拉明有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

神經(jīng)損傷后，交感神經(jīng)在后根神經(jīng)節(jié)或末梢神經(jīng)水平上，對(duì)感覺(jué)神經(jīng)系統(tǒng)給予影響；交感神經(jīng)節(jié)后纖維、兒茶酚胺局部或全身用藥時(shí)即可引起反應(yīng)；其機(jī)制是由于交感神經(jīng)纖維內(nèi)存在的兒茶酚胺、神經(jīng)肽Y分別作用于α1、α2受體或Y1、Y2受體的結(jié)果。痛過(guò)用羊腸線疏松結(jié)扎坐骨神經(jīng)的方法，建立的外創(chuàng)性慢性神經(jīng)痛小鼠模型已廣泛應(yīng)用各類疼痛研究實(shí)驗(yàn)中[3]。臨床上類似的疼痛病例表現(xiàn)為灼痛等難耐性疼痛。這種疼痛與交感神經(jīng)有密切關(guān)系，往往采用物理或藥物破壞神經(jīng)節(jié)的方法。但現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)這一方法有著不可忽視的不良反應(yīng)，且效果還有待進(jìn)一步地探討。因此，對(duì)于采用藥物阻滯交感神經(jīng)及其遞質(zhì)和受體的方法，已越來(lái)越得到重視。本實(shí)驗(yàn)就觀察到α受體阻斷劑的吲哚拉明對(duì)慢性神經(jīng)痛模型小鼠有著明顯鎮(zhèn)痛作用,給人們已啟示。

附表1 外周神經(jīng)損傷慢性神經(jīng)痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明對(duì)熱刺激的縮爪反應(yīng)潛伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

附表1 外周神經(jīng)損傷慢性神經(jīng)痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明對(duì)熱刺激的縮爪反應(yīng)潛伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

注：①與正常組的HWL值比較，P＜0.01；②與生理鹽水（對(duì)照組）的HWL值比較，P＜0.01

組別 例數(shù) 腹腔注射吲哚拉明后的時(shí)間(天)1 2 3 4正常組 6 6.53±0.16 6.45±0.24 6.14±0.15 6.12±0.06生理鹽水組 6 4.43±0.17① 4.23±0.35① 4.16±0.28① 4.27±0.43①吲哚拉明組 6 5.57±0.14①② 5.95±0.36①② 5.56±0.17①② 5.34±0.43①②

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明對(duì)0.55%冰醋酸的扭體作用（扭體次數(shù)）( ±s,n=6)

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明對(duì)0.55%冰醋酸的扭體作用（扭體次數(shù)）( ±s,n=6)

注：① 與對(duì)照醋酸組扭體次數(shù)比較，P＜0.01

組別 例數(shù) 腹腔注射吲哚拉明后的時(shí)間(天)1 2 3 4對(duì)照醋酸組 6 25.73±1.17 26.25±2.34 25.55±2.17 26.46±1.85吲哚拉明組 6 8.24±1.16① 12.92±1.16① 15.57±2.11① 22.36±1.98①

總之，本實(shí)驗(yàn)觀察到，建立慢性神經(jīng)痛模型的小鼠比正常小鼠在熱板法中表現(xiàn)出了極大的疼痛反應(yīng)，其HWL值明顯縮短，表明這一疼痛的難耐性。在腹腔注射了吲哚拉明后，該模型的小鼠HWL值明顯比生理鹽水對(duì)照組延長(zhǎng)，表明吲哚拉明有著明顯的鎮(zhèn)痛作用。但是筆者也觀察到其HWL值并沒(méi)有接近正常小鼠值，這說(shuō)明吲哚拉明的鎮(zhèn)痛作用是否理想，可否應(yīng)用于臨床治療，還有待于進(jìn)一步研究。在醋酸法的實(shí)驗(yàn)中，筆者觀察到注射吲哚拉明的小鼠其扭體次數(shù)明顯減少，這說(shuō)明吲哚拉明對(duì)冰醋酸引起的內(nèi)臟痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)α受體阻斷劑吲哚拉明具有鎮(zhèn)痛作用提供了有效的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。