朱華云，談獻(xiàn)和*，楊卉，徐柏頤，沈小林

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210046；2.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，江蘇 姜堰 225500）

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

黃蜀葵種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究

朱華云1，談獻(xiàn)和1*，楊卉1，徐柏頤2，沈小林2

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210046；2.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，江蘇 姜堰 225500）

目的：研究黃蜀葵種子的品質(zhì)檢驗(yàn)方法和質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，為黃蜀葵種子檢驗(yàn)規(guī)程及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。方法：依據(jù)種子檢驗(yàn)方法對(duì)不同產(chǎn)地、不同年份的黃蜀葵種子的品質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果與結(jié)論：測(cè)定了不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的千粒重、含水率、生活力、發(fā)芽率等，并初步制定了黃蜀葵種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

黃蜀葵；種子；品質(zhì)檢驗(yàn)；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

黃蜀葵Abelmoschus manihot（L.）Medic為錦葵科植物，全草入藥，能清熱，涼血，解毒，其花性味甘寒滑，無(wú)毒，具有清利濕熱，消炎解毒之功效，內(nèi)服主治五淋，水腫；外用治療癰疽腫毒，湯水燙傷［1］。果實(shí)種子具有補(bǔ)脾健胃，生肌功效功能。治療消化不良、不思飲食，跌打損傷等［2］?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明，黃蜀葵花具有良好的清熱利濕解毒功能，顯示該藥具有明顯的抗炎，抗菌，鎮(zhèn)痛等藥理作用［3］。近年來(lái)對(duì)黃蜀葵的研究主要集中在化學(xué)成分分析與測(cè)定［4，5］、藥理作用［6］、栽培及繁育［7］方面，有關(guān)黃蜀葵種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面的研究未見(jiàn)報(bào)道。作者通過(guò)對(duì)黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量、生活力等主要品質(zhì)檢驗(yàn)指標(biāo)的研究，初步制訂了黃蜀葵種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料

GZP-30013光照培養(yǎng)箱，DHG-9023A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，F(xiàn)A-1004電子分析天平。實(shí)驗(yàn)用黃蜀葵種子采自江蘇南通、泰州、鎮(zhèn)江等7個(gè)栽培產(chǎn)地，具體來(lái)源和編號(hào)見(jiàn)表1。經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)談獻(xiàn)和教授鑒定，室溫儲(chǔ)藏備用。

表1 黃蜀葵種子編號(hào)及來(lái)源

2 方法

2.1 凈度分析

采用四分法分別將已抽取的3份樣品倒在光潔的桌面上，把純凈種子、廢種子和雜質(zhì)分開(kāi)。若樣品混有較大或多量的雜物時(shí)，要在樣品稱重后，在分取測(cè)定樣品前進(jìn)行必要的清理并稱重。重復(fù)3次，余同［8］。

種子凈度（%）＝100%－廢種子含量（%）－雜質(zhì)含量（%）

2.2 千粒重

將全部純凈種子用四分法分成4份，從每份中隨機(jī)取250粒，共1 000粒為1組，用1／10 000電子天平稱重。

2.3 含水量

105℃恒重法（標(biāo)準(zhǔn)法）。取5g整粒種子直接用于含水量的測(cè)定。先將稱量盒于105℃下烘干至恒重，稱重，再將樣品放入預(yù)先烘干和稱重過(guò)的樣品盒內(nèi)，在感量為0.001g的天平上稱取試樣3份。然后，打開(kāi)盒蓋，一起放入預(yù)熱至110℃的烘箱內(nèi)關(guān)好箱門(mén)，保持（105±2）℃，經(jīng)6h后取出，蓋上蓋子置于干燥器內(nèi)冷卻后稱重；再放入（105±2）℃烘箱內(nèi)2h取出，蓋上蓋子置于干燥器內(nèi)冷卻后稱重，直至后次稱重和前次稱重不超過(guò)0.02g為止，記下最后一次結(jié)果作為烘干后重，進(jìn)行水分含量計(jì)算［9］。

種子水分＝［（烘前試樣重－烘后試樣重）／烘前試樣重］×100%

2.4 生活力的測(cè)定

采用紅墨水法和四氮唑染色法（TTC法）測(cè)定黃蜀葵種子生活力。

2.4.1 TTC法 將待測(cè)種子在30～35℃溫水中浸泡2h，將各組種子沿種脊縱切成兩瓣，使胚1／2分，取半粒放入裝有0.5%TTC試管中，于30℃培養(yǎng)箱中染色1h。重復(fù)3次，每次50粒［10］。

2.4.2 紅墨水法 將待測(cè)種子在30～35℃溫水中浸泡2h，將各組種子沿種脊縱切成兩瓣，使胚1／2分，取半粒放入裝有5%紅墨水試管中，于30℃培養(yǎng)箱中染色15min，染色后倒去紅墨水，用清水沖洗多次直至沖洗液無(wú)色為止。重復(fù)3次，每次50粒。

生活力＝有生活力種子數(shù)／供試驗(yàn)種子數(shù)×100%

2.5 發(fā)芽實(shí)驗(yàn)

取純凈種子，于25℃光照恒溫紙質(zhì)發(fā)芽，3次重復(fù)，每重復(fù)50粒種子，每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，稱重補(bǔ)水，第15天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率。根據(jù)生產(chǎn)需要，以第5天的種子的發(fā)芽率為發(fā)芽勢(shì)。

發(fā)芽率＝發(fā)芽種子總數(shù)／供試種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽勢(shì)＝前五天發(fā)芽種子總數(shù)／供試種子總數(shù)×100%

3 結(jié)果與分析

3.1 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的凈度

黃蜀葵種子的凈度多在95%以上，不同產(chǎn)地的黃蜀葵種子顯著性差異不大，但是其中ns-3的凈度最低，含黃蜀葵宿存花萼、種殼和其他混雜物較多，凈度僅為85.43%，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量

3.2 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子千粒重

黃蜀葵種子的千粒重在15.74～17.49g，其中ns-4的種子鈍圓，大而飽滿，其千粒重高達(dá)17.492 2g，而gg種子的千粒重較小，結(jié)果見(jiàn)表2。

3.3 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的含水率

黃蜀葵種子含水量在7%～11%。其中sy種子含水率最高，為10.95%，而gg種子含水率最低，為7.71%，結(jié)果見(jiàn)表2。

3.4 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的生活力

用TTC法和紅墨水法測(cè)定不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的生活力在84%～94%，sy、jr-2，ns-2，ns-4的種子生活力較高，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 兩種方法測(cè)定不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的生活力

3.5 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的發(fā)芽率

不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)之間存在明顯差異。其中發(fā)芽率最高的是ns-3、ns-4黃蜀葵種子，達(dá)99%；發(fā)芽勢(shì)最高的是sy種子，為86%，結(jié)果見(jiàn)表4。編號(hào)為qd的種子不同時(shí)間發(fā)芽情況見(jiàn)圖1～3。

表4 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)

圖1 qd第3天的發(fā)芽情況

圖2 qd第7天的發(fā)芽情況

圖3 qd第15天的發(fā)芽情況

3.6 黃蜀葵種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的制定

以黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量、生活力和發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)作為黃蜀葵種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的參考值，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際和可操作性，在此基礎(chǔ)上初步制定了黃蜀葵種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表5。

表5 黃蜀葵種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

4 討論

4.1 黃蜀葵種子生活力測(cè)定

種子生活力測(cè)定方法有多種，作者采用TTC法和紅墨水法測(cè)定黃蜀葵種子的生活力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示用TTC法測(cè)定的生活力稍高于用紅墨水法測(cè)定的生活力?？疾炝它S蜀葵種子的不同浸泡時(shí)間（1，2，4，10，24h）、不同濃度的四氮唑溶液（0.5%，0.4%，0.3%，0.2%，0.1%）、不同染色時(shí)間，確定黃蜀葵種子生活力測(cè)定的最佳條件為浸泡2h，0.5%四氮唑溶液染色1h，5%紅墨水溶液染色15min，染色溫度30℃。

4.2 種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

種子質(zhì)量包含內(nèi)在和外在的指標(biāo)。作者以發(fā)芽率、千粒重、水分和凈度以及生活力5項(xiàng)指標(biāo)初步制定了黃蜀葵種子質(zhì)量的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。分級(jí)方法采用最低定級(jí)原則，即任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)都不能作為相應(yīng)等級(jí)的合格種子。在分級(jí)的5項(xiàng)指標(biāo)中，發(fā)芽率最為重要，因其可較直接反映種子的田間出苗率。生活力的高低在一定程度上反映了種子活力的高低，可以作為種子活力的判斷依據(jù)。千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而凈度和水分卻不同，往往可通過(guò)再加工如清選和干燥等來(lái)提高質(zhì)量。但是發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的，離不開(kāi)凈度分析。綜上所述，可將發(fā)芽率、生活力作為衡量黃蜀葵種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)，黃蜀葵種子的千粒重、含水量、凈度可作為衡量其標(biāo)準(zhǔn)的次要依據(jù)。

不同來(lái)源黃蜀葵種子質(zhì)量波動(dòng)較大，種子質(zhì)量最重要的指標(biāo)發(fā)芽率相差懸殊，最低值為72%，最高值可達(dá)100%。目前，藥用植物種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及品質(zhì)檢驗(yàn)研究方法主要參考農(nóng)作物種子，同時(shí)結(jié)合藥用植物種子自身的特性進(jìn)行一定的修改，作者亦是參照其他農(nóng)作物的基礎(chǔ)上對(duì)黃蜀葵種子質(zhì)量檢測(cè)研究進(jìn)行了初步的探討。

［1］吳征鎰，周太炎，肖培根，等.新華本草綱要（第二冊(cè)）［M］.上海：上?？萍汲霭嫔?，1991.

［2］史剛榮.黃蜀葵的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)野生植物資源，2003，22（6）：28-29.

［3］司徒曼麗，李培智.黃蜀葵臨床應(yīng)用與作用原理研究發(fā)現(xiàn)可喜苗頭［J］.安徽醫(yī)藥，1998，4（15）：32-33.

［4］徐柏頤.HPLC法測(cè)定黃蜀葵花中金絲桃苷的含量［J］.江蘇藥學(xué)與臨床研究，2006，14（2）：32-34.

［5］周正華，杜安全，王先榮.黃蜀葵花中黃酮類成分的含量測(cè)定［J］.中藥材，2004，27（11）：835.

［6］徐錫蘭，鄔嘉琛，黃啟金，等.黃蜀葵花膠囊治療慢性腎炎濕熱證43例［J］.山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，24（5）：345-347.

［7］繆辰，胡星.加快黃蜀葵栽培技術(shù)推廣提升姜堰種植業(yè)發(fā)展水平［J］.上海農(nóng)業(yè)科技，2007，（3）：18.

［8］賀玉林，李先恩，淡紅梅，等.遠(yuǎn)志種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.種子，2007，26（1）：106-107.

［9］郭巧生，厲彥森，王長(zhǎng)林.明黨參種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2007，32（6）：478-480.

［10］郭巧生，趙榮梅，劉麗，等.桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2007，32（5）：377-381.

Study on Seed Quality Test and Quality Standard of Abelmoschus manihot L.

Zhu Huayun1，Tan Xianhe1，Yang Hui1，Xu Boyi2，Shen Xiaolin2
（1.Nanjing University of Traditional Chinese Medicine，Nanjing Jiangsu210046，China；2.SZYYGroup Pharmaceutical Limited，Jiangyan Jiangsu225500，China）

Objective：To study seed quality testingmethods and grade scale，and provide basis

for establishing seed inspective procedure and quality standard of Abelmoschus manihot（L.）Medic.Methods：The seed quality and planting quality of Abelmoschus manihot（L.）Medic from different producing aeras with different year of production weremeasured.Results and conclusion：The range of seed purity，weight per 1 000 seeds，seed moisture content，seed viability and sprouting rate were determined and the primary seed quality classification standard was established.

Abelmoschus manihotL.；Seed；Quality test；Quality standard

*談獻(xiàn)和，E-mail：xianhetan＠163.com

2009-12-20）