沈雪莉，張薇，張斯萌，崔夢(mèng)遙

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科，沈陽(yáng) 110001； 2.遼寧電力中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，沈陽(yáng) 110015； 3.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)94期臨床醫(yī)學(xué)七年制，沈陽(yáng) 110001）

動(dòng)脈粥樣硬化是腦梗死的主要病因及病理基礎(chǔ)，大量研究表明動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與多種因素相關(guān)，包括血管內(nèi)皮損傷、高血壓、吸煙、飲酒、高膽固醇、同型半胱氨酸等［1，2］。近年來(lái)研究資料表明人巨細(xì)胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）感染內(nèi)皮細(xì)胞可能在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用［2，3］。Guech-Ongey 等［4］和 Potena［5］研究指出急性心腦血管事件與HCMV感染相關(guān)，同時(shí)是腦梗死患者病情進(jìn)展的重要原因之一。本研究旨在對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化及動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死患者進(jìn)行HCMV抗體檢測(cè)，從血清學(xué)角度來(lái)驗(yàn)證頸動(dòng)脈粥樣硬化及動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死的發(fā)生及病情進(jìn)展與HCMV感染的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

1.1.1 病例選擇：選取2009年1月至12月期間在我院神經(jīng)內(nèi)科住院和門(mén)診就診患者230人，其中健康對(duì)照72人（對(duì)照組），男42人、女30人，年齡44~75歲；頸動(dòng)脈粥樣硬化77人（頸動(dòng)脈粥樣硬化組），男44人、女33人，年齡46~73歲；動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死（腦梗死組）81人，男49人，女32人，年齡45~75歲；各組性別、年齡匹配無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.1.2 各組入選標(biāo)準(zhǔn)：正常對(duì)照組標(biāo)準(zhǔn)為頸動(dòng)脈超聲正常、頭CT/MRI檢查未見(jiàn)異常病灶，無(wú)神經(jīng)功能缺損體征。頸動(dòng)脈粥樣硬化組標(biāo)準(zhǔn)為頸動(dòng)脈超聲檢查證實(shí)有頸內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)膜增厚、斑塊形成和管腔狹窄，頭CT/MRI檢查未見(jiàn)異常病灶，無(wú)神經(jīng)功能缺損體征。腦梗死組符合1995年第四屆全國(guó)腦血管病會(huì)議腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，并經(jīng)頭CT/MRI檢查證實(shí)為腦梗死。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡>75歲、出血性腦卒中、腦栓塞、短暫腦缺血否發(fā)作、入院前4周有發(fā)熱及感染史、入院前4周內(nèi)應(yīng)用抗生素及免疫抑制劑、血液病、心肝腎功能?chē)?yán)重不全者、酗酒及長(zhǎng)期服用避孕藥者。

1.2 主要儀器與方法

1.2.1 儀器及試劑：電熱恒溫箱、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、HCMV IgM抗體檢測(cè)試劑盒（德國(guó)）。

1.2.2 HCMV IgM抗體檢測(cè)方法：采集各組患者空腹靜脈血5 mL，1 500 r/min離心取上清，－70℃冰箱保存，用ELISA方法檢測(cè)血清HCMV IgM抗體，操作過(guò)程及結(jié)果評(píng)定嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。用酶標(biāo)儀405 nm處讀取OD值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行方差分析并進(jìn)行組間兩兩比較；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組HCMV IgM抗體OD值比較

正常對(duì)照組、頸動(dòng)脈粥樣硬化組及腦梗死組血清HCMV IgM抗體的OD值分別為（0.60±0.05）、（0.81±0.08）和（0.94±0.07），實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），2實(shí)驗(yàn)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組HCMV IgM抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較

正常對(duì)照組、頸動(dòng)脈粥樣硬化組及腦梗死組血清檢測(cè)HCMV IgM抗體的陽(yáng)性率分別為17.8%（13/72）、39%（30/70）和 49.4%（40/81），實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；2實(shí)驗(yàn)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3 HCMV IgM抗體陽(yáng)性與頸動(dòng)脈粥樣硬化及腦梗死相關(guān)分析

HCMV IgM抗體陽(yáng)性與頸動(dòng)脈粥樣硬化和腦梗死發(fā)生的相對(duì)危險(xiǎn)度（OR）分別是2.95和4.51，95%可信區(qū)間分別是［1.39~6.27］和［2.16~9.40］。

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化是急性腦血管事件的主要病理基礎(chǔ)和重要原因，70%~79%的缺血性腦卒中系由頸動(dòng)脈粥樣硬化引起。早期動(dòng)脈粥樣硬化病變?yōu)閯?dòng)脈脂質(zhì)條紋，動(dòng)脈壁增厚，在脂蛋白攝入和排除失衡時(shí)，逐步演變?yōu)椴环€(wěn)定的纖維斑或易破碎的粥樣斑，管腔狹窄或閉塞，血流速度加快，斑塊碎片脫落造成遠(yuǎn)端動(dòng)脈閉塞，最終成為動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與多種因素相關(guān)，包括血管內(nèi)皮損傷、高血壓、吸煙、飲酒、高膽固醇、同型半胱氨酸等［7］。自1984年Fabricant在火雞巨細(xì)胞病毒接種后引起動(dòng)脈粥樣硬化以來(lái)，病毒感染因素愈加受到人們重視。近年來(lái)，大量的血清流行病學(xué)和分子生物學(xué)的研究資料表明人HCMV感染內(nèi)皮細(xì)胞可能在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用［2，3］。但國(guó)內(nèi)有關(guān)這方面研究開(kāi)展的較少。

HCMV IgM是HCMV進(jìn)入人體最早產(chǎn)生的抗體，它在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間不超過(guò)4個(gè)月，是HCMV活動(dòng)性感染的血清學(xué)標(biāo)志之一，因而檢測(cè)血清HCMV IgM是識(shí)別HCMV活動(dòng)感染的一種簡(jiǎn)便易行的方法。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，頸動(dòng)脈粥樣硬化組和腦梗死組患者血清中HCMV IgM抗體OD值和HCMV IgM抗體陽(yáng)性率顯著高于正常對(duì)照組，說(shuō)明HCMV感染與頸動(dòng)脈粥樣硬化和腦梗死的發(fā)生有關(guān)。通過(guò)進(jìn)一步分析顯示，與HCMV IgM抗體陰性者比較，HCMV IgM抗體陽(yáng)性者發(fā)生頸動(dòng)脈粥樣硬化的相對(duì)危險(xiǎn)性為2.95倍；HCMV IgM抗體陽(yáng)性者發(fā)生腦梗死的相對(duì)危險(xiǎn)性為4.51倍，提示HCMV感染是缺血性腦血管病發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一。

Chen等［8］通過(guò)PCR法和原位雜交術(shù)檢測(cè)HCMV即刻早期基因（IEA）和晚期基因（LA）片段，發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化組IEA和EA基因陽(yáng)性率顯著高于無(wú)動(dòng)脈粥樣硬化組，且病毒DNA主要集中于內(nèi)皮細(xì)胞核和內(nèi)膜下肌層及病變區(qū)域的平滑肌層，提示HCMV感染可能為動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制之一。Tarnacka等［9］測(cè)定腦卒中患者及正常對(duì)照組血清HCMV抗體滴度，結(jié)果顯示腦卒中組明顯升高，認(rèn)為HCMV是腦卒中相關(guān)的危險(xiǎn)因素。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述研究結(jié)果一致，提示HCMV感染是腦血管疾病發(fā)生和發(fā)展的危險(xiǎn)因素之一。

目前認(rèn)為巨細(xì)胞病毒參與動(dòng)脈粥樣硬化和腦梗死的作用機(jī)制可能有以下4個(gè)方面：（1）HCMV潛伏感染可使內(nèi)皮細(xì)胞的功能受損，導(dǎo)致一氧化氮合成和分泌減少。一氧化氮分泌減少使血小板從抗凝狀態(tài)變?yōu)榇倌隣顟B(tài)，增加其在血管內(nèi)皮的黏附，促使血栓形成［10］；（2）HCMV感染平滑肌細(xì)胞可直接誘導(dǎo)局部血小板衍生生長(zhǎng)因子表達(dá)，后者可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增殖和新內(nèi)皮細(xì)胞的形成參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展和再狹窄形成［11］；（3）HCMV引起炎性反應(yīng)導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定［12］；（4）HCMV 可引起代謝紊亂，脂質(zhì)沉積增加［13］。

本研究從血清學(xué)角度為澄清HCMV感染與頸動(dòng)脈粥樣硬化和腦梗死的關(guān)系提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為今后制定腦血管疾病發(fā)生和發(fā)展的防治措施提供了重要的參考依據(jù)。

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