李曉濤，夏岳，郭喜朝，魏立業(yè)，戚國慶

冠心病是一種常見的臨床疾病，其發(fā)病有多種因素參與。骨橋蛋白是一種分泌型的糖基化磷蛋白，它在細胞外基質(zhì)中具有重要的功能。研究表明動脈粥樣硬化病變部位存在骨橋蛋白信使核糖核酸(mRNA)呈高表達狀態(tài)，而且細胞外基質(zhì)中的骨橋蛋白含量也明顯升高。本研究通過觀察冠心病患者和非冠心病患者血漿骨橋蛋白的水平，探討血漿骨橋蛋白水平與冠狀動脈病變狹窄程度的關(guān)系。

1 資料和方法

研究對象:選取2008-10至2009-10我院住院經(jīng)冠狀動脈造影證實的冠心病患者70例(冠心病組)，男39，女31，平均年齡(63±8)歲;另選同期冠狀動脈造影陰性的非冠心病患者30例(對照組)，男13，女17，平均年齡(62±7)歲。排除標準:有明確的細菌、病毒感染者;急、慢性炎癥性和免疫性疾病、慢性結(jié)締組織病患者;惡性腫瘤者、血液病患者;1個月內(nèi)有手術(shù)或創(chuàng)傷史者;已知的血栓性疾病患者;嚴重貧血、出血性疾病患者;嚴重肝、腎功能不全者;急性心肌梗死患者。

研究方法:所有患者均詳細記錄臨床病史和一般資料，包括性別、年齡、身高、體重、吸煙史、血壓等情況。包括血常規(guī)、生化及免疫學(xué)檢查。血漿骨橋蛋白的測定:于入院后次日晨空腹抽取靜脈血5ml，置于10ml肝素抗凝管。標本采集后以3000 r/min速度離心10 min，取上清液血漿分裝于EP管，置于－70℃低溫保存以備日后統(tǒng)一檢測。血漿骨橋蛋白的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司代理，具體操作嚴格按說明書操作。應(yīng)用Judkins方法進行選擇性冠狀動脈造影，每支血管選擇最佳多體位投照，造影結(jié)果由2名有經(jīng)驗的醫(yī)師分析完成。冠狀動脈病變狹窄程度采用累積記分法進行狹窄程度積分。并根據(jù)其冠狀動脈血管病變支數(shù)又將冠心病組分為1支病變亞組(n=24)、2支病變亞組(n=21)和3支病變亞組(n=25)，分別比較3亞組之間血漿骨橋蛋白的水平。

統(tǒng)計學(xué)方法:首先進行組間均衡性檢驗;正態(tài)分布或輕度偏態(tài)分布的計量資料以表示，兩組比較應(yīng)用t檢驗分析。明顯偏態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù)，第75百分位數(shù))表示，兩組比較應(yīng)用Mann-Whitney檢驗。三組間計量資料服從正態(tài)分布且方差齊的成組設(shè)計采用方差分析，組間比較采用SNK-q檢驗;非正態(tài)分布的計量資料采用Kruskal-Wallis法進行成組設(shè)計的多樣本比較，組間的兩兩比較采用Neminyie法進行檢驗。在單因素分析的基礎(chǔ)上采用多元線性回歸分析。計數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗。數(shù)據(jù)間相關(guān)性采用相關(guān)分析;冠狀動脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的關(guān)系采用多元線性回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，以上所有數(shù)據(jù)處理均用SPSS17.0軟件。

2 結(jié)果

冠心病組較對照組血漿骨橋蛋白水平、甘油三脂、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、所服用阿司匹林、服用β受體阻滯劑比例升高，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。兩組之間其它臨床資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)。見表1。

表1 兩組一般臨床資料比較()

表1 兩組一般臨床資料比較()

注:與對照組比*P＜0.05。△明顯偏態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù)，第75百分位數(shù))表示。HDL-C:高密度脂蛋白膽固醇;LDL-C:低密度脂蛋白膽固醇;ACEI:血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑;ARB:血管緊張素受體拮抗劑

對照組(n=30) 冠心病組(n=70)62±7 63±8男性［例(%)］13(43) 39(56)吸煙史［例(%)］11(37) 33(47)高血壓?。劾?%)］17(57) 43(61)服用ACEI或ARB［例(%)］9(30) 32(46)服用阿司匹林［例(%)］5(17) 53(76*)服用β受體阻滯劑［例(%)］6(20) 42(60*)服用他汀類藥物［例(%)］10(33) 35(50)體重指數(shù)△(kg/m2) 23.50(21.75，25.83) 24.40(22.38，26.15)血糖△(mmol/L) 5.73(4.91，7.32) 6.32(5.33，7.82)甘油三脂△(mmol/L) 1.61(1.28，2.11) 1.93(1.53，2.63)*總膽固醇(mmol/L) 4.7±1.3 5.2±1.4 HDL-C△(mmol/L) 1.14(1.02，1.34) 0.99(0.80，1.19)*LDL-C(mmol/L) 2.04±0.83 2.45±0.91*血漿骨橋蛋白△(ng/L) 391(287，537) 537(372，725)年齡(歲)*

冠心病組不同冠狀動脈病變支數(shù)亞組間兩兩比較，血漿骨橋蛋白水平、甘油三酯、總膽固醇、HDL-C、LDL-C差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，表2)。在經(jīng)協(xié)變量進行協(xié)方差分析后，甘油三酯、總膽固醇、LDL-C在三組間分布差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.003、0.046、0.000)。采用多元線性回歸分析均衡了年齡、性別、吸煙史、高血壓病、血糖、所服用藥物、血脂等影響后，不同冠狀動脈病變支數(shù)亞組間的血漿骨橋蛋白水平差異仍具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

冠狀動脈病變狹窄程度積分、病變血管支數(shù)與各變量的偏相關(guān)分析:將年齡、吸煙史、高血壓病、性別作為控制變量，冠狀動脈病變狹窄程度積分、病變血管支數(shù)與各變量進行偏相關(guān)分析可知，冠狀動脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白(r=0.416，P＜0.01)、甘油三酯(r=0.434，P＜0.001)、LDL-C(r=0.402，P＜0.01)呈顯著性正相關(guān);病變血管數(shù)與骨橋蛋白水平(r=0.372，P＜0.01)、甘油三酯(r=0.415，P＜0.001)、總膽固醇(r=0.262，P＜0.05)、LDL-C(r=0.489，P＜0.001)呈顯著性正相關(guān)。

從冠狀動脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的多元線性回歸分析:以冠狀動脈病變狹窄程度積分為應(yīng)變量，以年齡、性別、吸煙史、高血壓病、體質(zhì)量指數(shù)、甘油三酯、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、血糖、骨橋蛋白、所服用藥物為自變量，進行多元逐步線性回歸分析可知，冠狀動脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白(β=0.295，P＜0.05)、甘油三酯(β=0.308，P＜0.05)、LDL-c(β=0.296，P＜0.05)獨立正相關(guān)。見表3。

表2 不同冠狀動脈病變支數(shù)亞組間臨床特征的比較()

表2 不同冠狀動脈病變支數(shù)亞組間臨床特征的比較()

注:不同冠狀動脈病變支數(shù)亞組間兩兩比較▲P＜0.05?！髅黠@偏態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù)，第75百分位數(shù))表示。英文縮略語注見表1。

冠狀動脈病變支數(shù)1支病變亞組(n=24)2支病變亞組(n=21)3支病變亞組(n=25)年齡(歲) 65±7 63±8 63±9男性［例(%)］13(54) 9(43) 17(68)吸煙史［例(%)］11(46) 9(43) 13(52)高血壓?。劾?%)］13(54) 10(48) 15(60)服用ACE I或ARB［例(%)］11(46) 7(33) 14(56)服用阿司匹林［例(%)］18(75) 15(71) 20(80)服用β受體阻滯劑［例(%)］15(63) 12(57) 15(60)服用他汀類藥物［例(%)］10(42) 10(48) 15(60)體重指數(shù)△(kg/m2) 24.45(22.55，26.25) 23.70(21.95，26.45) 24.90(22.40，26.00)血糖(mmol/L) 6.30±1.32 6.62±1.62 6.77±1.55甘油三酯△(mmol/L) 1.65(1.30，2.00)▲ 1.93(1.46，2.52)▲ 2.15(1.93，2.75)▲總膽固醇(mmol/L) 4.58±1.45▲ 5.49±1.33▲ 5.43±1.17▲HDL-C△(mmol/L) 1.09(0.79，1.20)▲ 1.12(0.90，1.24)▲ 0.83(0.71，1.02)▲LDL-C(mmol/L) 1.99±0.83▲ 2.31±0.91▲ 3.02±0.67▲血漿骨橋蛋白△(ng/L) 455(295，667)▲ 519(323，591)▲ 678(492，911)▲冠狀動脈病變狹窄程度積分△ 5.0(4.0，5.0)▲ 9.0(7.5，9.5)▲ 12.0(10.0，13.5)▲

表3 冠狀動脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的多元線性回歸分析

3 討論

骨橋蛋白是細胞外基質(zhì)中一種重要的功能性蛋白，其相對分子質(zhì)量約為44 kDa，是一種分泌型糖基化磷蛋白，因其介導(dǎo)骨組織細胞與骨基質(zhì)的連接、參與骨基質(zhì)礦化和重吸收過程而得名［1］。作為一種基質(zhì)功能性非膠原蛋白，骨橋蛋白主要通過激活細胞內(nèi)特異性信號傳導(dǎo)系統(tǒng)而介導(dǎo)細胞粘附、遷移和增殖。在心血管系統(tǒng)中，一系列參與動脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄的活性因子，如血小板衍生因子、堿性成纖維生長因子、表皮細胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子-β、血管緊張素Ⅱ等能夠刺激血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞表達骨橋蛋白分子。

在正常的動脈壁骨橋蛋白表達甚微或幾乎不表達，但是Dhore等［2］人用免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)在動脈粥樣斑塊處的泡沫細胞中或者鈣化的部位骨橋蛋白表達明顯增加，人主動脈粥樣硬化斑塊中的巨噬細胞、平滑肌細胞、內(nèi)皮細胞都可以表達骨橋蛋白mRNA及合成骨橋蛋白。此外，不僅動脈粥樣硬化病變部位的內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞內(nèi)骨橋蛋白mRNA呈高表達狀態(tài)［3］，而且細胞外基質(zhì)中的骨橋蛋白含量也明顯升高。研究表明，骨橋蛋白可以通過促進血管平滑肌細胞的增殖和遷移、對巨噬細胞趨化作用以及促進外膜成纖維細胞向內(nèi)膜遷移而參與冠狀動脈動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。近來研究表明，骨橋蛋白作為一個細胞因子調(diào)節(jié)細胞功能而參與組織修復(fù)和炎癥過程［4］，研究發(fā)現(xiàn)在疾病和組織損傷引起的炎癥部位骨橋蛋白的水平增高。臨床研究表明穩(wěn)定性心絞痛患者中骨橋蛋白水平較正常對照組升高［5］。

本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者中血漿骨橋蛋白明顯升高，相關(guān)分析顯示冠狀動脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白、甘油三酯、LDL-C呈顯著性正相關(guān);病變血管數(shù)與骨橋蛋白、甘油三酯、總膽固醇和LDL-C水平呈顯著性正相關(guān)。在經(jīng)過多因素線性回歸分析均衡了年齡、性別、吸煙史、高血壓病等影響后顯示，骨橋蛋白、甘油三酯、LDL-C水平仍與冠狀動脈病變狹窄程度相關(guān)。表明血漿骨橋蛋白與冠狀動脈病變狹窄程度有關(guān)，與相關(guān)研究結(jié)果一致［6］。

本研究顯示血漿骨橋蛋白在冠心病患者中明顯升高，并且血漿骨橋蛋白水平在冠狀動脈病變血管數(shù)分組中的存在顯著性差異，并與其冠狀動脈病變狹窄程度呈正相關(guān)，表明冠心病患者血漿骨橋蛋白水平可能在一定程度上反映了冠狀動脈病變的狹窄程度。

［1］Oldberg A，F(xiàn)ranzen A，Heinegard D.Cloning and sequence analysis of rat bone sialoprotein(osteopontin)cDNA reveals an Arg-Gly-Asp cell-binding sequence .Proc Natl Acad Sci USA，1986，83(23):8819-8823.

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［3］Panda D，Kundu GC，Lee BI，et al.Potential roles of osteopontin and alphaVbeta3 integrin in the development of coronary artery restenosis after angioplasty.Proc Natl Acad Sci USA，1997，94 (17):9308-9313.

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