于紅濤，吳 濤，何錦照，張忠強(qiáng)

廣東省河源市人民醫(yī)院內(nèi)二科，廣東河源 517000

急件白血病是血液科的常見病、多發(fā)病，患者常出現(xiàn)細(xì)胞免疫功能低下，且應(yīng)用各種不同的化療方法及藥物后，容易使患者的細(xì)胞免疫功能進(jìn)一步降低，而化學(xué)后應(yīng)用輔助藥物治療可促進(jìn)患者細(xì)胞免疫功能的恢復(fù)。T淋巴細(xì)胞在細(xì)胞免疫中起著重要的調(diào)控作用，白血病患者表現(xiàn)為T淋巴細(xì)胞減少，T淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)[1]。本研究旨在探討化療聯(lián)合參附注射液對(duì)急性白血病患者T淋巴細(xì)胞亞群、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的影響，進(jìn)一步分析其治療急性白血病的免疫作用機(jī)制，為臨床治療提供進(jìn)一步的指導(dǎo)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2008年1月～2010年1月在我院就診的急性白血病患者30例作為治療組，患者年齡在36～76歲之間，平均（48.5±3.7）歲。另選同期30例急性白血病僅給予化療治療的患者作為對(duì)照組，患者年齡在34～73歲之間，平均（47.1±2.5）歲。兩組性別、年齡、分型等一般資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性（P＞0.05）。見表1。

1.2 治療方法

兩組均采用相同的化療方案，治療至少兩周以后評(píng)價(jià)療效?；熐昂蟛檠焊文I功能、心電圖、尿常規(guī)。對(duì)照組采用單一化療方案治療急性白血病。治療組在停化療時(shí)開始使用參附注射液40～60 ml加入5%GS 250 ml中靜脈點(diǎn)滴，每日1次，連用14 d。而治療兩周后復(fù)查血常規(guī)?；熐俺Ｒ?guī)給予昂丹司瓊止嘔，化療過程中給予水化、堿化。觀察患者的發(fā)熱，齒齦、皮膚、黏膜出血現(xiàn)象及其他不良反應(yīng)。

1.3 檢測方法

①采集兩組患者的外周靜脈血 3～5 ml，3000 r／min 離心10 min，取上層血清于-80℃冰箱保存待測。采用美國BD公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀FACS Calibuv測定兩組患者的T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞百分比，并計(jì)算CD4+T/CD8+T比值）。②采用ELISA方法檢測兩組血清IL-6和TNF-α水平。檢測試劑盒購于日本MBL公司，檢測過程嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.4 觀察項(xiàng)目

觀察比較兩組的療效，兩組患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平的變化，血清IL-6、TNF-α的變化以及兩組用藥的安全性。

表1 兩組一般資料比較（例）

1.5 療效評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù) 《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[2]評(píng)價(jià)療效。完全緩解（CR）：臨床癥狀消失，生活正常或接近正常；血象Hb≥100 g／L（男）或≥90 g／L（女），中性粒細(xì)胞絕對(duì)值≥1.5×109／L，PLT≥100×109／L，外周血分類無白血病細(xì)胞；骨髓像為原+幼稚淋巴細(xì)胞≤5%，或原+幼粒細(xì)胞≤5%，或原+幼稚單核細(xì)胞≤5%；紅細(xì)胞和巨核細(xì)胞系列正常。部分緩解（PR）：骨髓像為原+幼稚淋巴細(xì)胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚粒細(xì)胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚單核細(xì)胞＞5%，但＜20%；或臨床癥狀、血象中有一項(xiàng)未達(dá)CR者。未達(dá)CR或PR者為未緩解，CR和PR者之和為緩解。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用均數(shù)標(biāo)±準(zhǔn)差（）表示，組間及組內(nèi)比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后臨床療效比較

治療組總有效率為76.7%，對(duì)照組總有效率為56.7%，兩組總有效率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.346，P＜0.05）。 見表2。

2.2 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較

治療組和對(duì)照組治療后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均較治療前明顯升高。與對(duì)照組上述指標(biāo)比較，治療組改善的更明顯，兩組治療后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。兩組的CD8+T治療后較治療前無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表 3。

表2 兩組治療后臨床療效比較[n（%）]

表3 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較（）

表3 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較（）

組別 例數(shù) 時(shí)間30治療組 治療前治療后t值P值對(duì)照組30治療前治療后t值P值CD4+T（%）25.43±7.1431.30±6.256.375＜0.0526.37±6.4627.32±7.316.138＜0.05 CD8+T（%）32.76±5.6030.34±4.251.345＞0.0531.52±4.7429.25±6.181.541＞0.05 CD4+T/CD8+T 0.81±0.251.08±0.165.136＜0.050.78±0.160.96±0.295.243＜0.05

2.3 兩組治療前后血清白介素-6、腫瘤壞死因子-α變化比較

治療組和對(duì)照組治療后兩組的IL-6和TNF-α均較治療前明顯降低，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），且與對(duì)照組治療后比較，治療組降低的更明顯，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 4。

2.4 兩組不良反應(yīng)比較

兩組在治療期間未見明顯不良反應(yīng)發(fā)生，腎功能均正常，出現(xiàn)肝損害患者經(jīng)對(duì)癥處理均好轉(zhuǎn)。

3 討論

急性白血病患者本身免疫功能低下，化療是臨床治療白血病的常規(guī)手段，但是化療對(duì)細(xì)胞的免疫功能有明顯的抑制作用。因此，在化療結(jié)束后應(yīng)用輔助藥物可以使患者的細(xì)胞免疫功能有明顯的改善[3]。

表4 兩組治療前后血清IL-6、TNF-α變化比較（）

表4 兩組治療前后血清IL-6、TNF-α變化比較（）

治療組組別 例數(shù)30時(shí)間治療前治療后t值P值對(duì)照組30治療前治療后t值P值IL-6（ng/L）295.98±84.69107.22±63.4315.18＜0.01307.97±82.52156.33±71.6921.41＜0.01 TNF-α（μg/L）1138.91±147.89160.08±78.4146.15＜0.011122.13±145.64191.02±74.9648.16＜0.01

急性白血病患者 T淋巴細(xì)胞亞群 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的水平，能直接反映患者細(xì)胞的免疫功能。CD4+是輔助性T細(xì)胞的代表，CD8+是抑制性T細(xì)胞的代表。CD4+/CD8+值是機(jī)體免疫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的重要樞紐，生理狀態(tài)下CD4+和CD8+之間始終保持動(dòng)態(tài)平衡，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫狀態(tài)[4]。TNF-a主要由脂多糖（LPS）或卡介苗（BCG）活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，具有抗腫瘤、抗病毒的作用，也是重要的免疫調(diào)節(jié)分子和致炎因子[5]。IL-6通常以Th2細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞產(chǎn)生為主，可以促進(jìn)B細(xì)胞分化成熟，還可以刺激造血干細(xì)胞增生分化，參與炎癥反應(yīng)?；熀蠹毙园籽』颊逫L-6分泌水平明顯降低，說明化療后白血病患者處于免疫功能抑制狀態(tài)。因此，積極尋找有選擇性殺傷及免疫調(diào)節(jié)藥物成為治療白血病研究的重要課題[6]。

參附注射液由人參、附子的提取物組成，有調(diào)中益氣、實(shí)衛(wèi)固脫的作用，益肺健脾，補(bǔ)氣養(yǎng)血，激活骨髓造血功能，減少細(xì)胞破壞作用，能減輕化療對(duì)骨髓功能的抑制，使白細(xì)胞恢復(fù)時(shí)間縮短，降低白細(xì)胞、血小板減輕程度[7]。

本組資料結(jié)果顯示，治療組30例急性白血病患者在化療的同時(shí)應(yīng)用參附注射液后，治療組和對(duì)照組治療后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均較治療前明顯升高，且治療組上述指標(biāo)改善較對(duì)照組更明顯，說明其能改善急性白血病患者的免疫功能；同時(shí)，治療組和對(duì)照組治療后IL-6、TNF-α水平明顯降低，且治療組降低程度明顯低于對(duì)照組，說明參附注射液可通過影響急性白血病患者體內(nèi)IL-6、TNF-α的表達(dá)水平，進(jìn)一步干預(yù)二者對(duì)造血干細(xì)胞和白血病細(xì)胞增殖和分化的調(diào)控作用，從而達(dá)到治療的目的，與魏影非等[8]所報(bào)道的研究結(jié)果基本一致，但由于樣本量過小，對(duì)其機(jī)制仍需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。

[1]徐麗華.小兒急性白血病患者血清VEGF水平和外周血B細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群水平檢測的臨床意義[J].淮海醫(yī)藥,2008,26(1):7-8.

[2]張之南,沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].北京:科學(xué)出版社,2007:33.

[3]Brune M,Castaigne S,Catalano J,et al.Improved leukemia free survival after postconsolidation immunotherapy with histamine dihydro and chloride and interleukin-2 in acute myeloid leukemia:results of a randomized phase3 trial[J].Blood,2006,108(32):88-96.

[4]Angulo DG,Yuen C,Palla SL,et al.Absolute lymphocyte count is a novel prognostic indicator in AL and AML:implications for risk stratification and future studies[J].Cancer,2008,112(2):407-415.

[5]李輝,吳雨潔,仇海榮.T淋巴細(xì)胞亞群結(jié)合遺傳學(xué)檢測在初發(fā)急性白血病中的相關(guān)研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,25(2):84-85.

[6]吳朝陽,吳雅榮,王法春,等.急性白血病患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞水平檢測及臨床意義[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2008,18(5):432-433.

[7]譚琳,聶波,謝瑜.急性白血病患者化療后應(yīng)用白介素-2對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2010,7(2):17-18.

[8]魏影非,杜惠蘭,王素云,等.參附注射液配合化療治療急性白血病療效及對(duì)細(xì)胞免疫、血清IL-6和TNF-α水平的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2003,23(4):258-259.