劉志南,楊漢春

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 海淀 100193)

公豬異味(boar taint)是未去勢(shì)公豬肉中存在的一種令人討厭的異味、騷味、膻氣。未去勢(shì)公豬約有50%的幾率出現(xiàn)異味,而母豬和去勢(shì)過(guò)的公豬也有1%～3%存在異味[1]。產(chǎn)生公豬異味的成分,主要是兩種化合物,即雄酮(androstenone)和糞臭素(skatole)。雄酮是由睪丸分泌的一種甾類化合物,糞臭素是小腸中色氨酸分解后的產(chǎn)物。這兩種化合物具有高度的親脂性,在豬的脂肪組織中優(yōu)先累積,在豬肉烹制過(guò)程中釋放出來(lái)[2]。

傳統(tǒng)控制公豬異味的方法是手術(shù)去勢(shì)。目前,手術(shù)去勢(shì)仍是消除公豬異味十分有效的途徑。然而,手術(shù)去勢(shì)給仔豬帶來(lái)巨大的應(yīng)激和痛苦,增加感染和死亡幾率,并剝奪了公豬的自然合成代謝因子。與公豬相比,去勢(shì)豬要消耗更多的飼料,并且會(huì)導(dǎo)致豬的生長(zhǎng)性能明顯下降和過(guò)度的脂肪沉積[3-7]。

異普克(improvac)是一種公豬異味控制疫苗,可通過(guò)兩次免疫替代傳統(tǒng)的手術(shù)去勢(shì)來(lái)達(dá)到控制公豬異味的目的,同時(shí)發(fā)揮公豬巨大的生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)來(lái)獲得更大利益。

本試驗(yàn)通過(guò)異普克免疫豬與手術(shù)去勢(shì)公豬和完整公豬進(jìn)行的對(duì)比,測(cè)定脂肪樣本中的雄酮和糞臭素的含量,血清中的睪酮和免疫抗體水平,睪丸的寬度等來(lái)評(píng)價(jià)異普克的免疫效力,探討在我國(guó)通過(guò)免疫來(lái)替代手術(shù)去勢(shì)、進(jìn)而提高養(yǎng)豬生產(chǎn)性能的可行性。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)豬 廣西某大型豬場(chǎng),品種為杜長(zhǎng)大三元雜交豬。

1.2 異普克 輝瑞澳大利亞Parkville生產(chǎn)廠提供,經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)進(jìn)口到中國(guó)。100 mL塑料瓶包裝,2℃～8℃冷藏、避光保存。批號(hào)和有效期見表1。

表1 異普克疫苗和有效期

1.3 動(dòng)物挑選、分組、分欄 試驗(yàn)中所有公豬的日齡差異最大1周,將每窩健康公豬隨機(jī)分配到各試驗(yàn)組,使平均體重差異達(dá)到最小化。試驗(yàn)豬總數(shù)為400頭,分成5組:手術(shù)去勢(shì)組(T 01)80頭,異普克組240頭(3批疫苗 ×80頭,T 02、T 03、T 04),對(duì)照組(不去勢(shì)不免疫公豬,T 05)80頭。生理鹽水注射和異普克免疫均分別在15周齡和19周齡。23周齡時(shí)試驗(yàn)結(jié)束,屠宰所有試驗(yàn)豬。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表2。

表2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

所有試驗(yàn)豬在斷奶時(shí)稱重,根據(jù)同欄中體重差異最小化的原則按體重進(jìn)行分欄。欄位是隨機(jī)分配的。試驗(yàn)過(guò)程中可以變換各欄的分布位置,但欄內(nèi)的試驗(yàn)動(dòng)物不變。

1.4 異普克免疫 耳后皮下注射,兩次免疫至少間隔4周。首免在15周齡,二免在19周齡。使用

0.5 英寸(12 mm)、16號(hào)針頭和N J Philips Secure Plus 注射器。

1.5 樣本采集和檢測(cè)

1.5.1 血液樣品 檢測(cè)血清中睪酮和Gn RF(促性腺激素釋放因子)抗體的水平。分別在首免前1 d和屠宰前1 d,從頸靜脈采集血樣約10 mL,分離血清。上海Frontage實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)用ELISA測(cè)定血清中Gn RF抗體水平,以液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜色譜法(LC-MS/MS)檢測(cè)血清中睪酮的含量,檢出限量LOQ為0.10 ng/m L。

1.5.2 脂肪樣品 檢測(cè)糞臭素和雄酮含量。屠宰時(shí),分別采集所有試驗(yàn)豬的皮下脂肪20 g,標(biāo)記后冷凍保存。上海 Frontage實(shí)驗(yàn)室,雄酮濃度以 LCMS方法檢測(cè)(LOQ=0.20μg/g),用高效液相色譜熒光法檢測(cè)糞臭素含量(LOQ=0.0187μg/g)。糞臭素感觀閾值是0.200μg/g,雄酮為1.000μg/g。

1.6 睪丸寬度測(cè)量 在屠宰前采血時(shí),用游標(biāo)卡尺測(cè)量每頭豬兩個(gè)睪丸最寬處的寬度。

1.7 數(shù)據(jù)分析 首要效力變量是公豬異味參數(shù)(糞臭素、雄酮)和睪酮。次要效力變量是睪丸大小。所有的假設(shè)檢驗(yàn)按照0.05的顯著水平進(jìn)行檢驗(yàn)(雙側(cè)檢驗(yàn))。

2 結(jié)果與分析

2.1 脂肪樣品

2.1.1 雄酮 T 05與其他處理組相比,雄酮濃度的最小均方(least square meat,LSM)顯著高于其他處理組。T03免疫組中有1頭豬(T 3386)雄酮濃度為0.604μg/g,此濃度值仍然低于感觀異味閾值(1.000μg/g)。T 02,T 03和T04及 T 01,雄酮濃度均低于1.000μg/g的閾值(見表3)。

表3 脂肪樣本中雄酮的最小均方 (μg/g)

2.1.2 糞臭素 糞臭素最小均方值(表4),T 05的糞臭素濃度顯著高于其他各處理組。免疫組與T 01組相比,沒(méi)有顯著差異。

表4 脂肪樣本中糞臭素的最小均方 (μg/g)

2.2 血清樣品

2.2.1 睪酮 免疫前,T 01組顯著低于其他各處理組(表5)。屠宰時(shí),T 01和免疫各組睪酮濃度沒(méi)有顯著差異,重要的是疫苗免疫各組與 T 05組相比,睪酮水平顯著下降(表6)。

表5 首免前血清中睪酮最小均方值 (ng/m L)

2.2.2 Gn RF抗體 T 01或T 05與其他任何處理組比較,血清中Gn RF的抗體滴度在免疫前沒(méi)有顯著差異(表7)。但屠宰前,免疫動(dòng)物與非免疫動(dòng)物相比,各免疫組Gn RF的抗體滴度顯著高于T 01組和 T 05組(表8)。

表6 屠宰前血清中睪酮的最小均方值 (ng/m L)

2.3 睪丸寬度 屠宰前測(cè)量T 05和各免疫組豬的睪丸寬度(表 9)。免疫豬平均睪丸寬度減少約30%。在T 02、T 04組中各有1頭豬,T 03組中有2頭豬睪丸最寬處大于110 mm,T 05組73頭豬中有36頭大于110 mm。

表7 首免前GnRF抗體滴度的幾何平均數(shù)

表8 屠宰前GnRF抗體滴度的幾何平均數(shù)

注:T01 vs T02,T 03,T 04,P≤0.0001;T 05 vs T02,T03,T04,P≤0.0001

表9 屠宰時(shí)測(cè)量睪丸寬度 (mm)

3 結(jié)語(yǔ)

決定異普克效力的主要參數(shù)是公豬異味(糞臭素和雄酮)和睪酮。通過(guò)手術(shù)去勢(shì)組(T 01)與3個(gè)免疫組(T 02,T 03和T 04)中的任意一組比較,脂肪中雄酮和糞臭素以及血清中睪酮濃度均無(wú)顯著差異,3批異普克中任何一批均有效。因此,在國(guó)內(nèi)現(xiàn)行的養(yǎng)豬生產(chǎn)條件下,異普克能夠替代手術(shù)去勢(shì)達(dá)到有效控制公豬異味的目的。

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