李文書(shū) 曹寧寧 李曉英 文庭勇 袁桂陽(yáng) 龔大剛

(四川省南充蠶種場(chǎng),四川南充 637000)

現(xiàn)行家蠶品種資源保存的常規(guī)方法是春用種春季繼代,秋用種秋季繼代,若按現(xiàn)行飼育模式,秋用種就必須飼育兩代。而隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展,蠶桑生產(chǎn)的比較效益下降,蠶種的需求量減少,繁育量減少,母種、原原種每年飼育兩季必將浪費(fèi)生產(chǎn)原料。同時(shí)繼代次數(shù)的增加也增加了基因分離丟失、種性改變的機(jī)率,而種性維持作為家蠶良種繁育的基礎(chǔ)是選原種工作的重中之重。若采用秋制越年秋用種冷藏技術(shù)來(lái)拓寬母種、原原種的冷藏使用期限,就可實(shí)現(xiàn)在秋季一季繁育。這樣一方面能夠降低蠶種繁育過(guò)程中的財(cái)力、物力及人力投入;另一面能夠降低基因分離丟失、種性改變的機(jī)率,對(duì)于育種工作的省力化、提高基因保存率以及種性維持至關(guān)重要[1～2]。日本在早期對(duì)蠶種長(zhǎng)期冷藏做過(guò)大量試驗(yàn)研究,清水等報(bào)導(dǎo)了以蠶種保存2a以上為目的,在復(fù)式冷藏的中途,將處理時(shí)期和次數(shù)作種種組合后,得到極高的孵化率[3]。近年來(lái),國(guó)內(nèi)關(guān)于蠶種長(zhǎng)期冷藏方面的研究也越來(lái)越多,研究表明秋制越年秋用種是可行的,但試驗(yàn)大都圍繞一代雜交種或原種進(jìn)行,對(duì)純種的研究較少[4～6]。本試驗(yàn)以四個(gè)現(xiàn)行家蠶品種的原原種為研究對(duì)象,進(jìn)行了秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn),目的在于拓寬原原種的長(zhǎng)期冷藏期限,從而降低蠶種繁育成本并且有利于加強(qiáng)品種的種性維持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2009年秋制及 2010年春制原原種:限 1、限2、秋豐與 854B四個(gè)現(xiàn)行家蠶品種。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)

本試驗(yàn)于四川省南充蠶種場(chǎng)進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 秋制越年秋用長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn)種。秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏處理程序如表1所示,供試家蠶品種2009年秋制種產(chǎn)卵后按正常蠶種越年保護(hù),2009年 11月 27日蠶種入庫(kù),冷藏前期采用 5℃冷藏 45d,中期用 2.5℃冷藏 88d;4月 9日第一次中感,溫度 7℃,4月 13日入庫(kù);6月 13日第二次中感,溫度 10～11℃,6月 20日入庫(kù)。最后根據(jù)生產(chǎn)計(jì)劃進(jìn)行試驗(yàn)蠶種出庫(kù),采用常規(guī)方法催青。

表1 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏處理程序表

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1.3.2 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn)對(duì)照種。采用 2010年各原原種的春制秋用冷藏浸酸種作為對(duì)照。

1.4 飼育情況

每試驗(yàn)區(qū)收蟻 1g,按常規(guī)技術(shù)進(jìn)行飼養(yǎng),每處理區(qū)設(shè) 3個(gè)重復(fù)。采用常規(guī)方法調(diào)查各品種的孵化情況、5齡經(jīng)過(guò)、全齡經(jīng)過(guò)、蟲(chóng)蛹率及其死籠率等,熟蠶上蔟后第 8d調(diào)查全繭量、繭層量及繭層率等。

2 結(jié)果與分析

2.1 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn)各冷藏期的胚子發(fā)育情況

甲胚子與臨界期胚子是越年種長(zhǎng)期冷藏的關(guān)鍵時(shí)期,必須做到準(zhǔn)確無(wú)誤,把握時(shí)機(jī)及時(shí)入庫(kù)[7]。同時(shí)在上述范圍內(nèi),胚子愈幼小,對(duì)低溫的抵抗力愈強(qiáng),愈能耐長(zhǎng)期冷藏,因此冷藏過(guò)程中調(diào)查胚子發(fā)育程度顯得非常重要。不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn)各冷藏期胚子發(fā)育情況的調(diào)查結(jié)果如表2所示,試驗(yàn)結(jié)果表明限 2、秋豐解除滯育所需時(shí)間較限 1、854B所需時(shí)間要長(zhǎng),各品種良卵率較高,無(wú)明顯差異;經(jīng)第一次感溫處理,限 1發(fā)育較快,限 2、秋豐與 854B胚子發(fā)育基本一致;經(jīng)第二次感溫處理,各品種胚子均達(dá)到臨界期胚子階段,其中限 1、秋豐較限 2、854B發(fā)育稍快。從表中可以看出:通過(guò)低溫冷藏、中間感溫并及時(shí)調(diào)查胚子發(fā)育情況,本試驗(yàn)把握住了供試蠶種的甲胚子與臨界期胚子兩個(gè)重要的胚子階段。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明蠶種解除滯育難易及胚子發(fā)育快慢情況與品種有關(guān)。

表2 不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏試驗(yàn)各冷藏期的胚子發(fā)育情況

2.2 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)蠶種孵化的影響

不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)蠶種孵化的影響結(jié)果如表3所示,從表中可以看出:限 1、秋豐與 854B三個(gè)品種與對(duì)照相比實(shí)用孵化率、總孵化率以及死卵率均存在較明顯差異,表現(xiàn)為實(shí)用孵化率與總孵化率較對(duì)照降低,死卵率升高,其中限 1與對(duì)照相比差異最為明顯;限 2的實(shí)用孵化率、總孵化率以及死卵率與對(duì)照相比無(wú)明顯差異,表現(xiàn)為實(shí)用孵化率與總孵化率較對(duì)照稍高,死卵率稍低。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明不同品種間的孵化情況存在差異,其中長(zhǎng)期冷藏對(duì)限 1、秋豐與 854B三個(gè)品種的蠶種孵化影響較大,導(dǎo)致實(shí)用孵化率與總孵化率降低,死卵率升高。但對(duì)限 2而言,長(zhǎng)期冷藏對(duì)其孵化率無(wú)不良影響。

表3 不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)蠶種孵化的影響

2.3 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)家蠶齡期經(jīng)過(guò)和健康性成績(jī)的影響

不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)家蠶齡期經(jīng)過(guò)和健康性成績(jī)的影響結(jié)果如表4所示,從表中可以看出:經(jīng)長(zhǎng)期冷藏處理后,就齡期經(jīng)過(guò)而言,四個(gè)品種與對(duì)照相比均無(wú)明顯差異;就健康性成績(jī)而言,限 1與對(duì)照相比差異明顯,表現(xiàn)為蟲(chóng)蛹率降低,死籠率升高,其它三個(gè)品種與對(duì)照相比均無(wú)明顯差異。

以上試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明長(zhǎng)期冷藏對(duì)限 2、秋豐與854B三個(gè)品種的齡期經(jīng)過(guò)及健康性成績(jī)無(wú)不良影響,但對(duì)限 1而言,長(zhǎng)期冷藏雖然對(duì)其齡期經(jīng)過(guò)無(wú)影響,但導(dǎo)致其蟲(chóng)蛹率降低,死籠率升高。

表4 不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)家蠶齡期經(jīng)過(guò)和健康性成績(jī)的影響

2.4 秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)繭質(zhì)的影響

表5 不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)繭質(zhì)的影響

不同品種秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏對(duì)繭質(zhì)的影響結(jié)果如表5所示,從表中可以看出:經(jīng)長(zhǎng)期冷藏處理后,就全繭量而言,限 1的全繭量呈明顯降低,而限 2、秋豐與 854B三個(gè)品種與對(duì)照相比無(wú)明顯差異;就繭層量而言,經(jīng)長(zhǎng)期冷藏處理后,各品種與對(duì)照相比無(wú)明顯差異。其中限 1、854B繭層率呈略微降低,而限 2、秋豐較對(duì)照略微增加;就繭層率而言,經(jīng)秋制越年秋用種長(zhǎng)期冷藏處理后,各品種與對(duì)照相比無(wú)明顯差異,但限 2、秋豐與對(duì)照相比繭層率增加。

以上試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明經(jīng)長(zhǎng)期冷藏處理后,除限 1外,各品種的繭質(zhì)與對(duì)照相比均無(wú)明顯差異,同時(shí)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)限 2、秋豐的繭層量與繭層率較對(duì)照略微增加。

3 小結(jié)與討論

3.1 蠶種的耐冷藏力因品種不同而存在差異

試驗(yàn)結(jié)果表明不同品種間解除滯育的難易不同,胚子發(fā)育快慢亦有差異;不同品種的耐冷藏力不同。具體表現(xiàn)在各品種每次入庫(kù)起點(diǎn)胚子基本一致,但在蠶種孵化、齡期經(jīng)過(guò)與健康性成績(jī)及繭質(zhì)方面有所差異,其中限 2耐冷藏力最強(qiáng),表現(xiàn)在蠶種孵化、齡期經(jīng)過(guò)、健康性成績(jī)及繭質(zhì)與對(duì)照相比無(wú)明顯差異;秋豐與 854B次之,孵化率降低,死卵率升高,但差異不大;限 1耐冷藏能力最弱,表現(xiàn)在孵化率、健康性成績(jī)及繭質(zhì)與對(duì)照相比均明顯降低。

3.2 針對(duì)不同品種的耐冷藏力不同制定相應(yīng)的蠶種保護(hù)和冷藏技術(shù)方案

由于蠶種的耐冷藏力因品種不同而存在差異,而本試驗(yàn)中對(duì)不同供試蠶種采用相同的冷藏方法,導(dǎo)致長(zhǎng)期冷藏對(duì)耐冷藏力較差的品種產(chǎn)生一定的不良影響,如限 1的孵化率、健康性成績(jī)及繭質(zhì)與對(duì)照相比均明顯降低,秋豐與 854B的孵化率較對(duì)照也有一定降低。針對(duì)長(zhǎng)期冷藏產(chǎn)生的不良影響,可以針對(duì)不同品種制定相應(yīng)的蠶種保護(hù)和冷藏技術(shù)方案。一方面長(zhǎng)期冷藏技術(shù)是一種綜合配套技術(shù),如越年種的保護(hù)、浴種時(shí)間的遲早等都會(huì)對(duì)蠶種產(chǎn)生不同影響,應(yīng)針對(duì)不同品種對(duì)保種環(huán)節(jié)進(jìn)行探討,制定個(gè)性的保種方案,研究比如降溫速度稍慢,浴種前的目的溫度稍高,加深蠶種滯育等對(duì)蠶種的影響;另一方面應(yīng)針對(duì)不同品種的耐冷藏力對(duì)冷藏技術(shù)進(jìn)行完善,將長(zhǎng)期冷藏對(duì)蠶種的不良影響降低到最小。

3.3 長(zhǎng)期冷藏對(duì)于種性維持和蠶種生產(chǎn)具有積極的意義

試驗(yàn)結(jié)果表明長(zhǎng)期冷藏在技術(shù)上是可行的,只要技術(shù)方法得當(dāng),長(zhǎng)期冷藏一方面能夠減少繼代次數(shù)、降低繼代間的基因突變從而有利于加強(qiáng)種性維持;另一方面能夠優(yōu)化蠶種生產(chǎn)結(jié)構(gòu),作為蠶種供應(yīng)的應(yīng)急調(diào)控措施。盡管本試驗(yàn)中長(zhǎng)期冷藏技術(shù)尚未達(dá)到蠶種生產(chǎn)的要求,但通過(guò)對(duì)蠶種保護(hù)和冷藏環(huán)節(jié)的進(jìn)一步研究,針對(duì)不同品種制定個(gè)性化的蠶種保護(hù)和冷藏方案,將長(zhǎng)期冷藏對(duì)蠶種的不良影響降低到最小,使其能夠滿(mǎn)足蠶種生產(chǎn)的要求,這也是我們以后工作的目標(biāo),我們也充分認(rèn)識(shí)到還有很多試驗(yàn)需要進(jìn)一步探討。

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