張海明 曹 藍(lán)
(1廣州市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,廣東省 廣州市 510440; 2華南農(nóng)業(yè)大學(xué),廣東省 廣州市 510642)
豬繁殖與呼吸綜合征 (Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一種豬的病毒性傳染病,又稱 “豬藍(lán)耳病”。本病的病原為PRRSV,根據(jù)致病力的不同可分為經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (Classical PRRSV,C-PRRSV) 和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Highly pathogenic PRRSV,HP-PRRSV)兩種,分別引起經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征 (C-PRRS)和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征 (HP-PRRS),其中后者是前者的變異株,致病力等較前者均有很大的提高。C-PRRS的臨床表現(xiàn)主要以懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎等繁殖障礙疾病以及仔豬和生長(zhǎng)育肥豬出現(xiàn)呼吸道癥狀為特征[1];HPPRRS的臨床表現(xiàn)主要以無(wú)論大豬、小豬甚至種豬均可出現(xiàn)高熱、皮膚潮紅、呼吸困難甚至死亡,懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)等為特征[2],仔豬發(fā)生HP-PRRS發(fā)病率可達(dá)100%,死亡率達(dá)50%甚至100%,母豬流產(chǎn)率可超過30%,并可導(dǎo)致大豬、甚至公、母豬死亡,死亡率根據(jù)不同情況有所區(qū)別,剖檢變化以彌散性、出血性間質(zhì)肺炎、淋巴結(jié)和各內(nèi)臟器官不同程度出血為特征,其發(fā)病率高、病死率高,治愈率低。鑒于兩種豬藍(lán)耳病的致病性、致死率差異而所致危害不同,農(nóng)業(yè)部將C-PRRS列為二類動(dòng)物疫病,將HP-PRRS列為一類動(dòng)物疫病。
無(wú)論是C-PRRS所造成的母豬流產(chǎn)、小豬呼吸道疾病和免疫抑制情況,還是HP-PRRS所造成的高熱、高發(fā)病率和高死亡率等情況,都給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失,僅2006年下半年,HP-PRRS就造成全國(guó)10多個(gè)省市數(shù)百萬(wàn)只豬發(fā)病[2],豬藍(lán)耳病已成為影響我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的第一大病。最近幾年,C-PRRS依然繼續(xù)流行,HP-PRRS不斷在老疫區(qū)重新抬頭、在新地區(qū)流行,幾乎已波及到了我國(guó)所有養(yǎng)豬地區(qū)[3],而且已發(fā)現(xiàn)HP-PRRS與C-PRRS并存的情況。因此,筆者結(jié)合目前國(guó)內(nèi)豬繁殖與呼吸綜合征 (包括經(jīng)典和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征)的最新情況,闡述了豬繁殖與呼吸綜合征的流行現(xiàn)狀和研究概況,為大家更好的了解和防控豬繁殖與呼吸綜合征提供參考。
豬繁殖與呼吸綜合征于1987年在美國(guó)首度被報(bào)道,最初由于不清楚其病因所以將該病稱之為 “豬神秘病”(Mystery swine disease,MSD), 隨后該病在北美和歐洲的養(yǎng)豬國(guó)家迅速傳播和暴發(fā)流行。目前,除澳大利亞、瑞典等少數(shù)幾個(gè)國(guó)家外,PRRS幾乎遍布全球所有養(yǎng)豬的國(guó)家和地區(qū),給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[4]。該病在我國(guó)最早發(fā)生是在1991年的臺(tái)灣,大陸地區(qū)于20世紀(jì)90年代中期首先發(fā)現(xiàn)該病,隨后,在短短幾年時(shí)間內(nèi)廣泛流行于全國(guó)各地,成為我國(guó)母豬繁殖障礙和豬呼吸道疾病的主要疫病之一。2006年5月開始,以HP-PRRS為主的,其它多種病毒和細(xì)菌混合感染、繼發(fā)感染的所謂 “豬高熱病”在我國(guó)南方部分地區(qū)開始暴發(fā)流行,隨后造成了全國(guó)10多個(gè)省數(shù)百萬(wàn)豬只的發(fā)病死亡[2,5],給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失。
2006年5月,我國(guó)江西省首先暴發(fā)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征,主要表現(xiàn)為豬的高熱、皮膚潮紅、呼吸困難、高發(fā)病率、高死亡率及患病母豬流產(chǎn)。隨后,在很短時(shí)間內(nèi)蔓延到周邊省份,如湖南、湖北、江蘇、浙江等;同年8月份,該病又傳播到我國(guó)其他地區(qū),包括河南、山東、河北、廣東等;而到了2007年初,發(fā)生該病的地區(qū)又包括內(nèi)蒙古、東北三省、四川、寧夏、海南、云南等。該病首先在散養(yǎng)戶、中小規(guī)模豬場(chǎng)發(fā)生,隨后大規(guī)模豬場(chǎng)也陸續(xù)發(fā)生,導(dǎo)致了大批豬死亡或被淘汰,是2007年我國(guó)豬價(jià)高企的主要原因之一[6]。
2007和2008年,該病不僅在上一年已經(jīng)發(fā)生過的地區(qū)重新發(fā)生,還在一些于第一波或者第二波有幸躲過疫情的地區(qū)或豬場(chǎng)出現(xiàn)流行[3]。 韓慶安等[7]采用RT-PCR方法對(duì)2006~2009年采自河北省11個(gè)地市228個(gè)縣級(jí)屠宰場(chǎng)1565份商品豬的肺或肺門淋巴結(jié)樣品進(jìn)行了PRRSV病原學(xué)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)這4年高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒樣品陽(yáng)性檢出率分別為28.45%、40.74%、12.01%和7.31%,表明HP-PRRS不僅能導(dǎo)致高發(fā)病率和高死亡率,也可能存在一定程度的隱性感染。該研究未從同一頭豬的組織中同時(shí)檢測(cè)到HP-PRRSV和C-PRRSV。王連想等[8]對(duì)2007年華南地區(qū)152個(gè)規(guī)模場(chǎng)和102個(gè)個(gè)體養(yǎng)殖場(chǎng)/散養(yǎng)戶臨床健康豬群的2934份血清樣品進(jìn)行了HP-PRRSV檢測(cè),場(chǎng)(戶)陽(yáng)性率為7.09%,樣品陽(yáng)性率為1.67%,表明HP-PRRSV在華南地區(qū)各種類型的豬場(chǎng)均存在,而且散養(yǎng)戶中存在幾率要高于規(guī)?;i場(chǎng)。另外,重慶[9]、廣西[10]、貴州[11]、華東地區(qū)[12]等地也在近幾年檢測(cè)或分離到HP-PRRSV毒株。
由于2006年HP-PRRS的出現(xiàn),這幾年關(guān)于C-PRRS的調(diào)查研究相對(duì)較少,但是從已有的報(bào)道[7]中可以發(fā)現(xiàn),C-PRRS在我國(guó)各地依然存在,其造成的危害也許并沒有由于HP-PRRS的出現(xiàn)而減少,只是可能在某種程度上被掩蓋了。另外,有學(xué)者還發(fā)現(xiàn)了C-PRRSV與HP-PRRSV混合感染的現(xiàn)象[13]。
豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)是不分節(jié)段的、有囊膜的單股正鏈RNA病毒,屬于套式病毒目動(dòng)脈炎病毒科動(dòng)脈炎病毒屬。血清學(xué)試驗(yàn)及結(jié)構(gòu)基因序列分析表明,PRRSV可分為兩種基因型,即歐洲型 (基因1型,代表毒株為L(zhǎng)V株)和美洲型 (基因2型,代表毒株為VR-2332株)。前者主要流行于歐洲地區(qū),后者主要流行于美洲和亞太地區(qū)。在2010年以前,我國(guó)分離的PRRSV毒株均為美洲型,而我國(guó)學(xué)者在2011年發(fā)表的文章中報(bào)道了在國(guó)內(nèi)分離到一株歐洲型毒株,并認(rèn)為歐洲型和美洲型毒株在我國(guó)已經(jīng)并存多年[14]。
HP-PRRSV和C-PRRSV均屬于美洲型毒株,前者以基因組Nsp2編碼區(qū)不連續(xù)缺失30個(gè)氨基酸 (481位1個(gè)氨基酸和533~561位的連續(xù)29個(gè)氨基酸)與后者相區(qū)別,因此,該區(qū)域的氨基酸缺失一度被認(rèn)為可能與其致病力增強(qiáng)有關(guān),但是國(guó)內(nèi)專家運(yùn)用反向遺傳技術(shù)證明了這一特征與其高致病性或毒力并沒有多少直接關(guān)聯(lián)[15],其致病性增強(qiáng)或高毒力的分子機(jī)制仍有待于進(jìn)一步研究。
3.2.1 易感動(dòng)物
目前認(rèn)為豬繁殖與呼吸綜合征主要感染豬 (包括家豬和野豬),各種品種、不同年齡的豬均可感染,但以妊娠母豬和1月齡以內(nèi)的仔豬最易感。在家養(yǎng)豬與野豬共存的地方,野豬感染PRRSV的比例也非常高,但是目前的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明,自由生活的野豬很少感染PRRSV。另外,有研究表明,家豬和野豬的雜交品系也能感染HP-PRRSV[16]。
3.2.2 傳播途徑
PRRSV的傳播有直接傳播和間接傳播,直接傳播包括經(jīng)鼻腔、肌肉、口腔、子宮和陰道等途徑傳播,而生豬養(yǎng)殖管理過程中的行為如剪耳、斷尾、修牙、打烙印、注射藥物和生物制品等均可能造成PRRSV的傳播;間接傳播包括無(wú)生命物體(設(shè)備、器具、墊料等)或物質(zhì) (水、飼料等)、活載體(帶毒者)或者懸浮微粒的傳播,另外,初步的研究結(jié)果表明節(jié)肢動(dòng)物 (蒼蠅、蚊子等)可能對(duì)PRRSV的傳播具有一定的作用。
以前認(rèn)為空氣傳播是PRRS病毒傳播的主要方式之一,空氣傳播加上節(jié)肢動(dòng)物傳播能夠解釋在沒有其他感染源(豬、無(wú)生命的物體、人)存在的情況下PRRSV的遠(yuǎn)距離傳播。但是,多個(gè)研究則表明,除極短距離的氣溶膠傳播外,PRRSV經(jīng)空氣傳播的途徑難以證實(shí)。
3.2.3 易感季節(jié)
C-PRRS的發(fā)生沒有明顯的季節(jié)性,而HP-PRRS雖然一年四季均可發(fā)生,但是從目前的發(fā)生情況來(lái)看,夏季等天氣炎熱的季節(jié)更容易發(fā)生。另外,雖然天氣的驟變可能導(dǎo)致豬只抵抗力下降而發(fā)病,但目前沒有研究表明PRRS的發(fā)生與天氣變化存在直接的關(guān)系。
本病的臨床癥狀受病毒毒株、宿主的免疫狀態(tài)、并發(fā)感染、繼發(fā)感染、飼養(yǎng)管理因素、環(huán)境條件以及氣候因素等的影響差別較大。不僅C-PRRS與HPPRRS之間存在很大的差異,而且在毒株之間也存在較大差異。低毒力的毒株可引起豬群無(wú)臨床癥狀的流行,而強(qiáng)毒力毒株能夠引起嚴(yán)重的臨床癥狀,甚至引起死亡。
3.3.1 急性型
經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征:發(fā)病母豬主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減少或廢絕、發(fā)熱,出現(xiàn)不同程度的呼吸困難,妊娠后期母豬發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎、弱仔等。1月齡內(nèi)仔豬患病后表現(xiàn)呼吸道癥狀,部分嚴(yán)重患病豬只出現(xiàn)呼吸困難,少部分仔豬可見耳部、體表皮膚發(fā)紫。生長(zhǎng)豬和育肥豬僅表現(xiàn)出輕度的臨床癥狀。種公豬的發(fā)病率較低,除表現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、輕微的呼吸癥狀外,還可表現(xiàn)性欲減退、精液品質(zhì)下降等。
高致病性豬繁殖與呼吸綜合征:本病可以使所有年齡的豬發(fā)病,而且可以導(dǎo)致高發(fā)病率和高死亡率。發(fā)病率一般在50%~100%之間,死亡率在 20%~100%之間;哺乳仔豬死亡率一般在100%左右,保育豬在70%左右,生長(zhǎng)育肥豬則為20%左右;妊娠階段的母豬均可受到影響,40%以上的懷孕母豬發(fā)病可導(dǎo)致流產(chǎn),妊娠母豬死亡率一般在10%左右,有時(shí)可達(dá)20%~30%甚至更高。在大多數(shù)豬場(chǎng)中,首先是懷孕母豬或者生長(zhǎng)育肥豬發(fā)病,然后是哺乳仔豬。大部分發(fā)病豬臨床表現(xiàn)包括體溫升至41℃甚至更高、皮膚特別是耳朵潮紅、咳嗽、呼吸困難、便秘或腹瀉等,部分發(fā)病豬還可出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。發(fā)生PRRS后,一般情況下病程在1~3周左右。
3.3.2 慢性型
這是2006年以前PRRS在我國(guó)大多數(shù)規(guī)模化豬場(chǎng)的主要表現(xiàn)形式。主要表現(xiàn)為豬群的生產(chǎn)性能下降、生長(zhǎng)緩慢,母豬群繁殖性能下降,豬群免疫功能下降,易繼發(fā)感染其他細(xì)菌性和病毒性疾病,豬群呼吸道疾病發(fā)病率上升。
如果豬群中母豬出現(xiàn)繁殖障礙,同時(shí)其他豬只發(fā)生呼吸道癥狀即可懷疑為經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征感染,但是由于C-PRRSV毒株之間毒力的差異、疫苗的使用狀況、病毒的持續(xù)性感染等因素,特別是PRRSV引起的免疫抑制而導(dǎo)致的混合感染和繼發(fā)感染,導(dǎo)致僅憑臨床癥狀確診十分困難。而對(duì)于高致病性豬繁殖與呼吸綜合征,從發(fā)病迅速、發(fā)病豬呼吸困難、全身皮膚潮紅、高熱、高發(fā)病率和高死亡率可以做出初步的判斷,但是有學(xué)者指出HP-PPRS目前也可能存在隱性感染的問題,再加上混合感染和繼發(fā)感染,讓確診十分困難。因此,無(wú)論是C-PRRS還是HPPRRS,要對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確診斷均需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。
3.4.1 病原學(xué)檢測(cè)
對(duì)于PRRS的病原學(xué)檢測(cè),世界動(dòng)物衛(wèi)生組織 (OIE)沒有指定或者替代方法推薦。目前國(guó)內(nèi)用的最多的是病毒分離鑒定和RT-PCR方法,免疫組化分析 (IHC)也是非常好的一種方法,但是由于其操作較為繁瑣,因此較少使用。病原學(xué)檢測(cè)首選的材料是肺、扁桃體、脾、淋巴結(jié)、血清,死產(chǎn)和流產(chǎn)的胎兒脾、肺、血清和胸水也是適宜的檢驗(yàn)材料。
由于檢測(cè)的敏感性和特性以及檢測(cè)周期短等優(yōu)點(diǎn),目前最常用的PRRS病原學(xué)檢測(cè)方法為RT-PCR,包括普通RT-PCR和熒光RT-PCR方法。對(duì)于經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征病毒,主要針對(duì)ORF7進(jìn)行檢測(cè),因?yàn)樵搮^(qū)域是PRRSV最為穩(wěn)定的一個(gè)基因之一;而對(duì)于高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒,由于其在NSP2編碼區(qū)上存在29個(gè)連續(xù)的氨基酸缺失,針對(duì)這一基因特征,國(guó)內(nèi)很多實(shí)驗(yàn)室均建立了相應(yīng)的RT-PCR檢測(cè)方法,并且已經(jīng)有了商品化的檢測(cè)試劑盒。
3.4.2 血清學(xué)檢測(cè)
目前有4種不同的方法用于檢測(cè)血清中的PRRS抗體,分別為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)、間接免疫熒光抗體試驗(yàn) (IFA)、免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)(IPMA) 以及血清中和試驗(yàn) (SN)。 用急性感染期和恢復(fù)期的血清樣品進(jìn)行血清轉(zhuǎn)化 (陰性轉(zhuǎn)化為陽(yáng)性)實(shí)驗(yàn)是診斷PRRSV感染最為可靠的血清學(xué)方法,但是現(xiàn)在我國(guó)大多數(shù)豬場(chǎng)均進(jìn)行了PRRS的免疫,因此,這種方案在實(shí)際操作中意義不大。到目前為止,無(wú)論是哪種血清學(xué)檢測(cè)方法均無(wú)法區(qū)別經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征病毒和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒產(chǎn)生的抗體、野毒抗體和疫苗抗體。
商業(yè)化ELISA試劑盒 (HerdChek 2XRPRRSELISA,IDEXX實(shí)驗(yàn)室)是PRRSV抗體檢測(cè)的 “金標(biāo)準(zhǔn)”,該方法敏感、特異、標(biāo)準(zhǔn)并且快速[4]。 在IDEXX PRRS抗體檢測(cè)試劑盒的臨床使用中,有人發(fā)現(xiàn)一些規(guī)律,值得大家注意:在評(píng)估豬群某個(gè)疾病感染壓力的時(shí)候,群體抗體的均勻度也許更為重要。一般均勻度越好,整個(gè)群體的穩(wěn)定性相對(duì)要好;反之,均勻度越差,離散度越高,群體穩(wěn)定性越差。但是,均勻度好,抗體S/P值也很高,也不是好現(xiàn)象。試劑盒檢測(cè)得到的S/P值的高低也可能提示一些信息:當(dāng)S/P≥2.5時(shí)則表示豬群可能處于病毒血癥期;當(dāng)S/P≥3.5時(shí)表示豬群處于急性感染[17]。但這些信息更多的是源于實(shí)際操作過程中的經(jīng)驗(yàn),由于沒有理論基礎(chǔ),其科學(xué)性還有待進(jìn)一步檢驗(yàn)。
經(jīng)典豬繁殖與呼吸綜合征主要以持續(xù)性感染、亞臨床感染、免疫抑制和易繼發(fā)感染為流行特點(diǎn),而高致病性PRRS不僅有更為嚴(yán)重的免疫抑制、易繼發(fā)感染,更表現(xiàn)為高發(fā)病率和高死亡率,這給本病的防制帶來(lái)了更大的困難。對(duì)于本病的防控,筆者認(rèn)為應(yīng)該做好一下幾個(gè)方面。
無(wú)論是PRRS的陽(yáng)性或是陰性豬場(chǎng),均應(yīng)加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)管理,有條件的豬場(chǎng)盡量做到各階段豬群分開飼養(yǎng)和全進(jìn)全出。在南方地區(qū),特別要注意飼料的保管,防止由于霉菌毒素的影響而導(dǎo)致豬群免疫力下降。
所謂豬群的基礎(chǔ)免疫,即豬瘟、偽狂犬和口蹄疫的免疫工作。筆者認(rèn)為,在目前的情況下,豬瘟和偽狂犬疫苗的效果是十分理想的,如果豬場(chǎng)在豬瘟和偽狂犬的問題沒有解決的情況下去考慮控制PRRS甚至是高致病性PRRS,效果往往是不理想的。
從目前的實(shí)驗(yàn)室研究以及臨床使用情況來(lái)看,HP-PRRSV弱毒疫苗效果要好于其滅活苗[18],而且該疫苗能在很大程度上保護(hù)豬免受HP-PRRSV野毒的攻擊[19]。目前國(guó)內(nèi)商品化的PRRS疫苗有4種,涉及到6個(gè)毒株,再加上野毒,情況就更為復(fù)雜。因此,豬場(chǎng)在選用疫苗時(shí)盡量不要選擇兩種以上毒株的活疫苗,否則就會(huì)有重組的可能,導(dǎo)致豬場(chǎng)的發(fā)病情況更為復(fù)雜。國(guó)內(nèi)學(xué)者已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)條件下發(fā)現(xiàn)HP-PRRSV毒株和C-PRRSV毒株在豬體內(nèi)可以發(fā)生重組[20]。
在日常管理過程中,在妊娠母豬產(chǎn)前和產(chǎn)后階段、哺乳仔豬斷奶前后、轉(zhuǎn)群前后等階段在飼料中適量添加抗菌藥物,以預(yù)防豬群的細(xì)菌性疾病的發(fā)生。
此外還包括不輕易引種、進(jìn)豬,發(fā)生疫病后及時(shí)采取隔離、消毒、處理病死豬等措施。
豬繁殖與呼吸綜合征是一個(gè)國(guó)際性的豬病,而2006年高致病性豬繁殖與呼吸綜合征的出現(xiàn)更加劇了防控的難度。由于加強(qiáng)了相關(guān)疫苗的免疫、綜合防控等措施,目前像2006~2007年那樣的全國(guó)范圍內(nèi)大面積的HP-PRRS的流行狀況已經(jīng)過去,但是在我國(guó)的中小豬場(chǎng)特別是散養(yǎng)戶,該病還是沒有完全得到控制[6]。在HP-PRRS導(dǎo)致高發(fā)病率和高死亡率的情況下,高致病性毒株以及經(jīng)典毒株所能導(dǎo)致的免疫抑制、持續(xù)性感染等問題在一定程度被掩蓋或者忽視,而且毒株之間特別是高致病性毒株和經(jīng)典毒株之間、疫苗株與野毒株之間的重組變異的情況更需得到進(jìn)一步的重視。
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