劉 麗

安徽醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，安徽 合肥 230000

重樓是延齡草科重樓屬植物的干燥根莖［1］，藥用歷史悠久?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2010版收載的品種為百合科植物云南重樓 Parispolyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz.或七葉一枝花 Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根莖。重樓的化學(xué)成分多樣，含有甾醇、甾醇苷、黃酮苷、甾體皂苷類(lèi)成分等，其中甾體皂苷具有很強(qiáng)的生理活性和藥理活性?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，重樓活性成分具有抗腫瘤、消炎、抑菌、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、止血等作用，廣泛用于臨床治療癌癥、子宮出血、巨性支氣管炎和流行性腮腺炎。重樓經(jīng)加工制成的宮血寧膠囊具有涼血，收澀止血。用于崩漏止血，月經(jīng)過(guò)多，產(chǎn)后或流產(chǎn)后宮縮不良出血及子宮功能性出血屬血熱妄行證者。近年來(lái)，隨著化學(xué)成分和藥理研究的深入，發(fā)現(xiàn)重樓的藥用價(jià)值具有巨大的開(kāi)發(fā)潛力，越來(lái)越受到廣泛的重視。但重樓屬植物種類(lèi)繁多，其根莖均可入藥，影響重樓藥材內(nèi)在質(zhì)量的因素較多，市售重樓藥材質(zhì)量差異較大。對(duì)重樓的質(zhì)量檢測(cè)方法主要有:TLC法、RP－HPLC法、HPLC－ELSD法、HPLC指紋圖譜法等。因此，為更好地開(kāi)發(fā)利用這一豐富的自然資源，本文對(duì)重樓的化學(xué)成分和質(zhì)量控制研究情況進(jìn)行了歸納、綜述。

1 化學(xué)成分研究

重樓化學(xué)成分復(fù)雜，主要有甾體類(lèi)、黃酮類(lèi)成分，以及多糖、脂肪酸酯、氨基酸、微量元素、鞣質(zhì)等，主要有效成分是甾體皂苷，約占總化合物數(shù)目的80%。

1.1 甾體類(lèi)

重樓甾體類(lèi)又可分為甾體皂苷、植物蛻皮激素、植物甾醇幾類(lèi)。

1.1.1 甾體皂苷

目前研究表明甾體皂苷廣泛存在于重樓屬植物中，按苷元的不同主要有兩類(lèi)，一類(lèi)為薯蕷皂苷元 (diosgenin)的糖苷，另一類(lèi)為偏諾皂苷元 (pennogenin)的糖苷，主要以薯蕷皂苷元的多種糖苷為主［2］。連接的糖主要有 D－葡萄糖、L－鼠李糖和L－呋喃阿拉伯糖3種，苷元與糖多在3位連接成苷［3］。其中含有薯蕷皂苷元的有重樓皂苷 p1、重樓皂苷p2、重樓皂苷 p3、重樓皂苷 p4、七葉一枝花皂苷、薯蕷素和纖細(xì)薯蕷皂苷等［4］，［3］，［6］，含有偏諾皂苷元的有5個(gè)皂苷［7］。此外還含有蚤休皂苷A，B(pariphyllins A，B)、重樓甾酮 (paristerone)、孕甾雙烯醇酮苷與一些微量皂苷［7－9］。黃蕓等人還從華重樓中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的類(lèi)膽甾烷皂苷，這是在重樓屬植物中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有芳香環(huán)的類(lèi)膽甾烷皂苷［10］。

1.1.2 植物蛻皮激素

重樓屬植物中分離得到的植物蛻皮激素有β–ecdysterone和α–ecdysterone，此外，王強(qiáng)等人還從多葉重樓中分離到新的植物蛻皮激素paristerone。

1.1.3 植物甾醇

現(xiàn)有資料表明，重樓中植物甾醇主要為β–谷甾醇、豆甾醇及其衍生的苷類(lèi)［11］。

1.2 黃酮類(lèi)

重樓中黃酮類(lèi)化合物目前報(bào)道的主要有山柰酚–3－O–β－D－葡萄吡喃糖基 (1→6) －β－D－葡萄吡喃糖苷和7－O－α－L－鼠李吡喃糖基－山柰酚–3－O–β－D－葡萄吡喃糖基 (1→6)–β－D－葡萄吡喃糖苷［3］。

1.3 其它成分

多糖、脂肪酸酯、氨基酸、微量元素、鞣質(zhì)等。

2 質(zhì)量控制研究

隨著重樓藥效物質(zhì)基礎(chǔ)逐漸被闡明和新的藥理活性被發(fā)現(xiàn)，同時(shí)由于藥材資源短缺，價(jià)格飛漲，使其近來(lái)受到廣泛關(guān)注。但不同來(lái)源重樓藥材品質(zhì)差異較大，對(duì)其質(zhì)量控制研究主要有以下幾方面。

2.1 TLC法

取本品粉末0.5g，加乙醇10ml。加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取重樓對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法 (附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，吸取上述供試品和對(duì)照藥材溶液各5μl及〔含量測(cè)定〕項(xiàng)下對(duì)照品溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水 (15:5:1)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光和紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)［12］。

2.2 RP－HPLC法

采用色譜柱:Agilent SB C18柱 (4.6 mm ×150 mm，5μm);流動(dòng)相:乙腈－水，梯度洗脫，流速0.8mL/min;紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng):210nm。結(jié)果:4種重樓皂苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好 (r＞0.9998，n=5)，回收率98.12% ～104.3%，最低檢測(cè)限11.8～21.0 ng，最低定量限38.4～75.0 ng。該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)捷，可用于重樓中4種皂苷的定量分析［13］。

2.3 HPLC－ELSD法

應(yīng)用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，以乙腈2水為流動(dòng)相梯度洗脫，流速1mL/min，在反相C18(416mm×150mm，5um)柱上，測(cè)定重樓藥材中11個(gè)甾體皂苷的含量。結(jié)果在30min以?xún)?nèi)，成功地分離分析11個(gè)甾體皂苷。精密度、穩(wěn)定性RSD均小于3%，加樣回收率在95%～97%。此方法對(duì)這11個(gè)甾體皂苷的測(cè)定具有良好的精密度［14］。

2.4 HPLC指紋圖譜法

采用HPLC梯度洗脫的方法進(jìn)行色譜分離，使用“相似度評(píng)價(jià)軟件”進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，對(duì)不同產(chǎn)地的滇重樓藥材皂苷部位進(jìn)行指紋圖譜的研究。結(jié)果確立了滇重樓藥材皂苷部位指紋圖譜的高效液相分析條件，確定8個(gè)共有峰。不同產(chǎn)地的滇重樓藥材皂苷部位指紋圖譜有一定差異。采用HPLC法制定滇重樓藥材皂苷部位的指紋圖譜，其皂苷類(lèi)成分得到較好的分離，方法重現(xiàn)性好，可用于滇重樓的質(zhì)量評(píng)價(jià)［15］。

綜上所述，重樓化學(xué)成分復(fù)雜，質(zhì)量控制方法多樣，其中HPLC－ELSD法和HPLC指紋圖譜法是目前公認(rèn)的控制中藥質(zhì)量較為有效的方法。近年來(lái)，隨著重樓藥理作用研究的不斷深入，其臨床應(yīng)用范圍也日益廣泛。因此有必要進(jìn)一步加強(qiáng)化學(xué)成分和質(zhì)量控制的研究，以期為臨床提供質(zhì)量合格的藥品。

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