聶忠莉,王曉玲,李長生,唐雪楓,陳小寧

(1.成都大學生物產業(yè)學院,四川成都 610106;2.成都欣捷高新技術開發(fā)有限公司,四川成都 610041)

0 引 言

阿戈美拉汀(Agomelatine),化學名為N-[2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基]乙酰胺,是褪黑激素激動劑,兼有拮抗5HT2c受體作用,它是第一種褪黑激素類抗抑郁藥,能有效治療抑郁癥,改善睡眠參數和保持性等功能[1-2].阿戈美拉汀為白色或類白色結晶性粉末,幾乎不具吸濕性,它在甲醇中易溶,在乙醇、乙酸乙酯中溶解,在水中幾乎不溶,在熱水中極微溶解.我們在研制本藥過程中,無法從法定機構購買獲得阿戈美拉汀對照品(USP[3]和 EP[4]均未銷售阿戈美拉汀對照品),故本研究將阿戈美拉汀精制作為工作對照品,并用經典的非水電位滴定法對其標定,建立了阿戈美拉汀工作對照品含量測定的方法,利用本方法測定的含量結果與采用紫外檢測(HPLC-UV)、二極管陣列檢測(HPLC-DAD)及蒸發(fā)光檢測(HPLCELSD)方法測定的含量結果進行比對,結果一致.

1 儀器與方法

1.1 儀器與試藥

實驗所用儀器包括:PHS-3C型精密PH計(指示電極231-01型玻璃電極,參比電極為212-01型飽和甘汞電極,上海精密科學儀器有限公司);10 mL滴定管(精度為0.05 mL).Agilent 1100 G1311A泵G1314A檢測器;Waters996(DAD)Waters 600 Pump; Alltech elsd 2000 es;METT LER TOLEDO XS105電子天平(d=0.01 mg).

實驗所用試藥包括:阿戈美拉汀工作對照品(批號為100101、100201、100202、100203、100401、100402、100403,均由成都新恒創(chuàng)藥業(yè)有限公司提供);甲醇、乙腈為色譜純,氯仿、高氯酸、磷酸氫二鈉、磷酸、三氟醋酸為分析純,水為超純水.

1.2 試劑配制與標定

1.2.1 0.1 mol/L高氯酸滴定液配制[5].

取無水冰醋酸(按含水量計算,每1 g水加醋酐5.22 mL)750 mL,加入高氯酸(70%～72%)8.5 mL,搖勻,在室溫下緩緩滴加醋酐23 mL,邊加邊搖,加完后再振搖均勻,放冷,加無水冰醋酸適量至1 000 mL,搖勻,放置24 h,備用.

1.2.2 高氯酸滴定液標定[5].

取在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16 g,精密稱定,加無水冰醋酸20 mL溶解,加結晶指示液1滴,用“1.2.1”項下配制的高氯酸滴定液緩緩滴定至藍色,并將滴定的結果用空白試驗校正.每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當于20.42 mg的鄰苯二甲酸氫鉀.根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,計算出本液的濃度.

1.3 實驗方法

取阿戈美拉汀0.18 g,精密稱定,加氯仿30 mL溶解,再加入醋酐5 mL攪拌均勻,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定,電位指示,以高氯酸滴定液消耗體積V-電位指示E的一階導數(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結果用空白試驗校正[6].每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當于 24.33 mg的C15H17NO2.

2 結果與討論

2.1 滴定劑及溶劑體系選擇

阿戈美拉汀為酰胺類化合物,在溶液中呈極微弱的堿性,是疏水性很強的弱極性化合物.在冰醋酸、醋酐、冰醋酸—醋酐、冰醋酸—苯、冰醋酸—氯仿[7]作溶劑時用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定均未獲得明顯的電位突躍;在氯仿—醋酐溶劑中,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定時,當氯仿—醋酐(6∶1)做溶劑時獲得明顯的電位突躍.

2.2 滴定終點確定

采用指示劑和電位法聯合確定滴定終點,發(fā)現終點電位突躍時顏色變化(由藍色變?yōu)樗{綠色)不明顯,且不敏銳.因此,選擇電位法確定滴定終點.以高氯酸滴定液消耗體積 V-電位指示 E的一階導數(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結果用空白試驗校正.

2.3 精密度(回收率)試驗

精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號100101) 9份樣品,連續(xù)測定9次,測定結果的平均值為99.8%,相對標準偏差(RSD)為0.1%.試驗結果表明,采用本方法所得結果重現性好,精度高,符合含量測定的質量控制要求.精密度(回收率)試驗見表1.

表1 精密度(回收率)試驗結果

2.4 線性試驗

分別精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號, 100101)6份樣品,按“1.3”項下實驗方法進行測定.以各樣品稱樣量和相對應消耗的高氯酸滴定液做相關線性方程及線性回歸.實驗結果顯示,線性方程為:Y=0.0391x+0.0276,相關系數r為1.0000,線性關系良好.線性試驗結果見表2和圖1.

表2 線性試驗結果

圖1 含量測定線性曲線

2.5 樣品分析

分別對7批阿戈美拉汀工作對照品采用非水電位滴定法進行含量測定,測定結果如表3所示.

表3 非水電位滴定法含量測定結果

2.6 不同分析方法結果比較

本研究采用了非水電位滴定法與二極管陣列檢測(HPLC-DAD)、紫外檢測(HPLC-UC)及蒸發(fā)光檢測(HPLC-ELSD)相結合的方法來定量阿戈美拉汀工作對照品的含量,其含量測定結果一致.試驗結果見表4和表5.

表4 不同分析方法結果比較

表5 不同分析方法結果比較

3 結 論

本研究認為,采用非水電位滴定法可測定阿戈美拉汀工作對照品的含量,該方法簡便快速,準確性高,相對標準偏差(RSD)為0.1%,完全符合工作對照品含量測定的質量控制技術要求.

[1]景新.阿戈美拉汀對抑郁癥有振奮精神的優(yōu)點[J].國外藥訊,2006(5):20.

[2]劉英鑫.Servier公司新的抗抑郁劑[J].國外藥訊,2002 (11):16-17.

[3]美國藥典委員會.美國藥典(USP)[EB/OL].http://www. usp.org/U.S.Pharmacopeia/National Formulary.

[4]歐盟藥典委員會.歐洲藥典6.0[S].斯特拉斯堡:歐洲藥品質量管理局,2008.

[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業(yè)出版社,2010.

[6]中國藥品生物制品檢定所.中國藥品檢驗標準操作規(guī)范[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

[7]馬廣慈.藥物分析方法與應用[M].北京:科學出版社, 2000.