駱霞

(湖北醫(yī)藥學院附屬人民醫(yī)院 湖北十堰 442000)

延胡索為中醫(yī)臨床的常用藥物之一。具有活血化瘀、行氣止痛的功效,臨床上主要用于氣血阻滯諸癥的治療[1]。中藥材之間的配伍一直為中藥的精髓。合理的配伍,可以使兩種藥物“相須為用”,增加各自的臨床療效。但是如何有效的闡明中藥配伍后藥效增加的機理,一直以來都是中藥研究的一個研究熱點。本人通過延胡索與不同藥物配伍后總生物堿含量的測定,對中藥配伍機理和臨床意義進行了初步的研究?，F(xiàn)將研究結果匯報如下。

1 實驗材料與試劑

1.1 實驗材料

延胡索(Rhizoma Corydalis)、白芷(Radix Angelica Dahurica)、當歸(radix angelicaesinensis)均由長春中醫(yī)藥大學中藥鑒定學教研室主任姜大成教授提供并鑒定。氯仿(北京化工廠)、氨水(北京化工廠)、氫氧化鈉(北京化工廠)。

1.2 氫氧化鈉試液的標定

精密稱取氫氧化鈉0.2g置于小燒杯,加少量水溶解,冷卻至室溫后,轉移至250mL容量瓶中,加水定容至刻度。使用0.049mol/L的硫酸溶液進行標定。其結果為氫氧化鈉的濃度為0.019034mol/L。

1.3 硫酸溶液的標定

精密量取1mL的濃硫酸置于250mL的容量瓶中,加少量的水將硫酸稀釋,冷卻至室溫后,定容至刻度。使用0.02mol/L的氫氧化鈉進行標定。其結果為硫酸的濃度為0.01059mol/L。

2 實驗方法

2.1 總生物堿的提取方法

取待提取的中藥飲片,第1次加入10倍量的水、第2次加入8倍量的水,每次提取1h,合并提取液。使用濃氨水將提取液調節(jié)pH值至11～13。將堿化液置于分液漏斗中,加入氯仿進行萃取,每次使用氯仿40mL,連續(xù)萃取4次,合并氯仿層[2]。加入3g的無水硫酸鈉進行脫水。將氯仿液置于旋蒸儀中減壓回收氯仿至30mL左右,冷卻至室溫,將濃縮液置于50mL容量瓶中,加氯仿定容至刻度,即得。

2.2 總生物堿的測定方法

取總生物堿待測液5mL,精密加入20mL0.1mol/L的硫酸溶液,置于水浴鍋上揮干氯仿,加入甲基紅-溴甲酚綠指示劑2滴。使用0.02mol/L的氫氧化鈉進行滴定,直至溶液由紅色變?yōu)樗{綠色,且半分鐘內顏色不發(fā)生變化。

2.3 計算方法

以延胡索乙素作為總生物堿的含量指標,每1毫升0.01mol/L的硫酸相當于7.1084mg的延胡索乙素。計算公式為:總生物堿含量(mg/g)=[(V1-V2)×C×7.1084/0.01]/1。其中V1=20mL,V2為中和滴定的氫氧化鈉所需的硫酸體積,C=0.02mol/L。

3 實驗結果

延胡索中總生物堿的含量為1.80mg/g、延胡索與白芷中總生物堿含量為2.23mg/g、延胡索與當歸配伍后總生物堿含量為2.01mg/g。三者中延胡索與白芷配伍后總生物堿含量最高。詳細結果見表1。

表1 總生物堿含量匯總比較

4 討論

經(jīng)中藥臨床研究發(fā)現(xiàn),延胡索中的生物堿為其止痛的主要成分。目前對生物堿的含量測定方法有很多。如酸堿滴定法、波層掃描法、高效液相色譜法等等[3]。每種方法均有其獨到的優(yōu)點和不足。本人按照實驗操作簡便化的原則,選用酸堿滴定法進行總生物堿含量的測定,測定結果發(fā)現(xiàn)延胡索與白芷配伍后其總生物堿含量顯著增高,因此本人推測,延胡索之所以與白芷配伍后能增加其祛瘀止痛的功效可能是由于兩藥共煎時,白芷中的一些成分增加了延胡索在水煎液的溶解度,因而增加了延胡索中總生物堿的含量。由于酸堿滴定法為簡便的理化反應且僅以延胡索乙素作為總生物堿的含量指標,因而其專屬性和準確性并不是十分的理想。在后期的研究過程中,可以選擇準確性更高的高效液相色譜法并以多個生物堿成分作為含量指標進行更加準確的總生物堿含量的測定,從而提高實驗的專屬性和準確性。

總之,進行延胡索及不同藥物配伍中總生物堿的含量測定對其臨床配伍機理的闡述有著重要的臨床理論支撐意義,值得進行進一步的研究。

[1] 黃紅英,張建華,董鈺明.延胡索與不同藥物配伍中總生物堿含量的測定[J].四川中醫(yī),2007,25(12):45～47.

[2] 羅彥龍,李婷婷.延胡索與不同藥物配伍中總生物堿含量的測定[J].職教與成教,2011,3(1):203.

[3] 陳志桃,陳麗香,陳勝輝.高效液相色譜法測定元胡止痛片中延胡索乙素的含量[J].海峽藥學,2004,16(3):51～53.