寧宜寶，宋 立，張純萍，張秀英

(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081)

細(xì)菌耐藥性又稱抗藥性，一般是指細(xì)菌與藥物多次接觸后，對藥物的敏感性下降甚至消失，致使藥物對細(xì)菌的殺滅和抑制作用降低或無效。對動物來說，由于耐藥細(xì)菌的感染，一些原本對細(xì)菌性疾病治療有效的藥物，其治療效果就會降低甚至喪失。對人來說，動物源耐藥性細(xì)菌，特別是多重耐藥性細(xì)菌和超級耐藥細(xì)菌的出現(xiàn)和流行，對人類健康、食品衛(wèi)生和環(huán)境安全的影響也已經(jīng)成為世界各國面臨的一個非常嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生安全問題。

發(fā)達(dá)國家對細(xì)菌的耐藥性問題日益重視。除積極參加國際會議制定相關(guān)法案以外，還在發(fā)布實施減少細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的措施。如，歐盟各國已經(jīng)嚴(yán)格禁止抗生素用作飼料添加劑，反對動物群體用藥;歐盟、美國等發(fā)達(dá)國家已將藥物按其重要性進(jìn)行分類管理，將人用藥物與動物用藥嚴(yán)格分開并實行處方藥管理，不允許新藥首先在動物體內(nèi)使用。美國FDA要求新獸藥注冊時必須進(jìn)行耐藥性評價，并且對抗生素在食品動物的使用范圍作了嚴(yán)格的限制。自2005年起，美國已經(jīng)禁止將氟喹諾酮類藥物以飲水方式給家禽群體用藥。

1 加強動物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測的重要性

本課題組連續(xù)十多年對動物源細(xì)菌耐藥性的調(diào)查研究結(jié)果表明:我國動物源細(xì)菌耐藥性出現(xiàn)增強的趨勢，由于耐藥性細(xì)菌感染引起的動物疾病已經(jīng)影響了藥物的實際治療效果。加強動物源細(xì)菌的流行病學(xué)監(jiān)測，根據(jù)當(dāng)前的實際情況采取相應(yīng)對策，已經(jīng)成為我國當(dāng)前面臨的十分緊迫的工作。

1.1 細(xì)菌耐藥已成為當(dāng)前危害我國畜牧業(yè)發(fā)展和公共衛(wèi)生安全的一個棘手問題 隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，動物疾病變得越來越復(fù)雜，為了控制這些疾病，正確使用抗菌藥物已成為控制動物細(xì)菌性傳染病的一個主要手段。除了治療用藥以外，定期或不定期經(jīng)飼料、飲水途徑群體用藥已成為一些養(yǎng)殖場的常見做法。由于一些養(yǎng)殖人員存在對抗菌藥物控制動物疾病的片面盲從性，過分強調(diào)抗菌藥物對動物傳染病的預(yù)防治療作用，近些年來，盡管新的抗菌獸藥不斷涌現(xiàn)并在臨床廣泛使用，但畜禽細(xì)菌感染性疾病的發(fā)病率和病死率卻不見減輕。究其原因，可能與動物源細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生相關(guān)。由于養(yǎng)殖場對動物疾病的防控過分依賴藥物，加之養(yǎng)殖人員用藥不規(guī)范，導(dǎo)致動物源細(xì)菌的耐藥性不斷增強，藥物治療效果已不盡人意畜禽細(xì)菌的耐藥性問題已成為危及畜牧業(yè)發(fā)展、畜產(chǎn)品安全和人類健康的一個非常嚴(yán)重的問題。

1.2 耐藥細(xì)菌感染對公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅 抗菌藥物的發(fā)明和應(yīng)用是20世紀(jì)醫(yī)藥領(lǐng)域最偉大的成就。人類應(yīng)用抗生素有效地治愈了多類嚴(yán)重的細(xì)菌感染性疾病。20世紀(jì)中葉，已上市的抗生素原料藥已達(dá)500余種，其臨床常用品種亦高達(dá)數(shù)百種。人類在抗菌藥物開發(fā)應(yīng)用所獲巨大成就面前，認(rèn)為抗菌藥可以治療一切細(xì)菌性疾病，抗菌藥物的應(yīng)用出現(xiàn)隨機性。然而，由于長時間大量使用以至濫用抗菌藥物，導(dǎo)致大量耐藥性細(xì)菌的出現(xiàn)，一些原本對細(xì)菌感染性疾病治療有效的抗菌藥物已經(jīng)對細(xì)菌的感染變得無能為力了［1-2］。為此，WHO發(fā)出警告:“新生的、能抵抗所有藥物的超級細(xì)菌，將把人類帶回感染性疾病肆意橫行的年代”。

抗生素及合成抗菌藥物不僅在醫(yī)藥界被廣泛濫用，在農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)中，這類藥物的使用亦十分普遍。據(jù)美國統(tǒng)計，所生產(chǎn)的抗生素及合成抗菌藥物用于人類疾病治療和農(nóng)牧業(yè)各占50%。在農(nóng)牧業(yè)領(lǐng)域中主要用于獸醫(yī)治療用藥。其中，80%則為預(yù)防用藥和促使動物生長用藥，估測其濫用率高達(dá)40%～80%。我國抗生素及合成抗菌藥物在畜牧業(yè)中的使用十分普遍。為了防止由于濫用抗生素導(dǎo)致動物源細(xì)菌對人用抗生素產(chǎn)生耐藥，WHO/OIE/FAO等國際組織規(guī)定，禁止將用于人類疾病治療的藥物用于動物。為了避免動物中抗生素的濫用，特別是禁止一些人用重要抗菌藥物在動物上的使用，及時跟蹤監(jiān)測動物源細(xì)菌對這些藥物的耐藥狀況，有著十分重要的意義。

抗生素及合成抗菌藥物的濫用已經(jīng)發(fā)展成為一個影響全體民眾健康和用藥安全的社會問題。事實上，動物抗菌藥物的濫用，涉及藥品的研制、生產(chǎn)、流通和使用諸多環(huán)節(jié)，也涉及對文化、教育、商業(yè)、媒體宣傳以及農(nóng)牧業(yè)等行業(yè)的政策和管理。必須齊頭共管，才能從根本上遏制抗菌藥物濫用，逐漸減少以至消除耐藥性細(xì)菌的產(chǎn)生和流行。

2 我國動物源細(xì)菌的耐藥狀況

本課題組從2001年起就承擔(dān)了農(nóng)業(yè)部動物源大腸桿菌、沙門氏菌的耐藥性檢測計劃。國家在“十五”、“十一五”科技攻關(guān)和支撐計劃中，專門設(shè)置細(xì)菌耐藥性方面的課題，支持開展動物源細(xì)菌耐藥性檢測。目前，全國已有多家科研機構(gòu)和大專院校在進(jìn)行這方面的研究工作。10多年來，我所在開展動物源大腸桿菌、沙門氏菌、豬鏈球菌、葡萄球菌和彎曲菌等細(xì)菌耐藥性流行病學(xué)研究和耐藥性檢測方面做了大量較為系統(tǒng)的研究工作，并取得了明顯進(jìn)展［3-8］。

從2001年開始，經(jīng)對不同年代，不同地區(qū)和不同動物體內(nèi)分離的幾千株動物源大腸桿菌和沙門氏菌對24種抗生素進(jìn)行的耐藥性測定結(jié)果表明:大腸桿菌菌株對較早投入使用的藥物，如萘啶酸、氨芐西林、阿莫西林、鏈霉素、四環(huán)素、磺胺和復(fù)方新諾明高度耐藥，對喹諾酮類、氯霉素、慶大霉素和卡那霉素中度耐藥，而對在動物上用的時間不久的藥物，如氟苯尼考、阿米卡星，或尚未在動物身上使用的藥物，如奧格門丁(阿莫西林和克拉維酸)、頭孢曲松、頭孢噻吩等則耐藥率較低或無耐藥性。說明耐藥率與抗生素的使用時間和普遍性具有密切的關(guān)系。與此同時，我們對20世紀(jì)60-90年代分離的大腸桿菌、沙門氏菌歷史菌株的耐藥性進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，與1990年以前分離的動物源細(xì)菌相比，2000年以后分離菌株，其耐藥性發(fā)展很快并顯示出如下幾大特點:

2.1 不同年代的細(xì)菌分離株對抗菌藥物的耐藥性存在顯著差異 從耐藥種類上講，20世紀(jì)60-80年代分離的禽類大腸桿菌菌株僅對鏈霉素、四環(huán)素類耐藥;90年代的分離株除了對四環(huán)素類耐藥以外，對青霉素類、氨基糖甙類和磺胺類也產(chǎn)生了明顯的耐藥性;而到了2000年，從畜禽體內(nèi)分離的大腸桿菌除了對頭孢菌素類藥物敏感以外，對四環(huán)素類、青霉素類、氨基糖甙類、磺胺類和氟喹諾酮類藥物均產(chǎn)生了明顯耐藥性。隨著動物用藥種類的不斷增加，動物體內(nèi)分離細(xì)菌的耐藥譜也迅速擴大。不同年代的大腸桿菌分離株對24種檢測藥物的耐藥率存在明顯差異。

2.2 耐藥性的產(chǎn)生與藥物的使用直接相關(guān) 從細(xì)菌對24種抗生素的耐藥率比較看，20世紀(jì)80年代以前分離的歷史性大腸桿菌菌株，只是對當(dāng)時在獸醫(yī)上使用的一些藥物產(chǎn)生耐藥，對尚未使用的藥物均呈現(xiàn)高度敏感;90年代開始，隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，畜禽疾病逐漸增多。為了控制動物疾病，特別是呼吸道和腸道疾病，多種以前尚未在動物體內(nèi)使用的藥物用于疾病治療，隨之而來的是出現(xiàn)了對這些藥物的耐藥性。檢測結(jié)果表明，1990年以后分離的細(xì)菌除了對早期使用的抗菌藥物耐藥以外，大腸桿菌對新投入使用的氟喹諾酮類等藥物也開始出現(xiàn)耐藥，而且對藥物的耐藥種類和最小抑菌濃度(MIC)都明顯增加;2001年以后分離的細(xì)菌菌株，除了對早期使用的抗生素，如萘啶酸、氨芐西林、鏈霉素、四環(huán)素和磺胺有較高耐藥率以外，對氟喹諾酮類藥物的耐藥性也有所增加，然而對后期投入使用的新獸藥如氟苯尼考、阿米卡星表現(xiàn)為耐藥率較低，對目前還沒有使用的藥物，如頭孢曲松等幾乎沒有耐藥性。檢測結(jié)果說明抗生素的大量使用是導(dǎo)致目前耐藥率高的主要原因，并且耐藥率與該抗生素的使用時間長短存在著一定的正比關(guān)系。

2.3 不同種類的細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥性不同從2000年以后分離的大腸桿菌、沙門氏菌的耐藥性檢測結(jié)果可以看出:大腸桿菌菌株對萘啶酸、氨芐西林、阿莫西林、四環(huán)素、磺胺和復(fù)方新諾明高度耐藥，對氟喹諾酮類、氯霉素、慶大霉素和卡那霉素中度耐藥，而對氟苯尼考、奧格門丁(阿莫西林和克拉維酸)、頭孢曲松、頭孢噻吩、阿米卡星耐藥率較低，尤其是頭孢曲松和阿米卡星的耐藥率為0。而2001年分離的沙門氏菌耐藥率比大腸桿菌明顯低得多，除了對萘啶酸和四環(huán)素類存在一定的耐藥性以外，對其他抗生素均敏感。豬鏈球菌、葡萄球菌對抗生素的耐藥率也存在明顯差異。這可能與不同細(xì)菌的耐藥機制不同有關(guān)。

2.4 不同地區(qū)分離的細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥性不同 為了解不同地區(qū)動物源大腸桿菌、沙門氏菌、豬鏈球菌和葡萄球菌分離株對抗菌藥的耐藥性及地區(qū)間的差異，2002年以后，同時在多個省份同時采樣，并對分離細(xì)菌進(jìn)行耐藥性檢測，結(jié)果如下:

2002年在位于我國北方、中部和南方3個地區(qū)的廣東、山東和遼寧3個省份采樣，將同一時期不同地區(qū)分離的雞大腸桿菌進(jìn)行耐藥性檢測，結(jié)果表明:雖然三個地區(qū)分離的細(xì)菌均對四環(huán)素類、磺胺類、萘啶酸和二氟沙星呈現(xiàn)耐藥，但不同地區(qū)分離的大腸桿菌的耐藥濃度范圍存在明顯差異。

除此以外，江蘇、遼寧省和廣西分離的豬鏈球菌，廣西、遼寧兩地分離的金黃色葡萄球菌對青霉素類、四環(huán)素類、氯霉素類、磺胺類和氟喹諾酮類的耐藥率也顯示明顯的地域差異性。

以上情況反映出的問題是，由于我國南方地區(qū)夏天潮濕炎熱，冬天潮濕寒冷，雞群容易發(fā)生細(xì)菌性疾病，用藥相對來說要多一些，因而促使細(xì)菌產(chǎn)生的耐藥性也嚴(yán)重一些。相反，我國北方地區(qū)由于氣候干燥一些，細(xì)菌性疾病也相對少一些，用藥也少一些。以上地區(qū)間細(xì)菌耐藥性的差異也從另一個角度反映出細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生與用藥狀況是一致的。

2.5 不同動物體內(nèi)的細(xì)菌分離株對抗生素的耐藥性不同 通過對2002-2005年我國河南、北京等地豬場分離的大腸桿菌的耐藥率比較分析發(fā)現(xiàn)，豬大腸桿菌的耐藥性在藥物種類上明顯少于家禽體內(nèi)分離的大腸桿菌，同時對同種藥物的耐藥程度也均明顯低于雞體內(nèi)的大腸桿菌。

2.6 多重耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重 歷史菌株耐藥譜簡單，多重耐藥現(xiàn)象少見。目前分離的菌株耐藥譜很廣，多重耐藥、交叉耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。2001年以后分離的大腸桿菌對萘啶酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、諾氟沙星、培氟沙星、氯霉素、氟苯尼考、氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、阿米卡星、四環(huán)素、磺胺甲基異惡唑、復(fù)方新諾明、沙拉沙星、達(dá)氟沙星和阿莫西林等臨床常用抗菌藥物大多呈現(xiàn)出多重耐藥的特性。

考慮到喹諾酮類藥物在獸醫(yī)上的廣泛使用，本研究課題還專門對近10種喹諾酮類藥物作了比較全面的耐藥性檢測，包括第一代到第三代喹諾酮類藥物，人用、人畜共用到獸醫(yī)專用，具有一定的代表性。我國從20世紀(jì)80年代后期起，氟喹諾酮類藥物開始在獸醫(yī)上使用，90年代以后，氟喹諾酮類藥物已成為臨床上最常用的抗菌藥。喹諾酮類藥物的抗菌機理為通過抑制DNA促旋酶，阻斷DNA的復(fù)制而產(chǎn)生作用［9-10］。由于動物源細(xì)菌，特別是大腸桿菌易對喹諾酮類藥物產(chǎn)生耐藥，導(dǎo)致臨床上耐喹諾酮類藥物的細(xì)菌大量出現(xiàn)，明顯降低了藥物的療效，增加了公共衛(wèi)生安全的風(fēng)險。

從代次來看，第一代喹諾酮類以萘啶酸為代表，于20世紀(jì)60-70年代進(jìn)入臨床，應(yīng)用時間較長，耐藥率已蓄積至很高，人醫(yī)上因其不良反應(yīng)嚴(yán)重，多已棄而不用，在獸醫(yī)臨床上從其高耐藥率看，也不宜再使用。

第二代氟喹諾酮類藥物目前仍在廣泛應(yīng)用。所測試的6個沙星類藥品中，氧氟沙星和諾氟沙星耐藥率較低，其余(包括獸醫(yī)專用藥恩諾沙星)耐藥率均一致，從20世紀(jì)90年代開始，耐藥性逐漸蓄積，耐藥率快速增長。

人醫(yī)上第三代氟喹諾酮類藥物未用在獸醫(yī)上使用。獸醫(yī)臨床上使用的為獸用專用氟喹諾酮藥物，實驗室僅測試了其中3種獸醫(yī)專用第三代氟喹諾酮藥物，其耐藥情況和變化趨勢與第二代完全一致。

從耐藥性產(chǎn)生機理來看，出現(xiàn)這種情況是不可避免的，因為細(xì)菌對每代喹諾酮類的耐藥機理是一致的，對一種喹諾酮耐藥，就意味著對該代其他喹諾酮也同樣會產(chǎn)生耐藥，即使不使用該藥物由于耐藥機制相同，也同樣對該藥物具有耐藥性。

3 存在的問題

3.1 動物飼養(yǎng)水平低、疾病多是造成養(yǎng)殖者濫用藥物的主要原因 由于我國畜牧業(yè)發(fā)展迅速，特別是改革開放以來，畜牧業(yè)已成為億萬農(nóng)民致富奔小康的主要產(chǎn)業(yè)。然而，在我國的畜牧業(yè)快速發(fā)展的初期，大多以農(nóng)戶散養(yǎng)為主，即使是規(guī)?；曫B(yǎng)場，也多注重飼養(yǎng)數(shù)量。飼養(yǎng)數(shù)量的迅速增加，由此導(dǎo)致的動物疾病明顯增多了，但飼養(yǎng)管理水平?jīng)]有及時跟上，這種粗放式飼養(yǎng)模式，飼養(yǎng)環(huán)境差，管理水平低，動物疾病多，廣大養(yǎng)殖人員又缺乏對動物疾病的科學(xué)診斷、預(yù)防治療，動物疫病成了危害養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展一個最為主要的問題。為了控制這些動物疾病，養(yǎng)殖人員簡單依靠使用藥物來控制疾病，特別是在飼料中，添加藥物成了重要部分?？v觀我國動物源細(xì)菌耐藥性調(diào)查數(shù)據(jù)可以看出，在20世紀(jì)80年代以前，由于我國動物飼養(yǎng)量少，動物疾病相對少得多，動物用藥的種類和量少，特別是很少有通過飼料或飲水這種群體長期低劑量用藥的現(xiàn)象，所以細(xì)菌的耐藥性很低，耐藥種類也很少。而進(jìn)入90年代以后，我國畜牧業(yè)的規(guī)模顯著增加和動物疾病明顯增多，治療動物疾病所用藥物的種類和數(shù)量大大增加，導(dǎo)致動物源細(xì)菌的耐藥性明顯增加。由此可以看出，藥物不合理使用是導(dǎo)致細(xì)菌迅速產(chǎn)生耐藥的一個主要原因。

3.2 抗菌藥物的濫用是造成細(xì)菌耐藥的一個主要原因 我國動物源細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的一個重要原因是由于缺乏對動物用藥的嚴(yán)格管理和科學(xué)指導(dǎo)加之養(yǎng)殖場不規(guī)范用藥造成的。調(diào)查表明，在我國南方地區(qū)，養(yǎng)一只蛋雞一年下來藥費開支達(dá)到1.5元以上。在客觀講，藥物在動物疾病控制中發(fā)揮了極其重要的作用，沒有獸藥的發(fā)展，就沒有我國畜牧業(yè)的繁榮，這一點是不可否認(rèn)的。另一個問題是缺乏經(jīng)常性的耐藥性風(fēng)險評估，一種藥可以用好多年。這種盲目用藥的現(xiàn)象一方面是加重了細(xì)菌的耐藥性，另一方面是降低了藥物的臨床治療效果。我國尚缺乏通過對藥物敏感性測定來指導(dǎo)臨床動物用藥的習(xí)慣。

4 應(yīng)對措施

細(xì)菌耐藥性目前越來越引起國際社會的高度重視和廣泛關(guān)注，我國是獸藥生產(chǎn)大國和使用大國，為了減少和克服細(xì)菌產(chǎn)生耐藥對公共衛(wèi)生、動物健康和食品安全帶來的嚴(yán)重危害，首先是加強宣傳，提高認(rèn)識;第二是強化監(jiān)管，規(guī)范用藥;第三是開展監(jiān)測，及時、全面掌握我國食源動物細(xì)菌耐藥狀況;第四是加強國內(nèi)外合作交流，提高防控水平;第五是加大投入，開展相關(guān)研究。

4.1 加強動物用藥的科學(xué)管理，規(guī)范用藥 WHO/OIE/FAO多年來一直強調(diào)加強動物用藥的科學(xué)管理，嚴(yán)格處方用藥，嚴(yán)格將人用藥和動物用藥分開，并逐漸減少動物用藥。根據(jù)我國目前動物源細(xì)菌嚴(yán)重耐藥的情況，作為一個負(fù)責(zé)任的獸藥生產(chǎn)和使用大國，要減少以至消除目前我國動物源細(xì)菌嚴(yán)重耐藥的局面，首先就是我國政府主管部門要加強動物藥品在審批、生產(chǎn)和使用上的監(jiān)督管理，把處方與非處方用藥分開，把人用藥和動物用藥分開，嚴(yán)格加強飼料藥物添加劑的管理;養(yǎng)殖人員嚴(yán)格科學(xué)用藥，規(guī)范用藥，有針對性的用藥，不濫用藥。這對保證食品安全、公共衛(wèi)生安全和動物健康十分重要。

4.2 加強動物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測 由于動物源細(xì)菌的耐藥與食品安全、公共衛(wèi)生安全和動物疾病治療效果有著非常密切的關(guān)系，加強動物源細(xì)菌耐藥性檢測和監(jiān)測對減少細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生和蔓延十分重要，我國在這方面工作起步較晚，因此，在耐藥性監(jiān)測隊伍建設(shè)方面，除了國家獸藥耐藥性檢測實驗室的檢測工作以外，獸藥審批部門在審批新獸藥注冊和臨床使用時，要按照WHO/FAO/OIE的指南，參考發(fā)達(dá)國家的做法，針對我國實際情況，對新批準(zhǔn)使用的各種藥物進(jìn)行包括耐藥性在內(nèi)的系統(tǒng)安全評價，有條件的養(yǎng)殖企業(yè)要根據(jù)細(xì)菌耐藥性檢測結(jié)果決定用藥種類和劑量，特別是新投放市場的藥物，要作跟蹤監(jiān)測，及時了解細(xì)菌對藥物的耐藥性產(chǎn)生情況。對一些影響公共衛(wèi)生安全的藥物，更要加強監(jiān)測，防止由于此類的使用導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥而影響人類的公共衛(wèi)生安全。

4.3 加強新獸藥研究，特別是動物專用新獸藥的研究 近些年來，由于耐藥性細(xì)菌特別是超級細(xì)菌的出現(xiàn)，動物的藥物治療的有效性受到越來越大的挑戰(zhàn)，高效安全新獸藥，特別是動物專用新獸藥的研制已成為越來越急迫的問題?；瘜W(xué)合成藥仍是當(dāng)前的主導(dǎo)藥物，研究出高效、低毒、不易產(chǎn)生耐藥和交叉耐藥的新獸藥是當(dāng)前十分迫切的任務(wù);另外，作為植物類藥物的生產(chǎn)和使用大國，中獸藥以其殘留低，不易產(chǎn)生耐藥性，易獲得等優(yōu)點，在我國有著良好的開發(fā)和應(yīng)用前景，應(yīng)該加大力量研究和開發(fā)。

4.4 加強細(xì)菌耐藥機理的研究，趨利避害 盡管導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的原因很多，但總的來說是由細(xì)菌和抗菌藥物兩大因素決定的。如何減少細(xì)菌耐藥，提高藥物療效是我們研究細(xì)菌耐藥機理的主要目的。通過揭示細(xì)菌耐藥機理，可以指導(dǎo)我們在新藥的研究上趨利除弊，研究出對細(xì)菌性疾病更為有效的藥物。

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