甘 夢(mèng),吳 鵬,王 婭,2,張 樂,左之才,2
(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,四川 雅安 625014;2.動(dòng)物疫病與人類健康、環(huán)境公害與動(dòng)物疾病四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 雅安 625014)
羊傳染性胸膜肺炎又稱羊支原體性肺炎,是由多種支原體所引起,以高熱、咳嗽、胸膜漿液性和纖維素性炎癥為臨床特征的高度接觸性傳染病,俗稱“爛肺病”。常年均可發(fā)生,但多以冬春季節(jié)為主,常呈地方性暴發(fā)流行,且流行時(shí)間較長(zhǎng),死亡率高。羊腸毒血癥是由D型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的一種急性毒血性疾病,因該病死亡的羊腎組織易于軟化,又稱“軟腎病”。該病呈散發(fā)性流行,發(fā)病率低,死亡率高。2011年3月,四川某羊場(chǎng)發(fā)生以體溫升高,大葉性肺炎,真胃、小腸嚴(yán)重出血和急性死亡為主癥的疾??;經(jīng)尸體剖檢、病原的分離鑒定及治療確診為支原體和D型產(chǎn)氣莢膜梭菌混合感染引起的羊傳染性胸膜肺炎和羊腸毒血癥并發(fā)病。報(bào)告如下。
四川某羊場(chǎng)進(jìn)口的肉絨兼用新品種羊,6日上午突然發(fā)病,病羊表現(xiàn)為精神高度沉郁,臥地,食欲廢絕,體溫升高達(dá)41℃,呼吸急促,咳嗽,胸部觸診壓痛,心跳頻率達(dá)120次/min,可視黏膜潮紅,次日上午,發(fā)病羊死亡。病死羊腹部高度臌脹,頭頸伸直,口鼻中流出紅色泡沫樣鼻液。次日下午又死亡1只,病情呈蔓延趨勢(shì),1~1.5周歲羊病情嚴(yán)重,體溫升至39.5℃~40℃,個(gè)別羊達(dá)到40.6℃。羊場(chǎng)立即對(duì)健康羊緊急接種三防四聯(lián)苗;并將病死羊送往我實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行剖檢。
病死羊頭頸后仰,口鼻流紅色細(xì)小泡沫;皮下出血。腹部臌脹,打開腹腔,有腐敗臭味,腹腔有積液;肝、脾出血腫大,肝臟質(zhì)脆,表面有蠶豆大小淺黃色壞死灶;膽囊充盈,膽汁濃稠有黑色顆粒狀物;真胃及小腸出血嚴(yán)重,整個(gè)空腸、回腸出血,小腸淋巴結(jié)出血、呈大理石樣;腎臟質(zhì)地變軟,似腦髓狀。胸腔積液;肺臟出血嚴(yán)重、實(shí)變,切面呈大理石樣,質(zhì)地堅(jiān)硬,缺乏彈性;心包有纖維性滲出液,心臟體積增大,血液凝固不良;氣管內(nèi)有大量紅色細(xì)小泡沫樣液;下頜淋巴結(jié)出血、腫脹,沿氣管周圍頸肌出血嚴(yán)重。
3.1 涂片鏡檢 采取肺、肝、腎等病變組織觸片、染色鏡檢見革蘭陽(yáng)性、兩端鈍圓的粗大桿菌,排列整齊,呈單個(gè)散在或雙鏈排列,菌體中央有大而卵圓的芽孢,記錄為細(xì)菌A;呈球狀、桿狀的多型性、瑞氏染色呈淡紫色的微小細(xì)菌,記錄為細(xì)菌B。
3.2 分離培養(yǎng) 病料接種于綿羊血瓊脂和加10%血清的BHI瓊脂,37℃厭氧培養(yǎng)24h后,血平板上長(zhǎng)出直徑3mm左右、半透明、表面光滑、隆起、呈β溶血的菌落;BHI瓊脂上長(zhǎng)出灰白色、半透明、圓形、光滑隆起的菌落。染色鏡檢,可見細(xì)菌形態(tài)大小同細(xì)菌A基本一致。72h后,在BHI瓊脂上長(zhǎng)出濕潤(rùn)、透明,中心深入培養(yǎng)基中的微小菌落,用接種環(huán)不易刮下。染色鏡檢,可見細(xì)菌形態(tài)大小同細(xì)菌B基本一致。
3.3 生化試驗(yàn) 細(xì)菌A能使牛乳培養(yǎng)試管發(fā)酵,產(chǎn)酸產(chǎn)氣;發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,消化酪蛋白,水解明膠,而酯酶、卵磷脂酶、吲哚試驗(yàn)為陰性。細(xì)菌B能分解葡萄糖和甘露醇,能液化明膠和消化酪蛋白,而水解精氨酸、分解尿素,磷酸酯酶試驗(yàn)為陰性。根據(jù)細(xì)菌形態(tài)、培養(yǎng)特性及生化特性,鑒定A菌為產(chǎn)氣莢膜梭菌,B菌為支原體。
3.4 藥物敏感試驗(yàn) 選用10種常用抗生素紙片進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn),結(jié)果判定參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)推薦紙片擴(kuò)散標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明,兩種病原菌的藥物敏感程度相近,都對(duì)四環(huán)素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氟苯尼考和強(qiáng)力霉素敏感;對(duì)紅霉素、先鋒V比較敏感;對(duì)苯唑青霉素耐藥。
3.5 動(dòng)物試驗(yàn) 取12只小鼠,分為4組,每組3只。取病死羊回腸內(nèi)容物,經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份,一份不加熱處理,一份60℃30min處理,分別腹腔注射第1、2兩組小鼠(0.3mL/只);再用支原體增菌肉湯注射第3組小鼠(0.3mL/只);對(duì)照組注射同等劑量的生理鹽水。結(jié)果顯示,加熱處理組和對(duì)照組小鼠未見異常,第1組和第3組小鼠均在24h內(nèi)死亡。將死亡小白鼠肝臟組織進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),觸片鏡檢,分別檢測(cè)到產(chǎn)氣莢膜梭菌和支原體。
根據(jù)病畜臨床癥狀、病理剖檢特點(diǎn)、病原菌的分離與鑒定,診斷該病為產(chǎn)氣莢膜梭菌和支原體混合感染所致,為羊傳染性胸膜肺炎和羊腸毒血癥并發(fā)病。
選用敏感藥物阿米卡星、環(huán)丙沙星治療。病情輕,有一定精神、食欲,體溫低于39.5℃的病羊,采用阿米卡星(6mg/kg體重),酚磺乙胺注射液(2 mL/頭),肌肉注射,1日2次,3日1療程。病情較重,精神、食欲較差,體溫高于39.5℃的病羊,除采取上述藥物治療外,另采用補(bǔ)液療法(按40kg體重羊計(jì)算):5%葡萄糖生理鹽水200~300mL、維生素C 1.5~2g、維生素B61.5~2g、肌苷1.5~2g、10%葡萄糖酸鈣20mL;0.5%鹽酸環(huán)丙沙星注射液100mL;分別靜脈滴注,每日1次,連用3日為1療程。治療1療程后,病情輕者痊愈;病情重者明顯好轉(zhuǎn),精神、食欲基本恢復(fù)正常,繼續(xù)采用阿米卡星和酚磺乙胺治療1療程痊愈。
6.1 羊傳染性胸膜肺炎和羊腸毒血癥并發(fā)病在臨床上以急性死亡為特征,較難及時(shí)確診 因其早期臨床表現(xiàn)以呼吸系統(tǒng)癥狀為主,除食欲外無明顯消化道癥狀,動(dòng)物死亡后剖檢方可發(fā)現(xiàn)真胃、小腸嚴(yán)重出血,因此,臨床診斷時(shí)易被漏腸毒血癥。支原體和D型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的疾病都能造成羊急性死亡,混合感染導(dǎo)致死亡則更快,所以臨床癥狀表現(xiàn)不充分。支原體引起的羊傳染性胸膜肺炎病理剖解特征為胸腔積液、肺部實(shí)變、氣管出血、管腔多量細(xì)小泡沫樣液;產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的羊腸毒血癥剖檢以真胃、小腸嚴(yán)重出血、腎臟軟化等為特征。
6.2 初春為羊傳染性胸膜肺炎和羊腸毒血癥的高發(fā)季節(jié) 羊傳染性胸膜肺炎的病原主要通過空氣、泡沫經(jīng)呼吸道傳染,多發(fā)于初春和冬季[1]。陰雨連綿,冷熱交替,羊群密集、擁擠等因素,能使羊只抵抗力降低,較易發(fā)病。羊腸毒血癥的病原菌產(chǎn)氣莢膜梭菌為條件致病菌,在自然界分布廣泛,土壤、污水、糞便以及人畜的胃腸道內(nèi)等都有分布,主要通過消化道傳染,發(fā)于初春、秋末[2]。該羊場(chǎng)發(fā)病時(shí)期正值初春,為兩種疾病的高發(fā)季節(jié),驟變的天氣使動(dòng)物機(jī)體抵抗力降低,病原更易乘虛而入,引發(fā)本病。
6.3 羊傳染性胸膜肺炎和腸毒血癥早期,及時(shí)使用敏感抗生素治療,療效確實(shí) 本病例中,及時(shí)使用敏感藥物(阿米卡星、環(huán)丙沙星等)進(jìn)行治療,及時(shí)控制了病情,避免因用藥不當(dāng)而延誤治療時(shí)機(jī)。病重者結(jié)合輸液療法,用葡萄糖、維生素、肌苷補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng),鈣制劑制止肺炎滲出有效緩解呼吸困難,取得了良好療效。
6.4 定期接種疫苗、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理及環(huán)境消毒是預(yù)防該病發(fā)生的重要手段 傳染性胸膜肺炎可注射山羊傳染性胸膜肺炎氫氧化鋁菌苗,腸毒血癥可注射三聯(lián)四防苗(防羊快疫、猝狙、腸毒血癥和羔羊痢疾)預(yù)防。平時(shí)應(yīng)對(duì)周圍環(huán)境加強(qiáng)消毒,可用5% 克遼林、10% 漂白粉或1%~2%火堿;注意圈舍保溫、通風(fēng)、干燥;隔離病羊,對(duì)病死羊只深埋或焚燒處理,防止病原擴(kuò)散;加強(qiáng)羊只運(yùn)動(dòng),增強(qiáng)機(jī)體抵抗力等。
[1]武庭斌,馬建榮,喬紅梅.羊傳染性胸膜肺炎的流行及防治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2008(7):29.
[2]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001:318-321.