謝建興 羅旭華 郭秋紅 羅曉鴻

江西省新余市人民醫(yī)院血液科，江西新余 338000

CD117表達(dá)于早期的造血干/祖細(xì)胞，是一種c-kit原癌基因編碼的跨膜酪氨酸激酶受體。它在許多組織、包括造血干細(xì)胞均有表達(dá)。在正常骨髓中，約2%～4%的單核細(xì)胞表達(dá)CD117。約25%的正常CD34+細(xì)胞在骨髓中的共表達(dá)CD117。Muroi K等[1]報(bào)道，在急性髓細(xì)胞性白血病（AML）患者中CD117的表達(dá)超過(guò)50%，但很少在急性淋巴性白血病（ALL）中表達(dá)。本研究采用FCM研究CD117在ALL和AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)，進(jìn)一步探討了CD117表達(dá)的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年1月～2012年3月筆者所在科室初次就診的急性白血病（AL）患者81例，所有病例均按《血液病診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)》[2]確診。其中男49例，女32例；年齡 14～78歲，中位年齡43歲。ALL組30例，男20例，女10例，年齡14～69歲，中位年齡33歲；AML組51例，男28例，女23例，年齡15～78歲，中位年齡46歲。在ALL組中，T-ALL 4例，B-ALL 26例；在AML組中M0型1例，M1型2例，M2型18例，M3型6例，M4型 6例，M5型 11例，M6型 2例，M7型 1例，未分類4例。20例正常對(duì)照組骨髓標(biāo)本均采自健康成人體檢者。

1.2 免疫表型分析

對(duì)初次就診的患者，抽取骨髓3 mL，肝素抗凝，分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，按常規(guī)三色直接免疫熒光法標(biāo)記骨髓單個(gè)核細(xì)胞，各管均標(biāo)記CD45-Percp（Becton Dickinson），同時(shí)配以FITC、PE 或 PE-Cy5標(biāo) 記 的 CD2、CD4、CD34、CD5、CD38、CD56、CD8、CD64、CD13、CD14、CD33、CD71、CD11b、CD117、MPO、cCD79a、cCD3、TdT和CD123等，分析時(shí)以相應(yīng)的標(biāo)記熒光素作為同型對(duì)照。所有單抗均購(gòu)自美國(guó) Becton Dickinson 公司。采用流式細(xì)胞儀（BDFA salibur型，美國(guó) Becton Dickinson 公司）分析。在 CD45/SSC 散點(diǎn)圖上，至少分析10 000個(gè)細(xì)胞。CD117以陽(yáng)性細(xì)胞水平≥10%為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)[2]，其余抗原均以抗原陽(yáng)性細(xì)胞≥20%為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料多個(gè)樣本率的比較應(yīng)用行×列表x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中樣本率的兩兩比較，采用Bonferroni法，修正檢驗(yàn)水準(zhǔn)值α=0.016 7，以P＜0.016 7為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CD117在對(duì)照組、ALL組及AML組陽(yáng)性表達(dá)率分別依次為 0（0/20）、3.333 3%（1/30）和 84.313 7%（43/51），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=69.633 3，P=0.000 0＜ 0.05）。

對(duì)照組、ALL組及AML組間陽(yáng)性表達(dá)率兩兩比較，正常對(duì)照組中無(wú)CD117表達(dá)，ALL組中CD117陽(yáng)性表達(dá)率為3.333 3% （1/30），與對(duì)照組0（0/20）比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.0167）。AML中CD117陽(yáng)性表達(dá)率為84.313 7%（43/51），與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.016 7），與ALL組比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.016 7）。表明CD117在AML患者中的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常對(duì)照組和ALL患者。見表1。

表1 CD117在對(duì)照組、ALL組和AML組中的兩兩比較結(jié)果

3 討論

急性白血病是血液系統(tǒng)惡性腫瘤，對(duì)其進(jìn)行診斷分型是選擇化療方案的前提。目前國(guó)際上采用的是細(xì)胞形態(tài)學(xué)（Morphology）、免疫學(xué)（Immunology）、細(xì)胞遺傳學(xué)（Cytogenetics）和分子遺傳學(xué)（Molecular）分型，即MICM分型。MICM分型對(duì)于指導(dǎo)急性白血病的臨床治療和預(yù)后判斷具有極其實(shí)用的價(jià)值。白血病細(xì)胞免疫學(xué)分型在MICM分型診斷方法中占有重要地位，在ALL和AML的鑒別診斷中具有非常重要的作用。Nomdedeu 等[3]報(bào)道，盡管CD13、CD33已是目前醫(yī)學(xué)界廣為認(rèn)可并且廣泛應(yīng)用于臨床診療中的髓系免疫學(xué)抗原標(biāo)記，雖然這二者的檢測(cè)敏感性高于CD117，但特異性不如CD117。因而CD117可作為排除ALL及輔助診斷AML的標(biāo)志。在本研究中，有84.313 7%（43/51）急性髓系白血病患者表達(dá)CD117，與Nomdedeu等[3]報(bào)道的采用流式細(xì)胞儀分析CD117陽(yáng)性表達(dá)率在60%～87%的范圍相一致。筆者還發(fā)現(xiàn)在ALL患者中CD117的表達(dá)極少，為3.333 3% （1/30）。沈紅強(qiáng)等[4]研究表明，CD117主要在AML中表達(dá)，且CD117在ALL患者中也可存在一部分交叉表達(dá)。本研究亦顯示，CD117在ALL和AML均有表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率分別依次為3.333 3% （1/30）、 84.313 7%（43/51），并且兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000 0＜0.016 7）。Nomdedeu等[3]報(bào)道，在所有表達(dá)CD117的急性淋巴細(xì)胞白血病患者中，T系比B系更常見。在筆者的研究中，有4例T-ALL，ALL組中僅有1例CD117表達(dá)陽(yáng)性，該患者正好是T系，亦與前述文獻(xiàn)報(bào)道相符。

綜上所述，AML 患者骨髓CD117的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常人和ALL患者，可作為AML患者M(jìn)ICM分型診斷的髓系免疫學(xué)標(biāo)志，可以輔助排除ALL，對(duì)于AL患者的診斷與鑒別診斷具有重要意義。

[1] Muroi K，Amemiya Y，Miura Y.Specificity of CD117 expression in the diagnosis of acute myeloid leukemia[J]. Leukemia，1996，10：1048.

[2] 張之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].第3版.北京：科學(xué)出版社，2007：131-134.

[3] Nomdedeu JF，Mateu R，Altes A，et al.Enhanced myeloid specificity of CD117 compared with CD13 and CD33[J]. Leuk Res，1999，23：341-347.

[4] 沈紅強(qiáng)，湯永民，楊世隆，等. CD117在白血病細(xì)胞上的表達(dá)分析[J].中華血液病學(xué)雜志, 2003, 24 （5）：228-230.