陳斌玲 ，焦雨歡 ，劉 雙 ，高 冬 *，宋 軍

1.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福建 福州 350108；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，北京 100700

當(dāng)前缺血性疾病患者日漸增多，以糖尿病肢體動(dòng)脈閉塞癥（DAO）、閉塞性動(dòng)脈硬化癥（ASO）和血栓閉塞性脈管炎（TAO）為主的下肢缺血性疾病發(fā)病率逐年增加。國(guó)外資料顯示，70歲以上老年人群中僅動(dòng)脈硬化閉塞癥患病率即可達(dá)15%～20%[1]。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年，其高發(fā)生率和廣泛累及率已嚴(yán)重危害著人們的身心健康和生存質(zhì)量，亟待探索其發(fā)生機(jī)制、預(yù)防措施及治療方法。建立缺血?jiǎng)游锬Ｐ褪情_(kāi)展缺血性疾病研究的一種有效途徑。通過(guò)對(duì)動(dòng)物模型的在體研究，有助于闡明缺血性疾病的病變機(jī)制、發(fā)展過(guò)程，篩選出有特異性治療作用的藥物及方法。近年來(lái)，通過(guò)建立動(dòng)物后肢缺血模型進(jìn)行血管新生、基因療法和干細(xì)胞移植等研究已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。綜合國(guó)內(nèi)外研究資料可見(jiàn)，肢體缺血模型適用于急性缺血、慢性持續(xù)性缺血、肢體缺血再灌注以及缺血預(yù)處理等幾方面的研究[2-10]。因此，如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼_選擇肢體缺血模型的制作方法，以及如何對(duì)該模型的缺血效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而制作出效果確實(shí)可靠、穩(wěn)定性良好的肢體缺血模型顯得尤為重要。有學(xué)者根據(jù)缺血效果將缺血?jiǎng)游锬Ｐ涂偨Y(jié)為暫時(shí)缺血和永久缺血兩大類(lèi)[2]，本研究現(xiàn)對(duì)這兩類(lèi)肢體缺血模型的建立、應(yīng)用和評(píng)價(jià)作一總結(jié)，以期為該模型的相關(guān)研究應(yīng)用提供參考。

1 模型制作

1.1 暫時(shí)缺血模型

暫時(shí)缺血模型包括肢體缺血再灌注損傷模型[3]以及缺血預(yù)處理模型，適用于肢體缺血再灌注損傷的防治[4]、肢體遠(yuǎn)距缺血預(yù)處理[5]和肢體遠(yuǎn)距缺血后適應(yīng)[6]的研究。暫時(shí)缺血模型制作方法分為肢體環(huán)扎法和暫時(shí)阻斷動(dòng)脈法兩種。肢體環(huán)扎法是外用繃帶、止血帶或橡皮筋等物質(zhì)環(huán)扎于動(dòng)物單側(cè)或雙側(cè)肢體根部[4，7]，一段時(shí)間后放開(kāi)，以此達(dá)到暫時(shí)缺血的目的。環(huán)扎時(shí)間視研究目的而異，缺血再灌注損傷一般為4 h左右，而肢體缺血后適應(yīng)或肢體遠(yuǎn)距預(yù)處理多為5 min，并反復(fù)多次進(jìn)行。肢體環(huán)扎法具有無(wú)創(chuàng)性，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的損傷較小。暫時(shí)阻斷動(dòng)脈法通過(guò)手術(shù)分離實(shí)驗(yàn)動(dòng)物某側(cè)局部供血?jiǎng)用}，用血管夾暫時(shí)夾閉血流，最少3 h后撤夾恢復(fù)血流灌注，其效果比肢體環(huán)扎法可靠，但對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的損傷較大[8]。Messina等[2]將兩種方法相結(jié)合使用，以加強(qiáng)肢體的急性缺血程度，其效果較單純環(huán)扎或單純夾閉血管要好。大體上看，暫時(shí)缺血模型的建立方法簡(jiǎn)便、易行，效果能夠令人滿意，基本上可以符合實(shí)驗(yàn)要求。

1.2 永久缺血模型

永久缺血模型是目前國(guó)內(nèi)外肢體急、慢性缺血模型的主流，在缺血損傷、血管新生、細(xì)胞移植及基因轉(zhuǎn)染等方面研究應(yīng)用最為廣泛[9-11]，其制作方法繁多，主要有血管結(jié)扎切斷法和血管栓塞法等。

1.2.1 血管結(jié)扎切斷法 血管結(jié)扎切斷法在暫時(shí)阻斷動(dòng)脈法基礎(chǔ)上，將分離出的某支供血?jiǎng)?、靜脈主干或其分支進(jìn)行結(jié)扎或切斷以造成急性血管永久阻斷從而引起缺血，為國(guó)內(nèi)外肢體缺血模型中最常用的制作方法。根據(jù)阻斷方式和阻斷血管的不同又可細(xì)分為單純結(jié)扎血管、結(jié)扎并切斷血管、動(dòng)靜脈雙阻斷和單純動(dòng)脈阻斷幾種類(lèi)型。單純結(jié)扎血管法主要用于構(gòu)建缺血時(shí)間不超過(guò)2周的急性缺血模型。而結(jié)扎并切斷血管法比單純結(jié)扎血管所產(chǎn)生的缺血現(xiàn)象嚴(yán)重，缺血時(shí)間長(zhǎng)達(dá)4周左右，甚至Luo等[12]通過(guò)2次手術(shù)造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物更為嚴(yán)重的缺血，持久時(shí)間約60 d，適用于慢性持續(xù)性肢體缺血模型的建立。動(dòng)靜脈雙結(jié)扎切斷雖可造成較嚴(yán)重的缺血損傷，但其引起的病理改變與外周動(dòng)脈疾病存在較大差異[13]，目前主要用于缺血模型影響因素方面的研究。而單純動(dòng)脈結(jié)扎切斷因其所引起的血流變化與臨床外周動(dòng)脈疾病相似而被廣泛應(yīng)用[13]，備選切斷的血管有股動(dòng)脈[14]、股動(dòng)脈及其分支[15]、髂總動(dòng)脈[16]以及髂、股動(dòng)脈及其分支[17-18]等，所引起的缺血損傷程度大體上依該次序遞增。不同學(xué)者因采用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種不同，選擇結(jié)扎切斷的動(dòng)脈也不盡相同，單純切斷股動(dòng)脈或髂總動(dòng)脈一般用于下肢血管非常細(xì)的大鼠等小型動(dòng)物；結(jié)扎切斷髂股段動(dòng)脈及其分支，可用于犬、兔等大型動(dòng)物及小鼠、大鼠等小型動(dòng)物的造模[18-20]。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物下肢血管豐富，如小鼠解剖上雖然缺乏股深動(dòng)脈，但髂股段存在大量側(cè)支血管，則需同時(shí)切斷髂股段的主要分支以防止側(cè)支血流的快速重建[20]。以此類(lèi)推，結(jié)扎并切斷髂股段動(dòng)脈及其分支為最普遍采用的永久缺血模型造模方法。

1.2.2 血管栓塞法 血管栓塞法采用外周性血管栓塞劑注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物下肢供血?jiǎng)用}引起血管栓塞進(jìn)而產(chǎn)生缺血。不同栓塞劑栓塞效果不一。碘化油和明膠海綿屬于短期血管栓塞劑，不僅無(wú)法栓塞微血管網(wǎng)，且Kobayshi等[21]報(bào)道稱(chēng)，增加栓塞次數(shù)，會(huì)導(dǎo)致組織缺氧引起血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）及Bcl-2蛋白過(guò)量表達(dá)，加速形成側(cè)支循環(huán)而降低栓塞效果，缺血持續(xù)時(shí)間約1周，無(wú)法滿足慢性缺血的特性。而白及膠因其直徑小至3.5mm，可栓塞末梢小動(dòng)脈，維持時(shí)間長(zhǎng)達(dá)5周，隨后被降解吸收，可允許重復(fù)栓塞治療。而且堵塞在較大口徑血管內(nèi)的白及膠在血流的沖擊和溶解下，產(chǎn)生“遷徙”現(xiàn)象，到達(dá)更細(xì)的分支內(nèi)造成更均勻、徹底的栓塞，同時(shí)，白及可抑制革蘭陽(yáng)性菌而減少被栓塞器官的感染[22]。為進(jìn)一步提高栓塞效果，可將白及膠進(jìn)行乳化、凍凝、化學(xué)交聯(lián)后制備出白及膠微球，其不僅具有白及膠的特性，還能在血液中緩慢膨脹機(jī)械性阻塞血管，粗糙的表面可促使血小板解體，導(dǎo)致繼發(fā)性血栓形成，并可持續(xù)至少一個(gè)月不被溶解。因白及膠微球直徑僅為幾十微米，能更均勻、徹底地栓塞后肢小血管分支，達(dá)到完全性栓塞的效果，栓塞作用時(shí)間持久，效果穩(wěn)定，重復(fù)性好，是一種理想的肢體缺血模型制作方法[23]。目前國(guó)內(nèi)學(xué)者多將其應(yīng)用于大鼠慢性肢體缺血模型的制作，國(guó)外還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。

1.2.3 其他方法 采用不同手段使動(dòng)脈管腔縮窄或閉塞，適用于犬、兔等大型動(dòng)物造模。馬中等[24]、邊杰芳等[25]通過(guò)結(jié)扎包括股深動(dòng)脈在內(nèi)的所有分支，縱形切開(kāi)股動(dòng)脈前壁0.5 cm，自切開(kāi)處向動(dòng)脈腔遠(yuǎn)端并列插入2根長(zhǎng)25～30 cm，直徑1.5 mm的螺旋狀金屬絲，插入后以無(wú)創(chuàng)血管縫線縫合動(dòng)脈切口，并使股動(dòng)脈管腔縮窄約1/2，逐層縫合皮下組織及皮膚的方法制作犬后肢缺血模型。其原理是通過(guò)置入的異物使血管內(nèi)皮受損，膠原成分暴露，激活外源性凝血機(jī)制，逐漸形成管腔內(nèi)血栓；同時(shí)金屬絲的機(jī)械栓堵人為將股動(dòng)脈管腔縮窄約1/2，迫使動(dòng)脈血流銳減，側(cè)支代償相對(duì)不足，而造成顯著的肢體慢性缺血癥狀。Grigorios等[26]通過(guò)將3-F導(dǎo)管插入新西蘭大白兔左股淺動(dòng)脈，并置入5個(gè)鉑金線圈的方法使動(dòng)物血管閉塞，成功制作肢體缺血模型。另外，Gale等[27]報(bào)道一種含有吸濕性酪蛋白的縮窄器，可吸收血管腔內(nèi)水分并逐漸膨脹，進(jìn)而阻塞整個(gè)血管腔，亦可用于制作慢性下肢缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀?/p>

2 模型評(píng)價(jià)

2.1 暫時(shí)缺血模型

骨骼肌缺血損傷是一個(gè)多因素參與的復(fù)雜過(guò)程，目前主要圍繞下述幾方面機(jī)制的指標(biāo)對(duì)模型進(jìn)行相應(yīng)評(píng)估：①能量代謝障礙。當(dāng)組織缺血時(shí)，有氧代謝途徑受阻而變?yōu)闊o(wú)氧代謝，乳酸、乳酸鹽大量增加對(duì)細(xì)胞造成損害，細(xì)胞膜完整性破壞，細(xì)胞內(nèi)酶及蛋白質(zhì)外漏，而致血中肌酸磷酸激酶和乳酸脫氫酶的含量明顯升高[4]。②氧自由基損傷。肢體缺血或再灌注時(shí)，肌體產(chǎn)生大量氧自由基使組織內(nèi)過(guò)多消耗超氧化物歧化酶（SOD），同時(shí)不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化形成丙二醛（MDA）不斷損傷組織，并引起鈣超載，進(jìn)一步加重組織的損傷，故血清和骨骼肌SOD、MDA含量可反映組織氧自由基含量及氧化損傷程度[4]。③骨骼肌鈣離子超載和黃嘌呤氧化酶（XOD）[28]水平。骨骼肌缺血和再灌注后不斷產(chǎn)生的氧自由基損傷了細(xì)胞膜和線粒體膜，使Ca2+-ATP酶活性不斷降低，不能將胞內(nèi)的Ca2+泵出胞外，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度明顯增加；同時(shí)，再灌注時(shí)鈣離子交換受阻，線粒體及溶酶體內(nèi)Ca2+濃度升高，Ca2+與胞漿受體鈣調(diào)蛋白結(jié)合后，激活蛋白酶，使黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)變?yōu)閄OD而大量堆積。④炎癥反應(yīng)。血清髓過(guò)氧化物酶（MPO）是中性粒細(xì)胞的標(biāo)志酶，可反映中性粒細(xì)胞聚積的程度，下肢腓腸肌病理學(xué)檢測(cè)可觀察中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)情況[4]，通過(guò)檢測(cè)MPO含量及骨骼肌病理學(xué)觀察以明確炎癥反應(yīng)的程度。⑤血管內(nèi)皮損傷。其可通過(guò)腓腸肌濕重干重比測(cè)定[4]和病理學(xué)觀察加以確定。前者反映骨骼肌組織水腫程度，與再灌注損傷時(shí)組織微血管床損傷有關(guān)；后者可直觀形象地反映肢體骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷情況。此外，結(jié)合機(jī)體骨骼肌缺血損傷的臨床綜合表現(xiàn)，還需進(jìn)行肢體顏色、皮溫、活動(dòng)狀態(tài)等一般狀態(tài)觀察[16]。

2.2 永久缺血模型

要想建立與嚴(yán)重慢性肢體缺血患者具有相似性的動(dòng)物模型，必須利用現(xiàn)有的技術(shù)手段，其中，微血管密度為判斷側(cè)支循環(huán)生成的“金標(biāo)準(zhǔn)”[29]，血管造影和血流灌注測(cè)定是必備的監(jiān)測(cè)方法，從而客觀、具體地評(píng)價(jià)缺血的程度和時(shí)間。國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍以健側(cè)肢體作為對(duì)照，從形態(tài)和功能兩方面同時(shí)對(duì)下肢永久缺血模型進(jìn)行評(píng)價(jià)[30]。①形態(tài)方面：通過(guò)各種血管造影等技術(shù)手段分析后肢側(cè)支血管數(shù)和微血管密度，最常用的血管造影術(shù)為動(dòng)脈注射數(shù)字減影法[15]，但其空間分辨率不高，細(xì)小血管顯示欠清晰，可采用CT血管造影[30]更逼真地顯示血管立體形態(tài)及其與周?chē)Y(jié)構(gòu)關(guān)系。除此以外，還可結(jié)合病理形態(tài)學(xué)觀察缺血組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行多方面評(píng)價(jià)模型缺血效果。②功能方面：采用功能等級(jí)評(píng)分表[31]（目前已形成的有鼠后肢缺血等級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)表[32]）結(jié)合動(dòng)物缺血損傷的一般臨床表現(xiàn)對(duì)肢體功能進(jìn)行評(píng)價(jià)，并使用激光多普勒灌注系統(tǒng)[17]測(cè)定下肢血流量、血壓和皮溫評(píng)價(jià)肢體血流灌注情況。近年越來(lái)越多的先進(jìn)技術(shù)被應(yīng)用于側(cè)支循環(huán)功能的評(píng)價(jià)，并各具特點(diǎn)，其中，放射性同位素灌注掃描簡(jiǎn)便易行，能準(zhǔn)確地定量、定位，但顯影所需時(shí)間較長(zhǎng)[20]；CT灌注成像能快速、無(wú)創(chuàng)、定量或半定量地反映組織血管生成及血流灌注，較準(zhǔn)確地評(píng)估動(dòng)物后肢缺血模型隨時(shí)間推移發(fā)生的肌肉組織灌注變化，但存在運(yùn)動(dòng)偽影、溶劑效應(yīng)等問(wèn)題[29]；核磁共振成像不需注射造影劑，是一種非介入探測(cè)技術(shù)，但掃描時(shí)間長(zhǎng)，空間分辨率不及CT，且價(jià)格較昂貴[26]。

3 問(wèn)題及展望

鑒于肢體缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷闹苽浞椒?、?shí)驗(yàn)條件控制等方面都取得了很大進(jìn)展，且CT、核磁共振成像等新技術(shù)在模型評(píng)價(jià)中的推廣應(yīng)用，很大程度促進(jìn)了肢體缺血模型的研究。但還有一些突出問(wèn)題尚待解決，主要體現(xiàn)在永久缺血模型的穩(wěn)定性和擬人性方面欠佳。由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有極強(qiáng)的血管重建能力，并且急性缺血后局部產(chǎn)生的剪切力、炎性反應(yīng)、內(nèi)皮祖細(xì)胞的局部浸入以及動(dòng)物豐富的側(cè)支循環(huán)，使患肢能在短時(shí)間內(nèi)促進(jìn)血管新生，進(jìn)而恢復(fù)血流。許多研究發(fā)現(xiàn)，即使結(jié)扎并切斷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后肢供血?jiǎng)用}，引起遠(yuǎn)端肢體缺血壞死的情況并不持久[16，28]，且不同的造模方法導(dǎo)致的缺血程度和持續(xù)時(shí)間差異較大，使得模型的穩(wěn)定性急待進(jìn)一步提高。另外，雙側(cè)下肢缺血造模死亡率高[20]，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般為單側(cè)造模，患肢由初期急性嚴(yán)重缺血可逐漸恢復(fù)到穩(wěn)定的輕度缺血狀態(tài)，而人的下肢慢性缺血往往發(fā)生在雙側(cè)，是一個(gè)緩慢的逐漸加重的過(guò)程。因此，如何建立一個(gè)擬人性較好、可行性高、重復(fù)性好的動(dòng)物慢性肢體缺血模型仍有待進(jìn)一步探索研究?？上驳氖且延袑W(xué)者開(kāi)始對(duì)不同年齡[31]、不同品系[33]、不同性別[34]以及不同缺血效果[27]的動(dòng)物模型特點(diǎn)進(jìn)行比較研究，為關(guān)鍵問(wèn)題的解決提供了基本條件。同時(shí)，隨著不同實(shí)驗(yàn)方法的整合和各種新技術(shù)的發(fā)明應(yīng)用，必將進(jìn)一步推進(jìn)肢體缺血模型制作體系的完善。

[1]Norgren L,Hiatt W,Dormandy J,et al.Inter-soeiety consensus for the management of peripheral arterial disease(TASCⅡ)[J].Eur J Vase Endovase Surg,2007,33:71-75.

[2]Messina LM,Brevetti LS,Chang DS,et al.Therapeutic angiogenesis for critical limb ischemia:invited commentary[J].J Control Release,2002,78(1-3):285-294.

[3]Erdem M,Bostan B,Günes T,et al.Protective effects of melatonin on ischemia-reperfusion injury of skeletal muscle[J].Eklem Hastalik Cerrahisi,2010,21(3):166-171.

[4]馮亞高,黃晨.銀杏葉提取物預(yù)處理對(duì)肢體骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].醫(yī)學(xué)信息,2009,22(2):235.

[5]吳芳,耿智隆,曹虹,等.遠(yuǎn)隔肢體缺血預(yù)處理對(duì)兔單肺缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡的影響[J].臨床麻醉學(xué)雜志,2010,26(4):342-344.

[6]趙瑾,李楊,黃磊,等.肢體缺血后適應(yīng)對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制[J].中國(guó)病理生理雜志,2010,26(6):1096-1101.

[7]浦踐一,趙琪,門(mén)秀麗,等.?；撬釋?duì)大鼠肢體骨骼肌缺血再灌注后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的影響[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào),2010,24(4):223-225.

[8]Jiang Q,Hu YH,Wei LC.Expression of tumor necrosis factor alpha in cartilage during limb ischemia-reperfusion injury[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(20):3611-3614.

[9]Capt HM,Hancock CGE,Lt-Cmdr AS,et al.Hemorrhagic shock worsens neuromuscular recovery in a porcine model of hind limb vascular injury and ischemia reperfusion[J].Journal of Vascular Surgery,2011,53(4):1052-1062.

[10]Edward A,Phelpsa NL,Peter M,et al.Bioartificial matrices for therapeutic vascularization[J].PNAS,2010,107(8):3323-3328.

[11]李明琰,陳建威,張新建,等.不同劑量HIF-1基因?qū)ν萌毖笾苌勺饔玫挠绊慬J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,30(2):210-213.

[12]Luo FW,David WL,et al.Vascular growth factor expression in a rat model of severe limb ischemia[J].Journal of Surgical Research,2002,108(2):258-267.

[13]Takako G,Naoto F,Akira AKI,et al.Search for appropriate experimental methods to create stable hind-limb ischemia in mouse[J].Tokai J Exp Clin Med,2006,3(31):128-132.

[14]魏芳晶,王翠艷,陰淑瑩,等.腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合治療大鼠肢體缺血的研究[J].中華老年醫(yī)學(xué)雜志,2010,29(10):858-862.

[15]楊盛家,陳兵,羅濤,等.大鼠后肢急性缺血模型的構(gòu)建及評(píng)估[J].中國(guó)普通外科雜志,2009,18(6):580-583.

[16]梁翠宏,田鏵,徐蘊(yùn).結(jié)扎切斷法制作大鼠后肢缺血模型的效果[J].解剖學(xué)雜志,2006,29(6):795-796.

[17]Yang ZJ,Moritz WB,Nicolas D,et al.Call for a reference model of chronic hind limb ischemia to investigate therapeutic angiogenesis[J].Vascular Pharmacology,2009,51(4):268-274.

[18]Troidl C,Nef H,Voss S,et al.Calcium-dependent signalling is essential during collateral growth in the pig hind limb-ischemia model[J].Journal of Molecular and Cellular Cardiology,2010,49(1):142-151.

[19]Brian P,Ari H,Yang YG,et al.eNOS affects both early and late collateral arterial adaptation and blood flow recovery after induction of hindlimb ischemia in mice[J].J Vasc Surg,2010,51(1):165.

[20]方偉,郭曙光,龐榮清.兔后肢缺血模型的制作[J].云南醫(yī)藥,2008,2(29):57.

[21]Kobayshi N,Ishii M,Veno Y.Co-expression of Bcl-2 protein and vascular endothelial growth factor in hepatocellular carcinomas treated by chemoembolization[J].Liver,l999,19(25):31.

[22]鄭傳勝,馮敢生,張彥肪,等.中藥白芨膠作為血管栓塞劑的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華放射學(xué)雜志,l998,3(32):88-91.

[23]梁翠宏,田鏵,徐蘊(yùn),等.結(jié)扎切斷法與白芨微粒栓塞法建立大鼠后肢缺血模型效果比較[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào),2007,45(10):1008-1010.

[24]馬中,易軍,顏立軍,等.肢體負(fù)壓治療對(duì)改善犬缺血肢體自由基損傷的影響[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,26(6):514-516.

[25]邊杰芳,楊振東,寧莫凡.犬后肢動(dòng)脈閉塞性病變模型的建立[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,1996,13(6):325-326.

[26]Grigorios K,Wesley D.Gilson MS,et al.Hind limb ischemia in rabbit model:T2-prepared versus time-of-flight MR angiography at 3T[J].Radiology,2007,245(3):761-763.

[27]Gale L,Tang C,David S,et al.The effect of gradual or acute arterial occlusion on skeletal muscle blood flow,arteriogenesis and inflammation in rat hind limb ischemia[J].Journal of Vascular Surgery,2005,41(2):312-320.

[28]張娜,耿菲,劉燕,等.肢體缺血再灌注后肝損傷中細(xì)胞凋亡的發(fā)生及?；撬岬谋Ｗo(hù)效應(yīng)[J].中國(guó)綜合臨床,2009,25(2):130-132.

[29]曾祥柱,李選.CT灌注成像評(píng)價(jià)PAOD兔后肢慢性缺血模型的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)介入放射學(xué),2009,3(1):11-13.

[30]蔡文杰,王銘潔,朱依純.下肢缺血模型中微循環(huán)功能研究方法的建立[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2010,26(5):690-692.

[31]Tormod S,Westvik MD,Tamara N,et al.Limb ischemia after iliac ligation in aged mice stimulates angiogenesis without arteriogenesis[J].Journal of Vascular Surgery,2009,49(2):464-472.

[32]Yu J,Muinck ED,Zhuang Z,et al.Endothelial nitric oxide synthase is critical for ischemic remodeling,mural cell recruitment and blood flow reserve[J].Proc Natl Acad Sci USA,2005,102:10999-11004.

[33]Paula K,Shireman Q,Marlon P.Differential Necrosis Despite Similar Perfusion in Mouse Strains after ischemia [J].Journal of Surgical Research,2005,129(2):242-250.

[34]Zenon S,Kyriakides LK,Pantelis P,et al.Gender does not influence angiogenesis and arteriogenesis in a rabbit model of chronic hind limb ischemia[J].International Journal of Cardiology,2003,92(1):83-91.