范 磊 蔣法成 陳樹(shù)霞 蔣鎖俊

（1江蘇省淮安市清浦區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇省淮安市 223002；2江蘇省淮安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇省淮安市 223001）

江蘇省淮安市清浦區(qū)豬細(xì)小病毒病血清學(xué)調(diào)查

范 磊1蔣法成2陳樹(shù)霞2蔣鎖俊2

（1江蘇省淮安市清浦區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇省淮安市 223002；2江蘇省淮安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇省淮安市 223001）

為了解清浦區(qū)生豬細(xì)小病毒感染情況，作者應(yīng)用ELISA試驗(yàn)對(duì)該區(qū)沒(méi)有免疫豬細(xì)小病毒疫苗的5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)共計(jì)133份血清樣品進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示：規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)的豬均感染豬細(xì)小病毒，被檢的5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，有3個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)檢出細(xì)小病毒抗體，2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)沒(méi)有檢出，檢出率達(dá)3/5，說(shuō)明該區(qū)大部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)的豬已被細(xì)小病毒污染。規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)抗體陽(yáng)性檢出率分別是8.99%和9.09%，個(gè)別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽(yáng)性率高達(dá)20%，須引起高度重視。

抗體監(jiān)測(cè)；豬細(xì)小病毒；清浦區(qū)；淮安

豬細(xì)小病毒病是由豬細(xì)小病毒引起妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎和弱仔為特征的繁殖障礙性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失。為準(zhǔn)確掌握豬細(xì)小病毒病在江蘇省淮安市清浦區(qū)的流行動(dòng)態(tài)，制定科學(xué)合理的防控方案，筆者于2012年4月份對(duì)清浦區(qū)5個(gè)鄉(xiāng) （鎮(zhèn)）部分規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)隨機(jī)采取133份豬血清進(jìn)行了血清學(xué)檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1診斷試劑

豬細(xì)小病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自江蘇力通生物技術(shù)有限公司，武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)：111205。

1.1.2 被檢血清

豬血清133份，采自清浦區(qū)城南、和平、武墩、黃碼、鹽河5個(gè)鄉(xiāng) （鎮(zhèn)），每鄉(xiāng) （鎮(zhèn)）選擇1個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和3家散養(yǎng)戶(hù)，前腔靜脈采血后自然凝固，分離血清，各血清樣品清亮，無(wú)溶血，置冰箱4℃保存?zhèn)溆?。所有被檢測(cè)豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)均未免疫豬細(xì)小病毒疫苗。

1.2 方法

1.2.1 配制洗滌液

將試劑盒中的濃縮洗滌液恢復(fù)至25℃左右，搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水作20倍稀釋。

1.2.2 樣品稀釋

在血清稀釋板中按1︰40的體積稀釋待檢血清樣品 （195μL樣品稀釋液中加5μL待檢血清樣品）。

1.2.3 對(duì)照稀釋

在血清稀釋板中按1︰4分別稀釋陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照 （180μL樣品稀釋液中加60μL對(duì)照血清）。

1.2.4 檢測(cè)步驟

取抗原包被板，分別將稀釋好的待檢血清和對(duì)照各取100μL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔。輕輕振勻孔中樣品，置37℃溫育30分鐘。

甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200μL，靜置3分鐘倒掉，再在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌5次。

每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗 100μL，置37℃溫育30分鐘。

洗滌5次，方法同上。每次均在干凈吸水紙上拍干。

每孔先加底物液A一滴 （50μL）、再加底物液B一滴 （50μL），混勻，18℃～25℃避光顯色10分鐘。

每孔加終止液一滴 （50μL），10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果，測(cè)定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下。

1.3 結(jié)果判定

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔 OD630nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm 值≥0.6， 陰性對(duì)照孔平均OD630nm 值必須＜0.3。 樣品 OD630nm值≥0.4，判為陽(yáng)性；樣品OD630nm值＜0.4，判為陰性。

2 監(jiān)測(cè)結(jié)果

監(jiān)測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)表1、表2。

3 討論

3.1 監(jiān)測(cè)結(jié)果分析

本次監(jiān)測(cè)的生豬，都是育肥豬和仔豬，沒(méi)有母豬和種公豬，從監(jiān)測(cè)結(jié)果可以看出，目前清浦區(qū)規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)均感染豬細(xì)小病毒，被檢的5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，有3個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)均檢出細(xì)小病毒抗體，2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)沒(méi)有檢出，檢出率達(dá)3/5，說(shuō)明大部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)已被細(xì)小病毒污染。通過(guò)對(duì)陽(yáng)性率較高的鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行跟蹤調(diào)查，現(xiàn)其規(guī)模場(chǎng)中母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等臨床癥狀較多，這可能與豬細(xì)小病毒病感染有關(guān)。同時(shí)在散養(yǎng)戶(hù)中檢出了陽(yáng)性抗體豬只，說(shuō)明該病已經(jīng)在本地?cái)U(kuò)散蔓延。

清浦區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)未經(jīng)免疫豬只的細(xì)小病毒病抗體陽(yáng)性檢出率分別是8.99%和9.09%，兩者抗體陽(yáng)性率差異不顯著 （P＞0.05），個(gè)別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽(yáng)性率高達(dá)20%，須引起高度重視。

表1清浦區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細(xì)小病毒病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

表2清浦區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)豬細(xì)小病毒病感染率

33..22 感染原因分析

3.2.1檢疫不嚴(yán)

最近幾年，生豬養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益很高，清浦區(qū)大量從外地引進(jìn)種豬和仔豬，由于檢疫不嚴(yán)格而將疫病引入。

3.2.2豬場(chǎng)污染情況

規(guī)模豬場(chǎng)飼養(yǎng)密度大，有利于病原的傳播。散養(yǎng)戶(hù)的生豬雖然飼養(yǎng)密度較小，流通少，接觸傳染源機(jī)會(huì)小，但是，多數(shù)散養(yǎng)戶(hù)的仔豬都是購(gòu)自規(guī)模豬場(chǎng)和傳統(tǒng)母豬養(yǎng)殖戶(hù)，仔豬的出生地多已污染細(xì)小病毒，因此，散養(yǎng)戶(hù)也檢出病毒抗體就不足為奇了。

3.2.3未免疫細(xì)小病毒病疫苗

由于多數(shù)規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)沒(méi)有認(rèn)識(shí)到豬細(xì)小病毒病危害的嚴(yán)重性[1]，未將其納入免疫計(jì)劃范圍，導(dǎo)致免疫抗體缺失，細(xì)小病毒乘虛而入，帶毒生豬不斷增多。

3.2.4缺乏監(jiān)測(cè)

和平、鹽河和城南3鄉(xiāng)鎮(zhèn)被檢豬場(chǎng)都是飼養(yǎng)多年的老場(chǎng)，有生豬養(yǎng)殖的傳統(tǒng)和歷史，本次均有抗體陽(yáng)性檢出，可能和該地養(yǎng)殖時(shí)間長(zhǎng)及檢疫與消毒不夠嚴(yán)格有關(guān)，歷史上從未開(kāi)展過(guò)細(xì)小病毒的監(jiān)測(cè)。未檢出的2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，其被檢規(guī)模場(chǎng)都是剛建設(shè)兩年的新場(chǎng)，其豬場(chǎng)選址和規(guī)劃布局科學(xué)合理，消毒制度完善且落實(shí)到位，豬場(chǎng)管理者養(yǎng)殖、防疫技術(shù)水平較高。染。通過(guò)對(duì)陽(yáng)性率較高的鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行跟蹤調(diào)查，現(xiàn)其規(guī)模場(chǎng)中母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等臨床癥狀較多，這可能與豬細(xì)小病毒病感染有關(guān)。同時(shí)在散養(yǎng)戶(hù)中檢出了陽(yáng)性抗體豬只，說(shuō)明該病已經(jīng)在本地?cái)U(kuò)散蔓延。

清浦區(qū)規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)未經(jīng)免疫豬只的細(xì)小病毒病抗體陽(yáng)性檢出率分別是8.99%和9.09%，兩者抗體陽(yáng)性率差異不顯著 （P＞0.05），個(gè)別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽(yáng)性率高達(dá)20%，須引起高度重視。

3.2.1檢疫不嚴(yán)

最近幾年，生豬養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益很高，清浦區(qū)大量從外地引進(jìn)種豬和仔豬，由于檢疫不嚴(yán)格而將疫病引入。

3.2.2豬場(chǎng)污染情況

規(guī)模豬場(chǎng)飼養(yǎng)密度大，有利于病原的傳播。散養(yǎng)戶(hù)的生豬雖然飼養(yǎng)密度較小，流通少，接觸傳染源機(jī)會(huì)小，但是，多數(shù)散養(yǎng)戶(hù)的仔豬都是購(gòu)自規(guī)模豬場(chǎng)和傳統(tǒng)母豬養(yǎng)殖戶(hù)，仔豬的出生地多已污染細(xì)小病毒，因此，散養(yǎng)戶(hù)也檢出病毒抗體就不足為奇了。

3.2.3未免疫細(xì)小病毒病疫苗

由于多數(shù)規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)沒(méi)有認(rèn)識(shí)到豬細(xì)小病毒病危害的嚴(yán)重性[1]，未將其納入免疫計(jì)劃范圍，導(dǎo)致免疫抗體缺失，細(xì)小病毒乘虛而入，帶毒生豬不斷增多。

3.2.4缺乏監(jiān)測(cè)

和平、鹽河和城南3鄉(xiāng)鎮(zhèn)被檢豬場(chǎng)都是飼養(yǎng)多年的老場(chǎng)，有生豬養(yǎng)殖的傳統(tǒng)和歷史，本次均有抗體陽(yáng)性檢出，可能和該地養(yǎng)殖時(shí)間長(zhǎng)及檢疫與消毒不夠嚴(yán)格有關(guān)，歷史上從未開(kāi)展過(guò)細(xì)小病毒的監(jiān)測(cè)。未檢出的2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，其被檢規(guī)模場(chǎng)都是剛建設(shè)兩年的新場(chǎng)，其豬場(chǎng)選址和規(guī)劃布局科學(xué)合理，消毒制度完善且落實(shí)到位，豬場(chǎng)管理者養(yǎng)殖、防疫技術(shù)水平較高。

表1清浦區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細(xì)小病毒病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

表2清浦區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)豬細(xì)小病毒病感染率

4 防控對(duì)策

4.1 強(qiáng)化疫病檢疫

本病尚無(wú)有效治療方法，只能采用對(duì)癥療法，預(yù)防本病最有效的方法是堅(jiān)持自繁自養(yǎng)。必須要從場(chǎng)外進(jìn)豬時(shí)應(yīng)加強(qiáng)檢疫，血清學(xué)檢測(cè)為陰性方可引進(jìn)，引進(jìn)隔離觀察2周后再進(jìn)行1次檢測(cè)，證實(shí)為陰性后再混群飼養(yǎng)。

4.2 加強(qiáng)豬場(chǎng)凈化

感染豬場(chǎng)應(yīng)將發(fā)病母豬、仔豬淘汰，并用血清學(xué)方法對(duì)全群進(jìn)行檢查，對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性豬應(yīng)采取隔離或淘汰[2]，豬場(chǎng)環(huán)境、用具，嚴(yán)格消毒。

4.3 及時(shí)科學(xué)免疫

根據(jù)豬場(chǎng)抗體水平監(jiān)測(cè)情況，確定首免時(shí)間，間隔3周再加強(qiáng)免疫，有良好的預(yù)防效果。

4.4 做好疫病監(jiān)測(cè)

由于豬場(chǎng)中各種潛伏疫病引起豬的免疫抑制，從而導(dǎo)致其它疫病相繼發(fā)生，長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)，并采取恰當(dāng)?shù)拇胧┦鞘直匾?。尤其是?guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)，一定

本病尚無(wú)有效治療方法，只能采用對(duì)癥療法，預(yù)防本病最有效的方法是堅(jiān)持自繁自養(yǎng)。必須要從場(chǎng)外進(jìn)豬時(shí)應(yīng)加強(qiáng)檢疫，血清學(xué)檢測(cè)為陰性方可引進(jìn)，引進(jìn)隔離觀察2周后再進(jìn)行1次檢測(cè)，證實(shí)為陰性后再混群飼養(yǎng)。

感染豬場(chǎng)應(yīng)將發(fā)病母豬、仔豬淘汰，并用血清學(xué)方法對(duì)全群進(jìn)行檢查，對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性豬應(yīng)采取隔離或淘汰[2]，豬場(chǎng)環(huán)境、用具，嚴(yán)格消毒。

根據(jù)豬場(chǎng)抗體水平監(jiān)測(cè)情況，確定首免時(shí)間，間隔3周再加強(qiáng)免疫，有良好的預(yù)防效果。

由于豬場(chǎng)中各種潛伏疫病引起豬的免疫抑制，從而導(dǎo)致其它疫病相繼發(fā)生，長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)，并采取恰當(dāng)?shù)拇胧┦鞘直匾?。尤其是?guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)，一定要定期進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)，及時(shí)了解豬場(chǎng)疫病流行病學(xué)情況和疫苗的免疫效果，同時(shí)實(shí)行嚴(yán)格的生物安全措施，做好各種疫病的預(yù)防和控制工作[3]。要定期進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)，及時(shí)了解豬場(chǎng)

[1]鄧位喜，涂麗君，曾貴英，等.遵義地區(qū)豬細(xì)小病毒病的血清學(xué)調(diào)查.豬業(yè)科學(xué)，2008（2）：25.

[2]高洪，趙強(qiáng)，立陸勇，等.貴州省桐梓縣豬細(xì)小病毒病的血清學(xué)調(diào)查.畜牧獸醫(yī)科技信息，2010（2）：32.

[3]杜宗沛，吳植，解慧梅，等.江蘇中部地區(qū)3個(gè)種豬場(chǎng)主要疫病的調(diào)查及應(yīng)對(duì)方略.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2011，47（8）：47-48.

S858.285.3

C

1673-4645（2012）07-0030-02