高懷云，熊晶晶，胡卡明

(1．成都中醫(yī)藥大學，四川 成都610075;2．成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，四川成都610072)

阿爾茨海默病(AD)是多發(fā)生于中老年病人中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性改變的一種變性疾病，是癡呆最常見的病因，以進行性智能減退、記憶障礙、認知障礙為主要特征［1］。目前尚沒有有效的治療方法，為此，深入探討阿爾茨海默病的發(fā)病機制，來研制有效的防治措施，已經(jīng)是一項迫切需要解決的重大課題。由于本病嚴重影響患者的認知功能以及記憶功能，使得很多患者生活不能自理，給家庭及社會造成很大負擔，因而尋求對于阿爾茨海默病的有效治療已經(jīng)成為世界醫(yī)學界的研究熱點之一。針灸治療“癡呆”也有上千年歷史，筆者采用電針百會、涌泉來評價電針對于阿爾茨海默病大鼠空間記憶能力的影響，以便研究一種治療阿爾茨海默病的有效方案。

1 材料和方法

1．1 實驗動物及材料

自然衰老的 SD大鼠86只，20～24月齡，質(zhì)量400～500 g;青年SD大鼠10只，4～6月齡，質(zhì)量140～200 g，雌雄不計，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供。實驗材料:華佗牌針灸針(蘇藥管械準字2001第2140033號)、G6805－1型電針儀(青島鑫升實業(yè)有限公司)、Morris水迷宮(成都泰盟科技有限公司)。

1．2 動物篩選及分組

以4～6個月青年鼠作為對照。以青年鼠組大鼠平均逃避潛伏期均數(shù)+2倍標準差值為下限，+1倍標準差值為上限，將老年大鼠分為2組。平均逃避潛伏期大于均數(shù)+2倍標準差的為老化癡呆AD組;小于均數(shù)+1倍標準差的為正常老年鼠。潛伏期介于上下限之間的老年鼠剔除。潛伏期參照文獻［2］，篩選標準參照文獻［3］。篩選出的正常老年鼠為正常老年組;篩選出的老化癡呆AD鼠隨機分為:模型組、電針組，每組各12只。

1．3 治療方法及療程

電針組:用自制的固定器固定各組老化癡呆AD大鼠。選取“涌泉”、“百會”(“涌泉”直刺2～3 mm;“百會”斜刺3～5 mm，)，“涌泉”穴雙側(cè)交替進針。進針后，穴位均不進行手法刺激，直接連接G6805電針儀進行治療，頻率2～100 Hz，施以疏密波，電壓2～4 V，強度緩慢加大至大鼠下肢抖動為度，留針時間約20 min。正常老年組和模型組:大鼠不施針，每天以同樣的方式、同樣的時間和程度進行抓取、固定。治療療程:每日1次，7天為一療程，療程間隔1天進行下一療程，共3個療程，計21天。

1．4 檢測方法

待大鼠治療療程結(jié)束后，用Morris水迷宮對其用Markowska設計出延緩的位置非匹配作業(yè)［4］進行訓練與監(jiān)測，將一“T”型隔板放入水迷宮內(nèi)，將水迷宮分割成開始部A和兩個均等的開放部B和C。于開放部B中央放一平臺，水迷宮水面高出平臺1 cm。信息游泳是每次實驗把大鼠從A部正中貼壁放入，封閉C部，從A部游到B部找到平臺所用時間為信息游泳潛伏期，待大鼠找到平臺后停留30 s，若大鼠120 s內(nèi)仍找不到平臺，則引導其找到平臺，并停留30 s后回籠休息60 s，接著進行選擇游泳。選擇游泳開放B部，C部，從A部游到C部平臺(B部平臺已撤去)所用的時間定為選擇游泳潛伏期，若大鼠游入B部，則撤掉平臺懲罰其30 s，然后打開B部，允許其重新找平臺，記錄大鼠找到C部平臺所用時間加上懲罰前所用時間為選擇游泳潛伏期。若大鼠120 s內(nèi)仍找不到平臺，則時間記錄為120 s，并尋找平臺失敗。適應性訓練3天，每天每只大鼠訓練9次［5］。第4天測試，每只大鼠信息游泳時間與選擇游泳時間取9次測值的平均值，直接找到C部平臺的次數(shù)與總游泳次數(shù)之比為選擇游泳正確率。

1．5 統(tǒng)計學方法

實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17．0統(tǒng)計軟件包統(tǒng)計分析。實驗統(tǒng)計計量數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(±s)表示，各組間比較采用單因素方差分析處理。

2 結(jié)果

模型組在療程中期因捆綁致死1只，故剩11只。電針組與模型組比較，大鼠信息游泳時間及選擇游泳時間都有明顯減少，如表1所示:電針組信息游泳時間(22．94 ±4．36)s與正常老年組(19．22 ±4．36)s相比有差異(P＜0．05)，而與模型組(27．66 ±3．50)s相比，其信息游泳時間有明顯縮短(P＜0．05)。電針組選擇游泳時間(26．90 ±3．39)s，與正常老年組(21.66±3．20)s相比有差異(P＜0．05)，而與模型組(30.54±3.35)s相比，其選擇游泳時間也有縮短(P＜0．05)。結(jié)果提示，電針刺激可改善老年癡呆大鼠的空間記憶能力。

表1 各組治療后信息游泳時間及選擇游泳時間(±s)

表1 各組治療后信息游泳時間及選擇游泳時間(±s)

注:與正常老年組相比，*P ＜0．05;與模型組相比，△P ＜0．05。

組別 n 信息游泳時間(單位:s)選擇游泳時間(單位:s)正常老年組12 19．22 ±4．36 21．66 ±3．20模型組 11 27．66 ±3．50* 30．54 ±3．35*電針組 12 22．94±4．05＊△ 26．90±3．39＊△

3 討論

涌泉穴，足少陰腎經(jīng)之井穴，其名源于《靈樞·本輸》篇:“腎出于涌泉，涌泉者，足心也，為井木”。歸屬腎經(jīng)，腎經(jīng)為生命之根，先天之本，針刺涌泉穴具有醒腦開竅、充養(yǎng)腦髓的作用。百會穴位于腦部巔頂處，為百脈所會，內(nèi)應于腦，《會元針灸學》載:“百會者，五臟六腑奇經(jīng)三陽百脈之所會，故名百會”?！饵S帝明堂灸經(jīng)》記載百會主治“……忘前失后，心神恍惚”［6］，故百會為調(diào)節(jié)大腦功能的要穴。而涌泉配百會在竇漢卿《標幽賦》中記載為天地人“三才穴”天穴與地穴，天穴配地穴共同起到調(diào)整升降、協(xié)調(diào)全身陰陽的功用。中醫(yī)關于治療“癡呆”歷史悠久，多認為本病腎虛髓虧，腦脈失養(yǎng)，神機失用。其病位在腦，而腎通于腦，腎藏精，主骨生髓，腎虛則髓海不充、清竅失靈，所以“癡呆”其病位在腦，而根本在腎［7］。

現(xiàn)代醫(yī)學認為阿爾茨海默病以進行性智能減退、記憶障礙、認知障礙為主要特征，本試驗就是應用Morris水迷宮對AD大鼠進行空間記憶的訓練，來測評電針對于AD大鼠學習記憶能力的影響。Morris水迷宮是英國心理學家Morris 20世紀80年代設計的用于研究學習記憶的，是研究AD大鼠空間記憶功能的較可靠的方法。試驗結(jié)果顯示電針治療3個療程后電針組AD大鼠信息游泳時間與模型組相比有明顯縮短(P＜0．05)，電針組選擇游泳時間與模型組也有明顯縮短(P＜0．05)。兩組數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計學意義。本試驗結(jié)果還顯示電針組額葉單胺遞質(zhì)含量比模型組含量明顯增加，并且本試驗另一個方面AD大鼠的覺醒時間和直立次數(shù)電針組也明顯多于模型組，而單胺遞質(zhì)含量與睡眠覺醒機制也有密切關系［8］，所以推測，電針涌泉、百會增強單胺遞質(zhì)功能，促進神經(jīng)干細胞分化，從而抑制神經(jīng)細胞凋亡等途徑改善AD大鼠學習記憶功能。但不排除還有其他因素也參與AD大鼠空間學習記憶功能的調(diào)節(jié)。

目前醫(yī)學界對于阿爾茨海默病的治療尚未有有效的治療方案，但有大量研究與文獻報道［9～12］，針灸治療阿爾茨海默病的療效確切而肯定，具有極高的使用價值與科學內(nèi)涵，其具體作用機制學者多從神經(jīng)分子微生物學、神經(jīng)行為學以及神經(jīng)電生理學等方面闡述，有一定意義，但尚缺乏大量的臨床研究與權(quán)威的臨床報道，所以針刺改善阿爾茨海默病患者學習記憶功能的機制還需要進一步研究，以便更好的來指導臨床對于阿爾茨海默病的治療。

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