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(長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，吉林 長春 130021)

解肌退熱顆粒由柴胡、葛根、枳殼、甘草等14味中藥組成，具有發(fā)表解肌，解毒退熱的功效。本文旨在建立解肌退熱顆粒的質(zhì)量標準。實驗表明該方法操作簡單、穩(wěn)定、專屬性和重現(xiàn)性強，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試藥

儀器：Agilent 1100高效液相色譜儀，島津2550UV紫外分光光度計。試藥：柴胡對照藥材、柚皮苷對照品購于中國藥品生物制品檢定所(批號為120992-201007、0722-201007)；解肌退熱顆粒由本院制劑室制備(批號為20110101、20110102、20110103)；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 薄層鑒別 取本品20 g，研細，置錐形瓶中，加甲醇70 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次20 mL，棄去乙醚液，再用乙酸乙酯提取3次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010版一部附錄ⅥB)[1]試驗，吸取供試品溶液2 μL、對照品溶液4 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液[1]，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Shim-pack(島津)C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；乙腈-2.5%醋酸水(32∶68)為流動相；檢測波長為254 nm。流速：1 mL/min；柱溫：25 ℃；理論板數(shù)按甘草酸峰計算不低于3 000。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取甘草酸單銨鹽對照品適量，加70 %乙醇制成每1 mL含0.0625 mg的溶液(每1 mL相當于甘草酸0.06119 mg)。

2.2.3 供試品溶液的制備 取本品，研細，取1.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70 %乙醇50 mL，稱定重量，超聲提取30 min(功率250 W，頻率20 KHZ)，放冷，稱定重量，用70%乙醇補足減失重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 陰性樣品溶液的制備 按供試品溶液制備時的取樣量，折算成除甘草外，處方中其余藥材的取樣量，按制備工藝制成陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液，即得。

2.2.5 線性關系的考察 分別吸取對照品溶液4、8、12、16、20 μL,按上述色譜條件測定，以峰面積為縱坐標，甘草酸單銨鹽含量為橫坐標繪制標準曲線，回歸方程為Y=655 953.41X-139.71,r=0.999 99,表明在0.244 76～1.223 8 μg范圍內(nèi)線性關系良好。

2.2.6 精密度試驗 精密吸取對照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，連續(xù)6次，依法測定，計算其相對標準偏差，RSD=1.12%(n=6),表明方法精密度良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，室溫放置，在0、2、4、6、10 h分別進樣10 μL，于0、2、4、6、10 h連續(xù)測定5次，計算其相對標準差，RSD=0.82%(n=5)，表明在10 h內(nèi)供試品穩(wěn)定性良好。

2.2.8 回收率試驗 精密稱取已知甘草酸含量的樣品6 WV，分別精密加入甘草酸濃度為0.800 4 mg/mL的對照品溶液2 mL，按供試品溶液的制備方法制備所需溶液，測定，外標法計算，測得平均回收率為98.72%，RSD=0.94 %(n=6)。

3 結論

本文建立的薄層色譜法能夠有效檢出樣品中的枳殼、柴胡，可以作為該藥品的專屬性試驗；建立的高效液相色譜法準確、合理，可靠，可用于解肌退熱顆粒中甘草酸的含量測定。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].北京:化學工業(yè)出版社,2010:230.