翟晚?xiàng)?張春水，高利生

（中國(guó)人民公安大學(xué)刑事科學(xué)技術(shù)系，北京 100038） （公安部物證鑒定中心，北京 100038）

公安辦案中鴉片的前處理方法研究*

翟晚?xiàng)?張春水，高利生

（中國(guó)人民公安大學(xué)刑事科學(xué)技術(shù)系，北京 100038） （公安部物證鑒定中心，北京 100038）

確定適合公安辦案的鴉片樣品前處理的首選方法，為鴉片類收繳毒品的提取、檢測(cè)提供參考。分別采用不同前處理方法提取鴉片中嗎啡組分，采用高效液相色譜法檢測(cè)，依據(jù)經(jīng)濟(jì)成本、提取效率、回收率等多種因素選定前處理方法，并對(duì)該方法進(jìn)行優(yōu)化。公安辦案中對(duì)于鴉片的前處理方法首選水溶解法，固相萃取法可以作為水溶解法的補(bǔ)充。采用優(yōu)化后的水溶–固相萃取方法，國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱可以得到98.7%的回收率。進(jìn)口固相萃取小柱的萃取效率略優(yōu)于國(guó)產(chǎn)柱，而國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱也能夠滿足檢測(cè)要求。

前處理；鴉片；嗎啡；固相萃取

鴉片的主要有效成分為嗎啡，是公安機(jī)關(guān)重點(diǎn)監(jiān)控和打擊的毒品之一。對(duì)于鴉片樣品的前處理，目前常用的方法有直接溶解法、液液萃取法［1］、固相萃取法［2–5］、超臨界流體萃取法［6］等。為更好地服務(wù)于辦案工作，筆者考察、比較了前3種方法，并確定了公安辦案中的首選方法。超臨界流體萃取法由于步驟繁瑣、儀器昂貴故未作考察。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

液相色譜儀：Prominence UFLC型，日本島津公司；

固相萃取小柱：C18型（天津富集科技有限公司），Sep-Pak Vac型（美國(guó)waters公司）；

純水儀：Synergy UV型，美國(guó)Millipore公司；

鹽酸嗎啡標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品：純度99%，中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所；

乙腈、甲醇、庚烷磺酸鈉：色譜純，美國(guó)Fisher Scienti fi c公司；

磷酸二氫鉀：分析純，中國(guó)西隴化工股份有限公司；

甲醇、氯仿：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；

蒸餾水：屈臣氏蒸餾水（用于前處理過(guò)程）；

去離子水：屈臣氏蒸餾水再經(jīng)Millipore公司Synergy UV型純水系統(tǒng)制備（配制液相色譜流動(dòng)相）。

1.2 對(duì)照品儲(chǔ)備溶液的制備

精密稱取鹽酸嗎啡標(biāo)準(zhǔn)品10.00 mg，加入甲醇定容至10 mL，制成含鹽酸嗎啡1.00 mg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。

1.3 供試品溶液的制備

稱取若干份鴉片煙膏，每份約10 mg，分別加入10 mL溶劑溶解，超聲15 min，離心后取上清液，供固相萃取實(shí)驗(yàn)使用或直接使用高效液相色譜分析。

1.4 色譜條件

色譜柱：Inertsil ODS–SP(150 mm×4.6 mm，5 μm，日本島津公司)；流動(dòng)相：0.05 mol/L磷酸二氫鉀、0.002 5 mol/L庚烷磺酸鈉水溶液–乙腈；流動(dòng)相梯度程序：以6%有機(jī)相（乙腈）為初始濃度，即0.05 mol/L磷酸二氫鉀、0.002 5 mol/L庚烷磺酸鈉水溶液–乙腈（體積比為94∶6），以每分鐘2%升至26%，然后以每分鐘9%升至35%，保持10 min。流速1 mL/min；柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 溶解和液液萃取方法的選擇

在毒品的定量分析中，最大程度地將毒品組分從固體中轉(zhuǎn)移到液體中是保障定量結(jié)果符合真實(shí)值的前提，分別比較了水溶解法、甲醇溶解法、反提法、磷酸緩沖液提取、不同pH值的鹽酸水溶液提?。╬H 3.1～7.4，20個(gè)點(diǎn)）等方法。按不同方法提取，液相色譜分析并將稱取樣本的質(zhì)量歸一化，結(jié)果如表1所示。

表1 不同提取方法的提取結(jié)果

實(shí)驗(yàn)表明，甲醇對(duì)嗎啡的溶解能力略高于水，同時(shí)明顯好于反提法；pH值對(duì)水提取法的效果影響小且在pH 3.2～7.7范圍內(nèi)無(wú)顯著規(guī)律。甲醇溶解法溶解的雜質(zhì)較多，而水溶法提取效率與甲醇溶解法差距不大。此外，考慮到固相萃取常用的C18萃取小柱主要是通過(guò)目標(biāo)物與吸附劑之間的疏水作用力實(shí)現(xiàn)吸附，若溶解時(shí)選用甲醇，嗎啡很難被C18固相萃取小柱保留，而溶解時(shí)選用水則可以直接用固相萃取法，無(wú)需反提。綜合考慮以上因素，將水溶解法確定為樣品前處理的基本方法。

2.2 固相萃取方法的確定

考慮到鴉片樣本的復(fù)雜性，即辦案中繳獲的樣本可能含有很多未知雜質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和優(yōu)化了固相萃取方法。

2.2.1 固相萃取小柱活化方法

實(shí)驗(yàn)采用兩種活化試劑依次對(duì)固相萃取小柱進(jìn)行活化［7］。試劑I：甲醇–水（體積比為3∶1），活化試劑II：水。對(duì)試劑I的用量進(jìn)行考查，當(dāng)用量分別為3，5，7，10 mL時(shí)，回收率分別為78.2%，94.4%，98.2%，98.3%（回收率計(jì)算結(jié)果由固相萃取的嗎啡組分峰面積除以同體積水溶液直接溶解同質(zhì)量鴉片樣品的嗎啡組分峰面積得到）?？梢?jiàn)，試劑用量達(dá)到7 mL時(shí)已經(jīng)足夠。對(duì)于活化試劑II水的用量，由于活化后需用氨水潤(rùn)洗，其用量對(duì)實(shí)驗(yàn)效果影響不明顯，按經(jīng)驗(yàn)值選擇3 mL。

2.2.2 堿化上樣方法

由于鴉片膏中的嗎啡多以嗎啡堿或鹽的形式存在，因此在上樣前需用氨水潤(rùn)洗小柱并在上樣時(shí)將樣品調(diào)至堿性，以使其以堿的形式與C18填料充分結(jié)合并且不易被淋洗液洗脫。對(duì)于氨水體積分?jǐn)?shù)的選擇，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)取0～1%間的6個(gè)點(diǎn)，分別以2 mL潤(rùn)洗小柱，上樣液為2 mL樣品加0.5 mL相應(yīng)體積分?jǐn)?shù)的氨水，結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，只需要少量氨水即可獲得大于99%的高回收率。

圖1 氨水體積分?jǐn)?shù)對(duì)固相萃取回收率的影響

2.2.3 淋洗與洗脫方法

實(shí)驗(yàn)分別考察了以3，5，7，9，11 mL水作為淋洗劑的效果，從譜圖來(lái)看，雜質(zhì)峰數(shù)量和面積無(wú)顯著差異。對(duì)于洗脫液，分別考察了氯仿和含10%甲醇的5%乙酸的洗脫效果［7］，后者優(yōu)于前者，且減少了揮干復(fù)溶的步驟，更加簡(jiǎn)便。分別以3，4，5，6 mL含10%甲醇的5%乙酸潤(rùn)洗小柱，實(shí)驗(yàn)表明以3 mL潤(rùn)洗時(shí)回收率已超過(guò)98%，為了保險(xiǎn)，選擇5 mL作為洗脫液體積。

2.2.4 前處理方法的確定及回收率考察

實(shí)驗(yàn)比較了水溶解法與SPE固相萃取法的提取效率，多次測(cè)量得到固相萃取方法回收率平均值為98.7%（n=10），能夠滿足檢測(cè)要求，并且減少了雜質(zhì)。因此，在雜質(zhì)較多、有效成分較少、水溶解法不能滿足要求時(shí)，固相萃取法可以作為水溶解法的補(bǔ)充方法。最終確定固相萃取方法為：選用甲醇–水（體積比為3∶1）的混合液7 mL、水3 mL活化小柱，2 mL 0.1%氨水沖洗小柱，上樣2 mL并在樣品溶液中加入0.1%氨水1～2滴，7 mL水淋洗，5 mL含10%甲醇的5%乙酸洗脫。

實(shí)驗(yàn)中還將國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口萃取小柱的萃取效果進(jìn)行了比較。分別取國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱6支、進(jìn)口固相萃取小柱6支，按1.3方法配制成供試品溶液。采用上文所述的固相萃取方法，測(cè)得國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱回收率為98.5%、進(jìn)口固相萃取小柱回收率為99.9%。由此可見(jiàn)，進(jìn)口固相萃取小柱略優(yōu)于國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱，而國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱已經(jīng)可以滿足實(shí)驗(yàn)需要，各實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自身情況選擇不同的固相萃取小柱。

3 結(jié)語(yǔ)

司法辦案中對(duì)于鴉片（煙膏）的前處理方法首選水溶解法，固相萃取法可以作為水溶解法的補(bǔ)充。使用國(guó)產(chǎn)固相萃取小柱可以得到98.7%的回收率，能夠滿足要求，進(jìn)口固相萃取小柱略優(yōu)于國(guó)產(chǎn)柱。

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Study on Pre-Treatment Methods of Opium in Handling Cases

Zhai Wanfeng
（Department of Forensic Science， Chinese People’s Public Security University， Beijing 100038， China）
Zhang Chunshui， Gao Lisheng
（Institute of Forensic Science Ministry of Public Security P.R.C.， Beijing 100038， China）

The preferred method of morphine determination in handling cases concerning opium was determined，which can be helpful to the extration and analysis of opium in the practice of handling cases. Morphine was extracted by different pre-treatment methods from opium，and analyzed by high performance liquid chromatography. Considering the cost，extraction ef fi ciency，recovery and other factors，the preferred method was determined and optimized. The preferred method of morphine determination in handling cases was water-dissolving，and then the optimized SPE method was an assisted one. Using domestic solid-phase extraction(SPE) columns and the optimized water-dissolving-SPE mothod，the recovery reached 98.7%. The ef fi ciency of imported SPE columns was slightly higher than domestic one，which was also able to meet the testing needs.

pre-treatment; opium; morphine; solid-phase extraction

O657.7+2

A

1008–6145(2012)03–0028–03

10.3969/j.issn.1008–6145.2012.03.008

*公安部重點(diǎn)研究計(jì)劃支持項(xiàng)目（2009ZDYJGAES024）

聯(lián)系人：翟晚?xiàng)?；E-mail: betty871211.student@sina.com

2012–01–31