王躍斌，孫 忠，王偉定，陸建學

（1.浙江海洋學院海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點實驗室，浙江舟山 316100；2.中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部東海與遠洋漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，上海 200090）

日本烏賊Sepiella japonica俗名墨斗魚、海貓，屬頭足綱、二鰓亞綱、十腕目、烏賊科、無針烏賊屬，與曼氏無針烏賊Sepiella maindroni屬同種異名，為淺海洄游性頭足類，在我國福建、浙江沿海水域廣泛分布[1-2]。其肉質(zhì)鮮美，營養(yǎng)價值高，而內(nèi)骨骼及其提取物具有止血、保健等藥用價值，曾是我國四大漁業(yè)支柱產(chǎn)業(yè)之一[3-5]。自20世紀80年代以來，由于過度捕撈、環(huán)境污染等影響，日本烏賊的產(chǎn)量急劇下降，至今已近衰竭。為振興海洋經(jīng)濟，保護物種，進行日本烏賊人工繁育技術(shù)的研究已迫在眉睫。目前，國內(nèi)外學者就日本烏賊的資源調(diào)查、生態(tài)習性、養(yǎng)殖繁育、營養(yǎng)分析等方面進行了研究[6-14]，但有關(guān)日本烏賊幼苗的開口餌料和幼體餌料的研究報道卻較少[15]，其中以蒙古裸腹溞為開口餌料更是鮮有報道。本文分別以烏賊初孵幼體和不同規(guī)格烏賊幼體為研究對象，以豐年蟲無節(jié)幼體、橈足類和蒙古裸腹溞及其不同組合為開口餌料，比較研究其對日本烏賊初孵幼體生長成活的影響；以糠蝦、冰鮮小鯧魚、配合飼料為餌料分別投喂兩種不同規(guī)格的日本烏賊幼體的效果，以期為人工繁育的餌料選擇提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

日本烏賊親體為海捕自然親體，經(jīng)室內(nèi)人工培育獲得受精卵。試驗的幼體為同一對烏賊產(chǎn)卵，經(jīng)孵化出膜后培育1～2 d的初孵幼體，平均胴長為3.28±0.5 mm（n=20），數(shù)量300只，用于開口餌料試驗。餌料試驗所用日本烏賊幼體由人工育苗獲得。挑選2種規(guī)格的烏賊幼體作為試驗幼體，小規(guī)格烏賊幼體胴長為9.7±0.3 mm（n=20），數(shù)量 300 只；大規(guī)格烏賊幼體胴長為 30.1±0.5 mm（n=20），數(shù)量 300 只。所用烏賊均為同一批孵化出膜幼體。

烏賊培育和生物餌料培養(yǎng)用水均為沙濾自然海水，鹽度 21～28，pH 8.00～8.10，水溫 27.5～31.4 ℃。試驗容器為40 cm×40 cm×20 cm的泡沫箱，容積約為30 L。餌料試驗于2009年7-8月在浙江省海水增養(yǎng)殖重點實驗室基地進行。養(yǎng)殖用水為經(jīng)過沙濾的天然海水，鹽度為26～28，水溫為26～29℃。試驗容器為1 000 L容積的聚乙烯塑料水槽。

橈足類采捕自基地的海水圍塘，并用40目和80目篩網(wǎng)分級過濾，體長為0.82～0.91 mm；豐年蟲無節(jié)幼體為市售鹵蟲卵孵化所得，體長為 0.30～0.35 mm；蒙古裸腹溞為人工培養(yǎng)，體長為 1.0～1.2 mm。將所獲的3種生物餌料分別暫養(yǎng)于培養(yǎng)桶中，用小球藻強化培養(yǎng)6～12 h后待用。糠蝦采自基地的海水養(yǎng)殖池塘，體長為5～8 mm；取新鮮冰凍小鯧魚魚肉，剪成長約1 cm、直徑約4～6 mm的肉條備用；配合飼料由寧波天邦股份有限公司提供的魚用顆粒飼料，粒徑2～3 mm，緩沉性，粗蛋白質(zhì)含量48%，粗脂肪含量12%，粗纖維5%，粗灰分18%。

1.2 試驗方法

開口餌料試驗共分5組，分別為豐年蟲無節(jié)幼體組、橈足類+豐年蟲無節(jié)幼體組、蒙古裸腹溞組、蒙古裸腹溞+豐年蟲無節(jié)幼體組和蒙古裸腹溞+橈足類組，每組各設(shè)3個重復，共15只泡沫箱。試驗周期為14 d。試驗開始前從暫養(yǎng)幼體中每次隨機取15只，稱重，隨機置于1個泡沫箱，并加1只氣石，連續(xù)24 h充氣。初孵幼體初始平均體重為18.00±1.5 mg。試驗期間每天投餌1次，投餌量視當日攝食和殘餌情況適當調(diào)整。日換水1次，換水量為1/2，并及時清理培養(yǎng)容器內(nèi)的死亡個體。每日測量水溫、鹽度、pH，檢查各組烏賊的活動、攝食等情況。實驗結(jié)束后，將每個試驗水槽的烏賊幼體群體稱重，測量烏賊個體胴長，并計算成活率、增長率和增重率。

餌料試驗選用大小2種規(guī)格的烏賊幼體，每種規(guī)格的幼體設(shè)3組，分別投喂糠蝦、魚肉、配合飼料，每組設(shè)2個重復，共用12個試驗水槽。每個水槽飼養(yǎng)50只烏賊幼體。試驗周期為15 d。試驗開始前先停食24 h，隨后從同種規(guī)格幼體中每次隨機取100只，稱重，隨機置于1個水槽內(nèi)，大規(guī)格幼體平均體重為3.0±0.1 g，小規(guī)格幼體平均體重為 0.29±0.03 g。試驗期間每天分 5 次（05:00、08:00、11:00、14:00 和 17:00）投喂試驗幼體，根據(jù)當日攝食情況調(diào)整日投喂量。投喂結(jié)束30 min后，清理殘餌和糞便。每天換水2次（07:00和16:00），每次換水量為90%。試驗期間每天測量水溫，每周測量溶氧（試驗期間為6.1～8.2 mg/L），及時清理水槽內(nèi)的死亡個體。試驗結(jié)束前停食24 h，每個試驗水槽的烏賊幼體群體稱重，并從中隨機抽取10只測量胴長，若水槽中存活幼體不足10只，則全部取樣測量胴長。

2 結(jié)果與分析

2.1 開口餌料

開口餌料的試驗結(jié)果匯總于圖1和表1。由圖1可見，不同餌料組日本烏賊初孵的成活率從高到低依次為，裸腹溞+橈足類組＞裸腹溞組＞裸腹溞+豐年蟲組＞橈足類+豐年蟲組＞豐年蟲組。豐年蟲無節(jié)幼體組的初孵幼體全部死亡；裸腹溞+橈足類組成活率顯著高于其他組（P＜0.05），而其余3組成活率的組間差異不顯著（P＜0.05）。

由表1可見，裸腹溞+橈足類組的增長率顯著高于其它3 組（P＜0.05），而橈足類+豐年蟲組的增長率則顯著低于其它3組（P＜0.05）。裸腹溞組和裸腹溞+豐年蟲組間的增長率無顯著差異（P＜0.05）。各餌料組間的增重率沒有顯著性差異（P＜0.05），從高到低依次為裸腹溞+橈足類＞裸腹溞+豐年蟲＞裸腹溞＞橈足類+豐年蟲。

圖1 不同餌料組烏賊幼體的成活率（%）Fig.1 Survival rate of Sepiella japonica larvae in different diets（%）

表1 不同開口餌料對烏賊幼體生長的影響Tab.1 Effect of different diets on the growth performance of Sepiella japonica larvae

2.2 餌料試驗

餌料試驗結(jié)果匯總于圖2～4。從圖2可見，糠蝦組的烏賊幼體存活率最高（54%～82%），其次為鯧魚肉組（18%～40%），配合飼料組的烏賊幼體存活率最低（6%～10%）。不同規(guī)格烏賊幼體的存活率也不同，在同一餌料組中，大規(guī)格幼體存活率均高于小規(guī)格幼體。

從圖3可見，同一餌料組中，小規(guī)格烏賊幼體增重率均高于大規(guī)格烏賊幼體。對于小規(guī)格烏賊幼體，鯧魚肉組的增重率最高（1 306%），其次為糠蝦組（1 130%），增重率最低的為配合飼料組（984%）；對于大規(guī)格烏賊幼體，增重率最高的為糠蝦組（301%），鯧魚肉組和配合飼料組的增重率則依次降低，分別為201%和107%。

從圖4可見，不同規(guī)格的烏賊幼體，其平均旬生長也不同。在同一餌料組中，小規(guī)格賊幼體的平均旬生長均高于大規(guī)格幼體。小規(guī)格幼體的平均旬生長由高到低排列為鯧魚肉組＞糠蝦組＞配合飼料組，分別為 14.7 mm、13.8 mm、11.1 mm；大規(guī)格幼體的平均旬生長由高到低排列為糠蝦組＞鯧魚肉組＞配合飼料組，分別為 11.0 mm、7.8 mm、3.5 mm。

圖2 烏賊幼體的存活率（%）Fig.2 Survival rate of S.japonica larvae（%）

圖3 烏賊幼體的增重率（%）Fig.3 Weight gain rate of S.japonica larvae（%）

圖4 烏賊幼體的平均旬生長（mm）Fig.4 Mantle length every ten days of S.japonica larvae（mm）

3 討論

餌料是機體維持生命的營養(yǎng)來源，也是物種人工繁育中最重要的環(huán)節(jié)。餌料的選擇通常從三個方面來綜合考慮：一是可食性，選擇的餌料必須是機體能夠攝取的，就烏賊初孵幼體而言，通常選擇適口的浮游動物為開口餌料。二是營養(yǎng)的均衡性，不同的餌料其營養(yǎng)成份的組成不同，這些營養(yǎng)成份是否能完全滿足生物的生長、發(fā)育所需。三是獲得的便利性，一種營養(yǎng)全面的餌料，但在培養(yǎng)或獲取非常困難時，在生產(chǎn)上往往也難以應用。

3.1 不同開口餌料對初孵烏賊幼體的影響

從本試驗的結(jié)果可知，對于日本烏賊而言，蒙古裸腹溞、橈足類和豐年蟲無節(jié)幼體3種生物餌料的飼養(yǎng)效果是依次遞減的，而蒙古裸腹溞與其他兩種生物餌料混合投喂效果均優(yōu)于單獨投喂蒙古裸腹溞，這可能與不同餌料間的營養(yǎng)差異有關(guān)。

有研究認為，鹵蟲無節(jié)幼體缺乏高度不飽和脂肪酸，尤其是生物生長發(fā)育所必須的DHA，大量投喂鹵蟲無節(jié)幼體會影響生物的成活率，而且分離鹵蟲卵卵殼、死卵的工作量大，分離不徹底也會影響攝食和成活[16]。本試驗期間，投喂的豐年蟲幼體僅用藻類強化，結(jié)果單獨投喂日本烏賊大量死亡，這一結(jié)果與之前學者的結(jié)論相一致。在育苗生產(chǎn)中，豐年蟲無節(jié)幼體不宜單獨長時間使用，而應與輪蟲、橈足類等餌料搭配使用，而且投喂前應進行營養(yǎng)強化，以增加其DHA含量。

蒙古裸腹溞和橈足類適宜作為烏賊幼體的開口餌料，但在存活率上仍然較低。這與試驗后期水溫高、培養(yǎng)水體小、環(huán)境因子變化幅度大等有關(guān)。在培養(yǎng)殖過程中，如何控制環(huán)境因子變化，控制投喂量，防止水質(zhì)惡化，以提高培養(yǎng)成活率，這將是日本烏賊生產(chǎn)性育苗今后研究的重點。

3.2 餌料對不同規(guī)格烏賊幼體的影響

由于日本烏賊性喜活餌，在其生產(chǎn)中大多使用鮮活餌料或冰鮮雜魚飼養(yǎng)，但這2種餌料均有儲運不便、養(yǎng)殖污染嚴重、成本較高等諸多弊端。因此，開發(fā)高效廉價的配合飼料是實現(xiàn)日本烏賊大規(guī)模集約化養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)。從本試驗的結(jié)果可知，配合飼料組的烏賊生長及存活率均為最低。李正等[15]研究指出，非烏賊專用配合飼料營養(yǎng)不足且不均衡，不能滿足烏賊生長發(fā)育，甚至可能含有過量抑制烏賊生長發(fā)育的物質(zhì)；喜食活餌的攝食天性，使得烏賊攝食配合飼料的馴化時間多于一般水產(chǎn)物種。除此之外，本文每個水槽的烏賊飼養(yǎng)數(shù)量為50只，密度相對較大，在長時間的饑餓狀態(tài)下，可能會加劇烏賊相殘的狀況。這些因素可能是配合飼料飼養(yǎng)烏賊效果欠佳的主要原因。

生物在不同生長階段，其最適餌料的種類也不盡相同。從本試驗的結(jié)果可知，對于胴長約為1 cm的烏賊幼體，糠蝦組的存活率最高，而小鯧魚肉組的生長最好；對于胴長約3 cm的烏賊幼體，糠蝦組的生長及存活率都是最高的。無論投喂哪種餌料，大規(guī)格烏賊幼體的存活率均高于小規(guī)格烏賊幼體，而生長速度則相反，小規(guī)格烏賊幼體的生長要快于大規(guī)格烏賊幼體。一般情況下，選擇餌料的首要問題是其可食性，適口性欠佳的餌料即使營養(yǎng)豐富均衡，也難以被攝食利用。對于胴長約為1 cm的烏賊幼體，野生鮮活糠蝦的適口性最佳，且營養(yǎng)豐富，故其存活率最高，生長效果也較好。冰鮮小鯧魚肉的適口性與糠蝦相比較差，故其存活率低于糠蝦組，但其生長效果卻好于糠蝦。這可能是由于冰鮮小鯧魚肉的蛋白含量較高，其蛋白轉(zhuǎn)化效率可能高于糠蝦，而由于適口性較差導致的饑餓使得烏賊間的產(chǎn)生相殘情況，加劇個體大小分化，出現(xiàn)了存活率相對較低但生長相對較好的狀況。對于胴長約為3 cm的烏賊幼體，糠蝦的飼養(yǎng)效果最好，這符合烏賊喜食活餌的攝食天性。一般來說，隨著年齡的增長和體重的增加，生物對于各種不良因素的耐受性也逐漸增強，這與本試驗結(jié)果相同，不論投喂何種餌料，大規(guī)格烏賊幼體的存活率均高于小規(guī)格烏賊幼體。

為保證飼養(yǎng)效果，在生產(chǎn)中應注意不同階段的餌料選擇。根據(jù)本試驗結(jié)果，胴長約為1 cm的日本烏賊，較為適宜的餌料是糠蝦。當烏賊幼體胴長超過3 cm時，可逐漸添加冰鮮魚肉進行過渡，以便同時兼顧存活率和生長效果。

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