成 宇 (浙江湖州市中心醫(yī)院 313000)

為了識(shí)別尿沉渣中的有形成分形態(tài)，臨床上已有不少的染色方法，大多為活體染色，對(duì)干片染色的研究較少?；铙w染色的缺點(diǎn)是不能在油鏡下觀察，而干片染色通過加予尿沉渣等量的健康人血清，可使細(xì)胞的形態(tài)保持完整，清晰可辨，尤其是紅細(xì)胞的形態(tài)變化在油鏡下更好辨認(rèn)。劉氏快速染液A、B液在臨床上應(yīng)用非常廣泛，主要對(duì)全血細(xì)胞染色進(jìn)行形態(tài)分類，優(yōu)點(diǎn)是操作快速，效果優(yōu)于瑞氏染液，清晰可辨。本文探討劉氏尿沉渣染色與UF-1000i尿有形成分分析儀診斷腎小球與非腎小球性血尿的敏感性及特異性比較，報(bào)道如下：

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選擇2010年6月至2011年1月本院115例住院患者的血尿標(biāo)本。其中經(jīng)腎活檢確診為腎小球性疾病52例，包括慢性腎炎17例(32.7%)，腎病綜合征15例(28.8%)，紫癜性腎炎8例(15.4%)，急性腎炎、狼瘡性腎炎各6例(各11.5%)；經(jīng)B超、靜脈腎盂造影、膀胱鏡和CT等檢查確診為非腎小球性疾病63例，包括尿路感染40例(63.5%)，輸尿管結(jié)石15例(23.8%)，腎結(jié)石8例(12.7%)。

1.2 儀器與試劑 UF-1000i尿有形成分分析儀及配套試劑、質(zhì)控液為日本Sysmex公司產(chǎn)品。劉氏染色液A、B液由珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3 方法 標(biāo)本留?。河靡淮涡阅虮杖』颊咝迈r清潔的中段尿，分裝于兩試管內(nèi)，每試管10ml尿液。一管用UF-1000i尿有形成分分析儀中檢測(cè)，另一管經(jīng)劉氏染色在油鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞各形態(tài)比例。尿液標(biāo)本收集后在2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完成。

1.3.1 UF-1000i尿有形成分分析儀檢測(cè) 儀器檢測(cè)前用進(jìn)口配套質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)量控制，質(zhì)控結(jié)果在控后再進(jìn)行檢測(cè)。記錄尿70%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(RBCP70Fsc)、尿紅細(xì)胞前向散射光分布寬度(RBC-Fsc-DW)。

1.3.2 尿沉渣染色在油鏡下計(jì)數(shù)分類 將10ml尿液在離心機(jī)中以離心力400g離心5分鐘，留取尿沉渣0.2ml，加0.2ml健康人血清，混勻。取混勻的沉渣懸液1小滴涂片，沉渣中有形成分較多時(shí)推薄片，反之推厚片。自然干燥后，按血涂片的方法進(jìn)行劉氏快速染液A、B的染色，1分鐘后沖掉染液、晾干，在油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)紅細(xì)胞，進(jìn)行形態(tài)分類。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)參考標(biāo)準(zhǔn)，UF-1000i將紅細(xì)胞分為3種情況。①非均一性紅細(xì)胞:RBC-P70Fsc＜70ch且RBC-Fsc-DW＞或＜50ch即為非均一性血尿。②均一性紅細(xì)胞:RBC-P70Fsc＞100ch且RBC-Fsc-DW＜50ch即為均一性血尿[1]。③混合性:RBC-P70Fsc＞100ch且RBC-Fsc-DW＞50ch；RBC-P70Fsc為70～100ch且RBC-Fsc-DW＞或＜50ch，這兩種情況均視為混合性血尿。

尿沉渣染色后油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)紅細(xì)胞(當(dāng)紅細(xì)胞數(shù)＞8000/ml時(shí))，進(jìn)行分類判定：①外形為雙凹圓盤狀、大小正常的紅細(xì)胞＞70%，為均一性血尿；②大小不等，外形不規(guī)則，呈棘形、偽足形、面包圈樣、靶細(xì)胞形等異常紅細(xì)胞＞70%，且形態(tài)常出現(xiàn)兩種以上為非均一性血尿；③均一性與非均一性紅細(xì)胞各占50%左右為混合性血尿。混合性血尿中依據(jù)哪種紅細(xì)胞超過50%分為以均一性紅細(xì)胞為主或以非均一性紅細(xì)胞為主兩種。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)于兩種尿沉渣檢測(cè)方法的敏感性和特異性分別繪制ROC曲線，計(jì)算ROC曲線下的面積。

2 結(jié)果(表 1)

以非均一性紅細(xì)胞作為診斷腎小球性血尿的依據(jù)，腎小球性血尿中非均一性紅細(xì)胞檢出率為敏感度，非腎小球性血尿中均一性紅細(xì)胞檢出率為特異度。由表1可見，UF-1000i尿有形成分分析儀敏感度為80.8%，特異度為85.7%，計(jì)算ROC曲線下面積為0.832；劉氏尿沉渣染色法敏感度為90.4%，特異度為88.9%，其ROC曲線下面積為0.896。提示，兩種方法用于診斷血尿來源均有顯著意義。二者曲線下面積比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.2，P＞0.05)。

52例腎小球性血尿中，UF-1000i尿有形成分分析儀檢出10例混合性紅細(xì)胞，其中6例經(jīng)劉氏尿沉渣染色分類判斷為非均一性紅細(xì)胞，兩種方法總檢出率為92.3%(48/52);63例非腎小球性血尿中，UF-1000i尿有形成分分析儀檢出9例混合性紅細(xì)胞，其中4例經(jīng)劉氏尿沉渣染色分類判斷為均一性紅細(xì)胞，兩種方法總檢出率為92.1%(58/63)。

表1 UF-1000i尿有形成分分析儀與劉氏尿沉渣染色法結(jié)果比較 [例(%)]

3 討論

血尿是泌尿系統(tǒng)疾病常見的臨床表現(xiàn)，引起尿液紅細(xì)胞形態(tài)改變的主要原因?yàn)榧t細(xì)胞通過病變的腎小球?yàn)V膜時(shí)，受到物理機(jī)械損傷及紅細(xì)胞在腎小管中受不同滲透壓、pH、尿酶、尿素等化學(xué)因素的影響。均一性紅細(xì)胞血尿與腎活檢的診斷符合率達(dá)92.6%，非均一性紅細(xì)胞血尿與腎活檢的診斷符合率可達(dá)96.7%[2]。因此，在無創(chuàng)傷情況下，通過對(duì)尿液中紅細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量的檢測(cè)，可以初步判斷血尿的來源。

本文結(jié)果顯示，劉氏尿沉渣染色法的敏感性、特異性與UF-1000i尿有形成分分析儀相近，而后者是近期最新投入使用的流式尿有形成分分析儀，能對(duì)尿液中紅細(xì)胞進(jìn)行客觀分析，使分析結(jié)果快速、可靠，對(duì)血尿來源具有一定的初篩作用。但當(dāng)尿液中草酸鈣結(jié)晶、酵母樣細(xì)胞、白色念珠菌、精子及其他細(xì)菌、白細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量，會(huì)影響對(duì)紅細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)和形態(tài)的鑒別[3]。劉氏尿沉渣染色法雖然無法運(yùn)用到大批量的標(biāo)本檢測(cè)中，但相對(duì)活體染色法，不僅簡便快速，而且在油鏡下更加明顯直觀的觀察紅細(xì)胞形態(tài)，便于檢驗(yàn)員準(zhǔn)確快速分類。此外，它還可進(jìn)行白細(xì)胞的分類研究，對(duì)于臨床上診斷腎炎、腎病的類型起到重要的輔助作用。本文結(jié)果還顯示，當(dāng)UF-1000i尿有形成分分析儀結(jié)果為混合性血尿時(shí)，運(yùn)用劉氏尿沉渣染色法可進(jìn)一步進(jìn)行分類，在腎小球性血尿中檢出率為92.3%，在非腎小球性血尿中檢出率達(dá)92.1%，兩者聯(lián)合檢測(cè)可以明顯提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。

另外，紅細(xì)胞形態(tài)也受理化因素、臨床因素的影響，如在低滲尿中可見影紅細(xì)胞，在彌散性血管內(nèi)凝血及溶血性尿毒癥患者中可見破碎紅細(xì)胞等[4]。因此，在判斷腎小球性與非腎小球性血尿時(shí)，除結(jié)合以上兩種方法外，還要全面考慮尿液的pH值、尿比重及臨床癥狀等，以排除尿液理化自身的干擾。

綜上所述，劉氏尿沉渣染色法與UF-1000i有形成分分析儀鑒別血尿來源的敏感性與特異性相近，兩者聯(lián)合檢測(cè)可以提高檢驗(yàn)質(zhì)量和工作效率。在基層醫(yī)院，快速、簡便、準(zhǔn)確的劉氏尿沉渣染色法具有較高的實(shí)用價(jià)值。

[1]張倩春，李亞鵬.UF-1000i尿沉渣分析儀檢測(cè)尿中紅細(xì)胞形態(tài)的臨床意義[J].臨床醫(yī)學(xué)，2009，29(7):75-77.

[2]熊立凡，李樹仁.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2004:164.

[3]張娟安，胡友明，李冰青.UF-1000i尿液有形成分分析儀測(cè)定紅細(xì)胞的應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].中國誤診學(xué)雜志，2010，10(30):7379-7380.

[4]張?jiān)苹?，齊樹兵，張衛(wèi)云，等.尿液沉渣實(shí)錄彩色圖譜[M].濟(jì)南:山東科學(xué)技術(shù)出版社，2002:6.