路 偉，李玉珍，李 成，羅意文，王蔓琳（深圳市第四人民醫(yī)院藥劑科，廣東深圳 518033）

吸入給藥是臨床上防治支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病的首選給藥方法[1，2]，常見給藥劑型有吸入氣霧劑、吸入粉霧劑和霧化吸入劑。霧化吸入劑是將藥物的溶液、乳狀液或混懸液經(jīng)霧化器來輸送藥物、不含拋射劑的一種劑型，具有可輸送較大藥物劑量、制備處方工藝簡單、霧化器使用簡便等優(yōu)點，在臨床上得到越來越多的應(yīng)用[2]。

異丙托溴銨為阿托品的N-異丙基取代衍生物，為膽堿能受體阻滯藥，在慢性阻塞性肺疾病治療、支氣管哮喘治療上應(yīng)用廣泛。其支氣管擴張作用主要依賴局部的藥物濃度，由于口服不易從胃腸道吸收，主要通過霧化吸入給藥[3，4]。目前，市場上廣泛使用的吸入用異丙托溴銨溶液（商品名：愛全樂）由勃林格殷格翰有限公司生產(chǎn)，國內(nèi)尚未見吸入用異丙托溴銨溶液或異丙托溴銨霧化吸入液制劑的有關(guān)報道。筆者對異丙托溴銨霧化吸入液進行立項研究，設(shè)計劑量為每支2m L，每支500μg，臨床使用時，將藥液置于霧化器中，用生理鹽水稀釋至3～4m L，安裝好霧化器，按說明使用，通常情況成人每次500 μg（14歲以下兒童50～250μg），每日3～4次。本研究所制制劑與愛全樂比較，具有價低等優(yōu)點，現(xiàn)對其制備及質(zhì)量控制報道如下。

1 儀器與試藥

HP1100系列高效液相色譜（HPLC）儀，包括四元泵、二極管陣列檢測器、LC-3D化學(xué)工作站（美國Agilent公司）；AG-285電子天平（瑞士Mettler toledo公司）。

異丙托溴銨（北京雙鶴制藥廠，批號：101001，純度：＞99%，精制后為單峰并作為對照品使用）；異丙托溴銨霧化吸入液（自制，批號：20110104、20110105、20110106，規(guī)格：每支2 m L，每支500μg）；乙腈為色譜純，庚烷磺酸鈉、三乙胺、磷酸、溴化鉀為分析純，水為重蒸餾水。

2 處方與制備

2.1 處方

異丙托溴銨0.25 g，氯化鈉9.0 g，乙二胺四乙酸二鈉0.5 g，硫酸適量，矯味劑適量，水加至1 000m L。

2.2 制備

將乙二胺四乙酸二鈉、氯化鈉加入冷卻水約800m L中，攪拌使之溶解。向上述溶液中加入異丙托溴銨，攪拌使溶，加入矯味劑，攪拌使溶，用硫酸適量調(diào)節(jié)pH至3.5，補加冷卻水至1 000m L，混勻，分裝即得幾乎無色的澄明液體。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為幾乎無色的澄清液體。

3.2 鑒別

在“3.4”項下，異丙托溴銨霧化吸入液供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與異丙托溴銨對照品溶液主峰的保留時間一致。

3.3 檢查

（1）pH值：應(yīng)為3.0～5.0；（2）澄清度與顏色：取本品，應(yīng)澄清無色或幾乎無色。（3）其余：應(yīng)符合《中國藥典》2010年版二部附錄“口服溶液劑”項下有關(guān)各項檢查[5]。

3.4 含量測定

3.4.1 色譜條件。色譜柱：Hypersil ODS（250mm×4.6mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.25%庚烷磺酸鈉（含0.5%三乙胺，磷酸調(diào)pH＝3.2）＝22∶78，流速：1.0m L·min－1；柱溫：30 ℃；檢測波長：210 nm；進樣量：20μL。

3.4.2 溶液制備。精密稱取異丙托溴銨50mg，置于100m L容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為500μg·m L－1的異丙托溴銨貯備液。上述溶液置于5℃冰箱中避光保存。

精密量取貯備液5m L于10m L容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，為對照品溶液。精密量取樣品5m L于10m L容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。按處方比例稱取除異丙托溴銨以外的其他成分，按“2.2”項下方法制備空白制劑，其余按“3.4.6”項下供試品溶液制備方法進行，即得空白樣品溶液。另稱取溴化鉀9mg，置于100m L容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為90μg·m L－1的溴化鉀溶液。

取空白樣品溶液、溴化鉀溶液、對照品溶液、供試品溶液按上述色譜條件進樣分析，結(jié)果溴離子不影響本品含量測定，異丙托溴銨出峰時間約為10.4m in。色譜詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.空白樣品；B.溴化鉀；C.對照品；D.供試品；1.異丙托溴銨Fig 1 HPLC chrom atogram s A.blank sample；B.potassium bromide；C.reference substance；D.sample；1.ipratropium bromide

3.4.3 線性關(guān)系考察。分別精密量取上述異丙托溴銨貯備液1、2、3、4、5m L于10m L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為50、100、150、200、250 μg·m L－1的系列標(biāo)準(zhǔn)液。按上述色譜條件進樣分析。以濃度（c）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)進行線性回歸，計算得回歸方程為：A＝20.64c+66.90（r＝0.999 8），表明異丙托溴銨檢測濃度線性范圍為50～250μg·m L－1。

3.4.4 回收率試驗。分別精密稱取異丙托溴銨約20、25、30 mg（低、中、高3種濃度各3份），按“2.2”項下方法進行處理，所得溶液定容至100m L容量瓶中，搖勻。分別精密量取5m L于10m L容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，為供試液，按上述色譜條件進樣分析，測定含量，計算回收率。結(jié)果，平均回收率為100.60%（RSD＝0.58%，n＝9），詳見表1。

3.4.5 精密度與穩(wěn)定性試驗。取“3.4.4”項下方法制備的低、中、高3個濃度的供試液各1份，按上述色譜條件，每個濃度各進樣6次，每次20μL，測定主峰峰面積，分別計算峰面積的RSD。結(jié)果，3個濃度峰面積的RSD分別為0.36%、0.30%、0.42%（n＝6）。

表1 回收率試驗結(jié)果（n＝9）Tab 1 Resultsof recovery test（n＝9）

取同一份樣品溶液（批號為20110106），分別在制備后0、1、2、6、8、24 h，依法測定，結(jié)果，含量的RSD為0.32%，表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.4.6 樣品含量測定。精密量取自制樣品液5m L于10m L容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液，按上述色譜條件進樣分析，測定含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Resultsof content determ ination of samp le（n＝3）

3.5 樣品穩(wěn)定性試驗

3.5.1 光照試驗。取樣品在照度（4 500±500）lx的條件下放置10 d，分別于0、1、5、10 d取樣，考察其性狀，測定pH值、主藥含量，由自身對照法測定有關(guān)物質(zhì)含量。結(jié)果10 d時，制劑顏色略加深，pH值略有升高，主藥含量明顯下降，詳見表3。

表3 樣品光照和高溫試驗結(jié)果Tab 3 Results of light testand high tem perature test of samp les

3.5.2 高溫試驗。取樣品在60℃恒溫水浴中放置10 d，分別于0、1、5、10 d取樣，觀察外觀變化，測定pH值、主藥含量及有關(guān)物質(zhì)含量。結(jié)果10 d內(nèi)制劑顏色、pH值無明顯變化，主藥含量有所下降，詳見表3。

3.5.3 加速試驗。取樣品3批，在溫度（40±2）℃條件下避光放置6個月，分別在第0、1、2、3、6個月末取樣分析，指標(biāo)同“3.5.1”項下，同時增加微生物限度檢查項，結(jié)果詳見表4。

樣品穩(wěn)定性試驗表明，異丙托溴銨霧化吸入液對光不穩(wěn)定，高溫放置下含量也明顯下降，應(yīng)注意置于涼暗處貯存。

4 討論

霧化吸入液在處方設(shè)計、制備過程中，除以水作溶劑外，必要時還可加入乙醇、丙二醇、甘油等；為改善制劑的穩(wěn)定性，通常加入合適的輔料如張力調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、絡(luò)合劑；為減輕對呼吸道的刺激性，還可加入矯味劑；對多劑量包裝，應(yīng)考慮加入防腐劑。張力調(diào)節(jié)劑通常選擇氯化鈉；對于pH調(diào)節(jié)劑，無機酸有硫酸、鹽酸，有機酸有抗壞血酸、檸檬酸等，無機堿為氫氧化鈉；絡(luò)合劑有乙二胺四乙酸或其鹽。本制劑選擇氯化鈉為張力調(diào)節(jié)劑，乙二胺四乙酸二鈉為絡(luò)合劑，硫酸為pH調(diào)節(jié)劑。因為本制劑為單劑量包裝，故未加入防腐劑。

表4 樣品加速試驗結(jié)果Tab 4 Resultsof accelerated testof sam ples

文獻[6，7]報道的異丙托溴銨含量測定方法中，色譜柱采用C8，雖然峰形好，但主峰出峰時間太長；筆者選用ODS柱為分析柱，在0.25%庚烷磺酸鈉溶液中加入0.5%三乙胺，可使異丙托溴銨出峰時間大為縮短，峰形對稱，且處方中的輔料、溴離子不影響其測定。綜上所述，本文建立的異丙托溴銨霧化吸入液中異丙托溴銨含量測定方法準(zhǔn)確、重復(fù)性好、操作簡單，可用于異丙托溴銨霧化吸入液的質(zhì)量控制。

由于《中國藥典》2010年版二部尚未收載霧化吸入液，硫酸沙丁胺醇霧化吸入溶液國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[8]規(guī)定檢查項目與制劑通則口服溶液劑規(guī)定檢查項目一致，故本制劑常規(guī)檢查按照《中國藥典》2010年版二部附錄“口服溶液劑”項下規(guī)定進行。

[1]中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南（2007年修訂版）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2007，30（1）：13.

[2]王兆東，鄧家華，周建平，等.呼吸道藥物遞送-霧化吸入劑的研究進展[J].世界臨床藥物，2011，32（5）：316.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典臨床用藥須知（化學(xué)藥和生物制品卷）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：335.

[4]陳新謙，金有豫，湯 光.新編藥物學(xué)[M].第17版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：445-446.

[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄15-16.

[6]盧來春，張 蓉，劉同華，等.反相高效液相色譜法測定吸入用異丙托溴銨溶液的含量[J].兒科藥學(xué)雜志，2007，13（3）：22.

[7]譚生建，張啟明，劉 剛，等.高效液相色譜法測定復(fù)方異維倍克氣霧劑中異丙托溴銨和鹽酸克侖特羅的含量[J].藥物分析雜志，2005，25（9）：1 070.

[8]WS1-（X-292）-2003Z，硫酸沙丁胺醇霧化吸入溶液[S].2004.