王昌亮， 鄭春輝， 王在國

進行檢測，以探討 Survivin在其中的表達情況，為乳腺癌的診斷及判斷預后提供重要的生物學依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集濰坊市人民醫(yī)院腫瘤外科2008年1月至2009年8月行乳腺癌改良根治術癌組織標本80例，年齡27～81歲。病理證實均為乳腺癌，其中導管內癌5例，早期浸潤性癌7例，浸潤性特殊癌23例，浸潤性非特殊癌45例。按國際抗癌聯盟的TNM分期法分期:Ⅰ期13例，Ⅱ期49例，Ⅲ期18例。對照組為纖維瘤旁正常乳腺組織20例，乳腺增生組織20例。所有病例均為女性。

1.2 方法 所有標本常規(guī)經10%福爾馬林固定，石蠟包埋，病理切片，厚度4 μm。采用免疫組織化學SP方法，標本常規(guī)脫蠟水化后經3%過氧化氫處理，微波抗原修復，Survivin兔抗人多克隆抗體購自北京中杉金橋公司，實驗步驟按試劑盒說明書進行，DAB顯色，蘇木精復染。將已知陽性的乳腺癌切片作為陽性對照，用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.3 Survivin表達陽性的判斷標準 染色陽性信號位于細胞漿，細胞染色強度明顯高于背景呈黃色到棕黃色顆粒者為陽性細胞。每張切片檢測5個不同視野(×400)，陽性細胞數在5%以下為－，5% ～10%為+，10% ～50%為++，50%以上為+++。1.4 統(tǒng)計學處理 應用軟件SPSS16.0進行統(tǒng)計學處理，實驗數據組間采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同乳腺組織中Survivin的表達情況 80例乳腺癌組織中61例Survivin表達為陽性，陽性率為76.3%，20例乳腺增生組織中Survivin表達陽性為5例，陽性率為25.0%，兩者差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);20例纖維瘤旁正常乳腺組織 Survivin不表達。見表1。

2.2 Survivin的表達與乳腺癌病理分型及臨床分期的關系 Survivin在非浸潤性癌、早期浸潤性癌、浸潤性非特殊癌、浸潤性特殊癌中陽性率分別為40.0%、57.1%、47.8%、51.1%，四者之間差異無統(tǒng)計學意義，P＞0.05，見表2。而在 TNM分期中，Survivin蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期陽性表達率分別為38.5%、57.1%、88.9%，隨 TNM 臨床分期的增高而增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表2 Survivin的表達與乳腺癌病理分型的關系

表3 Survivin的表達與乳腺癌臨床分期的關系

3 討論

1997年耶魯大學的Ambrosini等利用效應細胞蛋白酶受體effectorcell protease receptor 1，EPR-1 cDNA在人類基因組庫的雜交篩選中克隆出Survivin。Survivin基因位于17q25，全長為15Kd，由4個外顯子及3個內含子組成。Survivin主要表達于胚胎、發(fā)育的胎兒組織和大多數腫瘤組織內，不表達于成熟的正常組織［1］。

近年來，對Survivin的分子生物學特點、組織分布、凋亡抑制機制及其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、細胞周期之間的關系研究已取得了很大進展。Survivin與

bcl-2相似，其基因的表達在腫瘤中直接或間接地抑制了細胞的凋亡。在生理狀態(tài)下，細胞正常凋亡清除了體內衰老和異常的細胞，有利于保持體內組織的動態(tài)平衡。在腫瘤發(fā)生的早期，各種因素導致凋亡抑制，不僅有利于細胞的增殖，還有利于異?；蚣毎倪M一步積聚，促使組織向惡性轉化，從而有助于腫瘤進展。本研究在乳腺增生組織中檢測到了

Survivin的表達，但明顯低于乳腺癌中 Survivin的表達，提示Survivin表達可能出現于乳腺癌惡性轉化的早期。在正常細胞中 Survivin啟動子活性非常低，而在腫瘤細胞系 Hela中，其啟動子的活性增加了10～30倍，但引起Survivin基因在乳腺組織惡化的早期活化因素仍不是很清楚，有待于進一步研究。Survivin在大多數常見腫瘤組織中均異常高表達［2-3］，如肺癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、結腸癌。本研究發(fā)現，乳腺癌中Survivin陽性率為76.3%，Survivin陽性表達與病理類型無關，但與TNM臨床分期關系密切，TNM分期越晚，Survivin的陽性表達率越高。這種在乳腺正常組織和增生組織不表達或少量表達，而在腫瘤組織中過度表達的特點說明，

Survivin基因可能是在乳腺增生早期或者乳腺癌發(fā)生早期階段被激活，并開始表達。Survivin在乳腺惡性腫瘤中過表達，抑制細胞的正常凋亡，延長腫瘤細胞的生存期，增加惡性腫瘤的生長速度。提示Survivin基因的激活參與了乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展。檢測Survivin對腫瘤的基因診斷、基因治療有重要意義。

［1］ Adida C，Crotty PL，McGrath J，et a1.Developmentally regulated expression of the novel cancer anti-apoptosis gene survivin in human and mouse differentiation［J］.Am J Pathol，1998，152(1):43-49.

［2］ Grabowski P.Provalue of nuclear survivin expression in esophageal squamovs cell carcinoma［J］.Br J Cancer，2003，88(1):115.

［3］ Adida C，Crotty PL，Mcgrath J，et al.Developmentally regulated expression of the novel cancer anti-apoptosisgene survivin in human and mouse differentiation［J］.Am J Pathol，1998，152(1):43.