周升緒 （山東省諸城市畜牧局 262200）

懷孕母豬注射豬瘟弱毒疫苗對胎兒有不良的副作用，可引起新生仔豬特征性胸腔、腹腔液增加，以及局部和全身水腫。發(fā)生豬瘟的豬場帶毒母豬所產(chǎn)豬仔出現(xiàn)死胎、畸形胎和仔豬持久性病毒血癥。筆者在某一豬場的豬群中發(fā)現(xiàn)許多母豬空懷、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、畸形胎以及產(chǎn)出3d內(nèi)死亡的弱胎，個別初生仔豬全身或局部水腫，皮膚蠟黃色，叫聲嘶啞，不吸乳，發(fā)抖點頭。剖檢可見胸、腹腔積液，心外膜、心肌出血，腎點狀出血，脾邊緣梗死，膀胱、喉頭也可見出血點。經(jīng)豬瘟熒光抗體檢查，兔體交互免疫實驗，以及電子顯微鏡下超薄切片復(fù)染對病毒粒子的觀察，確定為豬瘟胎盤感染?，F(xiàn)將發(fā)病情況報告如下。

1 豬場的基本情況

該豬場每年有存欄豬3000余頭，母豬360多頭，基本上自繁自養(yǎng)。平均每月產(chǎn)仔78窩，仔豬30～35日齡斷奶，5～6月出欄。母豬在配種前1月，仔豬在35日齡斷乳時分別接種豬瘟兔化弱毒疫苗2ml。全場有比較穩(wěn)定的飼養(yǎng)管理措施，及衛(wèi)生防疫制度。但飲水為場前一條途經(jīng)上游村莊水河邊池塘。

1.1 往年豬瘟發(fā)生情況 該豬場建于1996年，1999年首次發(fā)生豬瘟流行，死亡大小豬共380余頭；2001年第2次暴發(fā)豬瘟，死亡大小豬200余頭；2次豬瘟流行均在斷乳后的仔豬級架子豬群中發(fā)生。該場于3月26日及4月28日先后對母豬及架子豬用豬瘟兔化弱毒苗實行緊急預(yù)防接種，但病情未能得到控制，5月份仔豬死亡123頭，隨機抽取3頭死亡仔豬的肝、脾、淋巴結(jié)勻漿，取無菌上清液與豬瘟兔化弱毒在兔體內(nèi)進(jìn)行交互免疫試驗，確診為豬瘟。因此，從5月25日是對所生的仔豬用豬瘟兔化弱毒苗實行吮乳前2h的超前免疫，仔豬注射疫苗1ml/頭，6月份死亡仔豬89頭，6～8月未出現(xiàn)仔豬死亡，但在9～10月，在斷乳豬群中又零星出現(xiàn)仔豬死亡，癥狀與病變均似豬瘟，該場又于10月24日起對所有空懷母豬注射4頭份豬瘟兔化弱毒苗。12月15日流行形勢出現(xiàn)新的變化，在母豬群中發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、畸形胎以及產(chǎn)后3d內(nèi)死亡的弱胎仔。

1.2 2003年豬群產(chǎn)死胎及弱仔豬的情況 全場共有生產(chǎn)母豬245頭，配種506次，共產(chǎn)仔豬496窩；68窩出現(xiàn)早產(chǎn)、產(chǎn)死胎及產(chǎn)出3d內(nèi)死亡的弱胎仔占產(chǎn)仔總數(shù)的20.66%；全年共產(chǎn)仔豬4860頭，死胎及產(chǎn)出后3d內(nèi)死亡的弱子豬共545頭，占所產(chǎn)仔豬的11.2%，而實際存活只有4102頭。

1.3 各豬舍之間的發(fā)病情況 該豬場共有10棟母豬舍，豬舍之間縱向排列相距25m，橫向之間相距8m。2001年全場6棟母豬舍都受到豬瘟的侵襲，但各舍之間母豬出現(xiàn)的空懷率、產(chǎn)死胎及弱胎的窩數(shù)及仔豬死亡數(shù)都有差異，空懷率在7.81%～21.13%，產(chǎn)死胎及產(chǎn)弱仔豬的窩數(shù)在2.27%～32.13%；仔豬死亡率在2.23%～34.61%之間。

1.4 病的發(fā)生與季節(jié)的關(guān)系 該豬場出現(xiàn)早產(chǎn)，產(chǎn)死胎及產(chǎn)后3d內(nèi)死亡弱豬仔的現(xiàn)象一年四季都存在，但1～4和11～12月發(fā)生率高，在這6個月中，產(chǎn)死胎、產(chǎn)弱仔豬窩數(shù)及仔豬死亡的頭數(shù)平均每月占總窩數(shù)的27.22%、產(chǎn)子頭數(shù)的20.56%，而夏秋溫暖季節(jié)發(fā)生率較低，平均每月為10.12%和14.29%。

1.5 病的發(fā)生與年齡的關(guān)系 該豬場有1歲的母豬，也有大6歲的老母豬，各種年齡母豬中均有發(fā)生死胎及產(chǎn)弱仔豬的現(xiàn)象，但母豬、斷奶前后的仔豬、架子豬以及成年豬群中未見呈豬瘟癥狀以及病變死亡的豬。在產(chǎn)死胎及弱胎仔的母豬中，有106頭母豬發(fā)生過1次，17頭發(fā)生2次，1頭連續(xù)發(fā)生3胎。出現(xiàn)2次產(chǎn)死胎及弱胎的母豬常在2胎之間能產(chǎn)生一胎存活的仔豬。

2 情況分析

疾病主要表現(xiàn)母豬空懷、胎兒早產(chǎn)、死胎、畸形胎及生后3d內(nèi)死亡的弱仔。而母豬、斷奶前后仔豬、架子豬以及肥豬群中均未發(fā)現(xiàn)豬瘟流行。這可能是由于豬瘟疫苗按時接種，豬體內(nèi)豬瘟抗體水平高的緣故。母豬雖然有較高的抗體水平保護(hù)自身，但抗體不能進(jìn)入胎盤保護(hù)胎兒，因而出現(xiàn)胎盤的感染。該豬場持續(xù)出現(xiàn)嚴(yán)重的豬瘟胎盤感染，主要原因有2個：一是豬場用水嚴(yán)重污染，豬群的飲用水為河邊臟水，使豬瘟病毒又進(jìn)入豬群這一惡性循環(huán)。二是這個豬場留種母豬大都是從本場母豬所產(chǎn)豬仔中選留母豬，形成了豬瘟胎盤感染→母豬繁殖障礙→亞臨床感染→胎盤感染又一惡性循環(huán)。近些時期陸續(xù)又有同樣的情況出現(xiàn)于其他大型豬場中，這在具有高水平抗體的母豬體內(nèi)，豬瘟病毒經(jīng)胎盤感染胎兒的現(xiàn)象。

3 實驗室診斷

為了對本病做出確實的診斷進(jìn)行了豬瘟、衣原體病、細(xì)小病毒病、布氏桿菌病以及豬弓形體病檢查，細(xì)菌分離培養(yǎng)等工作。

3.1 豬瘟熒光抗體檢查 （1）采瀕臨死前仔豬的扁桃體、腎制作冰凍切片，用豬瘟熒光抗體染色，在熒光顯微鏡下觀察；（2）采死胎及出生的弱仔豬脾、淋巴、扁桃體勻漿，取無菌上清液接種于加有蓋玻片的PK15細(xì)胞，培養(yǎng)48至120h，取出蓋玻片，用豬瘟熒光抗體染色，在熒光顯微鏡下檢查；（3）去瀕臨死前仔豬腎細(xì)胞帶毒培養(yǎng)，染色檢查。

3.2 兔體交互免疫試驗 分別用死胎及出生的弱仔豬脾、淋巴、扁桃體勻漿制作的無菌上清液和單層細(xì)胞培養(yǎng)液分別接種家兔，9d后用100個兔體反應(yīng)量疫苗接種家兔，測量體溫反應(yīng)。

3.3 抗體效價檢測 （1）取4批共170份(母豬共126份，60日齡仔豬44份)血清分別用PPA-ELISA藥盒、衣原體間接血凝診斷液、豬弓形體間接血凝診斷液、布氏桿菌虎紅平板抗原，分別在40孔酶聯(lián)反應(yīng)板，96孔微量血凝反應(yīng)板以及平板上檢測豬瘟、衣原體、豬弓形體和布氏桿菌抗體效價。（2）取90份母豬血清用PPV(1)型診斷盒在40孔酶聯(lián)反應(yīng)板上檢測細(xì)小病毒抗體效價。

3.4 弓形體檢查 取3批死胎和出生的弱仔豬脾、淋巴結(jié)、肺腦組織勻漿，取無菌上清液分別接種4只小白鼠，每批盲傳3代，檢查弓形體。

3.5 致病試驗 （1）取8～9和10～11日齡雞胚，用單層細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行卵黃囊及絨毛尿囊膜接種。（2）取死亡仔豬及瀕死仔豬腦組織制成無菌懸浮液，接種2批共8只家兔，逐日觀查是否發(fā)病。

3.6 細(xì)菌培養(yǎng)檢查 取死亡仔豬及瀕死仔豬的心、肝、脾、腦分別在鮮血斜面、馬丁肉湯、厭氧肝湯培養(yǎng)基中做細(xì)菌培養(yǎng)檢查。

4 結(jié)果

（1）多次采取瀕死仔豬的扁桃體制作冰凍切片，接種病料的PK15細(xì)胞蓋玻片及帶毒腎細(xì)胞蓋玻片用豬瘟熒光抗體染色檢查均可見到亮綠色熒光，而未接毒對照細(xì)胞蓋玻片經(jīng)豬瘟熒光抗體染色后看不到熒光。接種病料的單層細(xì)胞培養(yǎng)不產(chǎn)生細(xì)胞病變。（2）在兔體交互免疫實驗中，無論接仔豬病料組還是接種單層細(xì)胞培養(yǎng)物組，9d后再接種豬瘟犢睪細(xì)胞弱毒，兔體均不出現(xiàn)熱反應(yīng)，而對照組出現(xiàn)定型熱反應(yīng)。（3）3批仔豬病料接種小白鼠，盲傳3代，檢查其腹水、腦組織均未發(fā)現(xiàn)弓形體。（4）接種病料的單層細(xì)胞超薄切片和病毒培養(yǎng)物復(fù)染電鏡觀察均可看到大小不等、帶有二層囊膜的病毒粒子、囊膜表面有絮狀纖突，超薄切片可看到病毒粒子位于胞漿內(nèi)，這與有關(guān)學(xué)者對豬瘟病毒粒子的觀察結(jié)果一致。（5）雞胚卵黃囊和絨毛尿囊膜接種不能致死雞胚，迫殺雞胚液和單層細(xì)胞培養(yǎng)液與雞紅細(xì)胞進(jìn)行血細(xì)胞凝集試驗，不能凝集雞紅細(xì)胞。（6）死亡仔豬和瀕死仔豬腦組織接種家兔，連續(xù)觀察3周，未見發(fā)病。（7）以死亡和瀕死仔豬的實質(zhì)臟器在鮮血斜面、馬丁肉湯、厭氧肝湯培養(yǎng)基上均未分離到細(xì)菌。

5 小結(jié)

根據(jù)豬瘟熒光抗體檢查，兔體交互免疫試驗以及電鏡觀察可以確定引起這個豬場流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、畸形胎以及生后3d內(nèi)死亡的弱仔豬的原因是豬瘟病毒感染，這種感染來源于母豬，通過胎盤感染所致。