呂 民，符邵鵬，張秀和

（吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 心外科，吉林 長春 130033）

建立高肺血流肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型，對(duì)其深入研究有助于提高臨床對(duì)先天性心臟病肺動(dòng)脈高壓的診治水平?？偨Y(jié)與探討高肺血流肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型的制備、病理生理學(xué)特點(diǎn)，以及對(duì)臨床肺動(dòng)脈高壓的模擬，為了解肺動(dòng)脈高壓的細(xì)胞及分子病理學(xué)機(jī)制提供幫助。目前，多以大鼠、實(shí)驗(yàn)犬為模型，但與人的生理特點(diǎn)差距較大。本實(shí)驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)豬為模型，更接近人體心血管系統(tǒng)解剖及生理。以外科分流技術(shù)建立高肺血流肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 材料雜種幼豬，年齡2－3月齡，體重8－10 kg，雌雄不拘，采用隨機(jī)數(shù)字表方法分2組：組①為高肺血流組（D-group，n＝6），全部行左側(cè)開胸，降主動(dòng)脈與左肺動(dòng)脈搭橋術(shù)。組②為對(duì)照組（C-group，n＝6）：即假手術(shù)組，只開胸?zé)o手術(shù)處理。兩組一般情況比較差異無顯著性。術(shù)后所有動(dòng)物正常飼養(yǎng)3個(gè)月，全部存活，體重增至15－15.5kg。主要儀器及試劑：多功能麻醉機(jī)（Blease英國）、血?dú)夥治鰞x（i-STATI美國）、監(jiān)護(hù)儀（S／5麻醉監(jiān)護(hù)儀 芬蘭）、動(dòng)脈測(cè)壓（BIOTRANS美國）、光學(xué)顯微鏡（日本）。其余實(shí)驗(yàn)試劑及設(shè)備由吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)豬術(shù)前12h禁食。肌注氯胺酮20mg／kg后建立腿部靜脈通路，靜脈注射戊巴比妥5mg／kg，插入氣管插管，連接麻醉機(jī)，行輔助呼吸。芬太尼20μg／kg、潘可羅寧0.1mg／kg靜脈注射維持麻醉，呼吸機(jī)控制呼吸。經(jīng)股動(dòng)脈穿刺置管連接壓力換能器，術(shù)中監(jiān)測(cè)有創(chuàng)動(dòng)脈血壓和心率，監(jiān)測(cè)血?dú)夥治觯╬H 值、PaO2、PaCO2、血離子），鼻溫及肛溫監(jiān)測(cè)。組①行左側(cè)開胸，采用人工血管（直徑1cm）降主動(dòng)脈與左肺動(dòng)脈搭橋術(shù)。組②為對(duì)照組，麻醉、氣管插管呼吸機(jī)控制呼吸，只開胸?zé)o手術(shù)處理。全組術(shù)后90天分別進(jìn)行如上麻醉操作，仰臥位，固定四肢及頭部，然后正中開胸，檢測(cè)肺動(dòng)脈收縮壓（PASP）、肺血管阻力。血流動(dòng)力學(xué)測(cè)量完畢，實(shí)驗(yàn)豬肝素化（3mg／kg）后，放血處死。完整取出心、肺，行病理學(xué)檢測(cè)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用組間t檢驗(yàn)，百分率用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 肺動(dòng)脈收縮壓（PASP）、肺血管阻力（PVR）變化見表1。

表1 2組動(dòng)物肺血流動(dòng)力學(xué)變化參數(shù)值

2.2 形態(tài)學(xué)改變 ①顯微鏡下觀察：HE染色顯示：對(duì)照組左肺動(dòng)脈內(nèi)皮及平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則（圖1 A）；分流組左肺動(dòng)脈，內(nèi)膜增厚，平滑肌增生，內(nèi)徑變小，其中部分血管床毀損，分流組左肺動(dòng)脈之肌性動(dòng)脈（MA）數(shù)量增多，非肌性動(dòng)脈NMA數(shù)量減少（圖1B）。分流組右肺動(dòng)脈MA增多，NMA有所減少，但程度均不如左肺動(dòng)脈顯著（圖1C）。

圖1 肺動(dòng)脈及平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變

3 討論

肺動(dòng)脈高壓（PAH）是一組病因復(fù)雜的疾病，目前具體的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。尤其是高肺血流所致肺動(dòng)脈高壓，在臨床上仍然是治療的難點(diǎn)，預(yù)后較差。右心衰竭是肺動(dòng)脈高壓疾病致殘、致死的共同途徑，而肺動(dòng)脈高壓是右心衰竭的最主要原因［1］。

動(dòng)物模型對(duì)疾病的研究必不可少，在現(xiàn)有的PAH動(dòng)物模型中，主要為大鼠及實(shí)驗(yàn)犬。有學(xué)者用野百合堿（monocrotaline，MCT）誘導(dǎo)的大鼠PAH模型的炎癥反應(yīng)，在結(jié)締組織相關(guān)PAH形成過程中扮演著重要角色［2］。大鼠模型氣管內(nèi)注入脂多糖是模擬人類COPD并肺動(dòng)脈高壓較理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型［3］。有人認(rèn)為，經(jīng)頸動(dòng)靜脈分流術(shù)可形成肺血管血流量增多，是可行的肺動(dòng)脈高壓的模型［4］。國內(nèi)有學(xué)者采用經(jīng)頸總動(dòng)脈和頸靜脈端端吻合制作肺循環(huán)血流增加肺高壓模型［5］。有學(xué)者建立低壓低氧性肺高壓大鼠模型［6］。

高肺血流先天性心臟病伴隨肺動(dòng)脈高壓，導(dǎo)致肺動(dòng)脈結(jié)構(gòu)改變。本實(shí)驗(yàn)表明，幼豬模型中，體肺動(dòng)脈分流術(shù)后90天，肺小動(dòng)脈內(nèi)膜和中膜平滑肌細(xì)胞過度增生，中膜及內(nèi)膜顯著增厚，且呈不對(duì)稱性改變，其中部分血管腔完全閉塞。右下肺動(dòng)脈壓力雖有升高，但不及左肺動(dòng)脈明顯，其肺小動(dòng)脈中膜僅出現(xiàn)輕度增生，內(nèi)膜改變不明顯，血管壁無明顯增厚。肺血流動(dòng)力學(xué)變化：高肺血流組肺動(dòng)脈收縮壓（PASP）、肺血管阻力（PVR）顯著升高。

建立高肺血流肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型，對(duì)其深入研究有助于提高臨床對(duì)先天性心臟病肺動(dòng)脈高壓的診治水平。總結(jié)與探討高肺血流肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型的制備、病理生理學(xué)特點(diǎn)，以及對(duì)臨床肺動(dòng)脈高壓的模擬，為了解肺動(dòng)脈高壓的細(xì)胞及分子病理學(xué)機(jī)制提供幫助。目前，多以大鼠、實(shí)驗(yàn)犬為模型，但與人的生理特點(diǎn)差距較大。本實(shí)驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)豬為模型，更接近人體心血管系統(tǒng)解剖及生理。

［1］荊志成.我國肺動(dòng)脈高壓專家的共同闡釋［J］.中國實(shí)用內(nèi)科雜志，2007，27（4）：246.

［2］盧 杰，李夢(mèng)濤，王 遷.結(jié)締組織疾病相關(guān)肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型［J］.中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2009，2：161.

［3］蔣 明，鐘小寧，柳廣南.慢性支氣管炎、肺氣腫并肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型的研制［J］.中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志，2006，4：287.

［4］Chou TF，Wu Ms，Chien CT，et al.Enhanced expression of nitric oxide synthase in the early stage after increased pulmonary blood flow in rats［J］.Eur JC cardio-thoracic Surgery，2002，21：331.

［5］曾 真，姜 楨，王春生.肺循環(huán)血流增加造成肺動(dòng)脈高壓模型大鼠［J］.復(fù)旦學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版，2006，33（2）：157.

［6］李 娟，孫 新，畢 輝，等.低壓低氧性大鼠肺動(dòng)脈高壓模型的建立［J］.臨床心血管病雜志，2008，24（4）：297.