竇玉鳳 孫延星

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)農(nóng)五師獸醫(yī)站，博樂(lè) 833400）

胚胎移植技術(shù)是繼人工受精之后被廣泛采用繁殖新技術(shù)，可以充分發(fā)揮優(yōu)秀母畜在家畜品種改良和群體擴(kuò)繁中的最大潛力，有效縮短時(shí)代間隔，加快遺傳進(jìn)展，并在品種資源保存上具有重要意義。近年來(lái)，全國(guó)許多地方都引進(jìn)了波爾山羊，同時(shí)為了提高其繁殖效率相繼開(kāi)展波爾山羊胚胎移植工作。本試驗(yàn)使用了2種超排藥物對(duì)波爾山羊進(jìn)行超排處理并運(yùn)用“腹腔內(nèi)窺鏡技術(shù)”進(jìn)行沖卵和鮮胚移植。

1 材料與方法

1.1 供體和受體

供體為成年經(jīng)產(chǎn)波爾山羊40只，年齡3～4歲。受體為當(dāng)?shù)爻赡杲?jīng)產(chǎn)山羊399只，年齡4～5歲。供、受體均健康無(wú)病。

1.2 藥物和器械

FSH：中國(guó)農(nóng)科院畜牧所（批號(hào)：20020619）。

OVAGEN：新西蘭2001年生產(chǎn)。

LH：杭州市動(dòng)物藥品廠（批號(hào)：020112）。

氯前列烯醇：上海市計(jì)劃生育科學(xué)研究所（批號(hào)：990629）。

PMSG：寧波市激素制品有限公司（批號(hào)：20020718）。羊用陰道海綿栓：每只含氟孕酮35mg。

羊用手術(shù)沖卵和移植器械：1套（新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧所研制）。腹腔內(nèi)窺鏡：1臺(tái)（西德）。

體視顯微鏡：1臺(tái)（北京光學(xué)儀器廠）。

1.3 供體超排處理

供體羊隨機(jī)分5組，每組8只。1～4組羊放置陰道海綿栓后第12 d開(kāi)始用FSH進(jìn)行超排處理，每只羊按總劑量6份，分3 d隔12 h藥量遞減肌肉注射（1.5、1.5；1、1；0.5、0.5）mg，第14 d上午去栓，發(fā)情羊靜脈注射LH 100 U，采用自然交配至發(fā)情結(jié)束。第5組羊放置陰道海綿栓后第12 d開(kāi)始用OVAGEN進(jìn)行超排處理，每只羊按總劑量10mg分3 d間隔12 h藥量遞減肌肉注射（2、2；1.5、1.5；1、1）mg，第14 d上午去栓并肌注氯前列烯醇0.1mg，第15 d試情。發(fā)情羊采用自然交配至發(fā)情結(jié)束。

1.4 受體同期發(fā)情處理

受體羊隨機(jī)均分為5組，與供體同步放置海綿栓、同步去栓肌注PMSG500IU。第15 d試情，發(fā)情羊打號(hào)備用。

1.5 沖胚與移植

配種后第7 d，通過(guò)腹腔內(nèi)窺鏡手術(shù)從子宮回收胚胎，在體視顯微鏡下檢出致密桑椹期與囊胚期的正常胚胎用腹腔內(nèi)窺鏡手術(shù)進(jìn)行鮮胚移植。

1.6 妊娠鑒定

受體移植20 d后開(kāi)始試情，2個(gè)情期不返情者視為妊娠。

2 結(jié)果與分析

2.1 超排處理與胚胎回收

對(duì)40只成年經(jīng)產(chǎn)波爾山羊進(jìn)行超排處理，有2只未表現(xiàn)發(fā)情。共回收胚胎388枚，可用胚311枚，平均胚胎數(shù)10.21枚，平均可用胚數(shù)8.18枚。

2.2 受體羊同期發(fā)情

同期處理受體羊399只，發(fā)情320只，同期率80.20%。

2.3 不同藥物處理效果

FSH+LH處理供體32只，OVAGEN+氯前列烯醇處理供體8只，結(jié)果詳見(jiàn)表1。

表1 不同藥物超排效果統(tǒng)計(jì)表

OVAGEN+PG超排獲得平均胚胎數(shù)和可用胚數(shù)均略高于FSH+LH，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 鮮胚移植

移植受體2 6 7只，其中雙胚4 4只。妊娠率5 6.1 8%（150/267）。

3 討論

（1）使用2種方法對(duì)供體羊進(jìn)行超排處理，結(jié)果差異不顯著，但每頭份OVAGEN+氯前列烯醇價(jià)格高出FSH+LH近200元，因此用FSH+LH處理更為經(jīng)濟(jì)合算。

（2）使用腹腔內(nèi)窺鏡技術(shù)可以直接在腹腔內(nèi)觀察到供、受體卵巢排卵情況，若供體羊卵巢上黃體數(shù)量小于4，或供、受體卵巢黃體發(fā)育不好，則無(wú)須進(jìn)一步手術(shù)。同時(shí)在沖卵和移植手術(shù)過(guò)程中內(nèi)窺鏡技術(shù)比傳統(tǒng)的小挑法手術(shù)切口小，無(wú)須將卵巢牽引出體外，因此對(duì)羊只傷害較輕，利于術(shù)后盡快恢復(fù)。

[1] 趙曉娥，武浩，權(quán)富生等.波爾山羊胚胎移植試驗(yàn)研究[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2002，11（4）：92～94

[2] 郭志勤.家畜胚胎工程[M].北京：中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社，1998

[3] 桑潤(rùn)滋.動(dòng)物繁殖生物技術(shù)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002