李彬 劉春莉 韓梅玲 劉麗晶 陳靜

[摘要] 目的 評價酶聯(lián)免疫甲胎蛋白診斷試劑盒的精密度。 方法 比較6個廠家生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫甲胎蛋白診斷試劑盒的精密度，分析診斷試劑的精密度現(xiàn)狀。 結(jié)果 6個廠家產(chǎn)品的精密度檢測結(jié)果存在較大的差異，其中2個廠家的產(chǎn)品不能達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)論 各廠家產(chǎn)品精密度水平差距較大，部分產(chǎn)品的精密度性能指標(biāo)無法滿足臨床需求，亟待改善。

[關(guān)鍵詞] 甲胎蛋白試劑盒；精密度；酶聯(lián)免疫；評價

[中圖分類號] R446[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A[文章編號] 1674-4721（2012）07（c）-0127-02

甲胎蛋白是源于卵黃囊、未分化肝細(xì)胞和胎兒胃腸道的一種糖基化白蛋白，其分子量約為70 000 D[1]。當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時，隨著病情惡化，甲胎蛋白在血清中的含量會急劇增加。有報道稱70%以上的原發(fā)性肝癌患者血清內(nèi)可檢測到高濃度的甲胎蛋白，而轉(zhuǎn)移性肝癌的甲胎蛋白水平一般不是非常高，酒精性肝硬化、急性病毒性肝炎以及HBsAg攜帶者血清內(nèi)的甲胎蛋白含量升高幅度更低一些[2]。因此，甲胎蛋白的定量檢測被廣泛用于原發(fā)性肝癌等疾病的輔助診斷，其檢測的精密度是該定量檢測產(chǎn)品的重要性能指標(biāo)之一[3]。

精密度是用來考察試劑盒對同一樣本重復(fù)測定時，能否得到無顯著差異的結(jié)果的性能指標(biāo)，通常用重復(fù)多次測量結(jié)果的變異系數(shù)（CV%）表示。一般情況下，評價精密度時，同一樣本重復(fù)測定10次，測定結(jié)果的變異系數(shù)（CV%）應(yīng)不高于15.0%[4]。酶聯(lián)免疫甲胎蛋白診斷試劑盒（以下簡稱“甲胎蛋白試劑盒”）精密度的國家標(biāo)準(zhǔn)也是不高于15%（n = 10）[5]。筆者從市場上購買6種甲胎蛋白試劑盒，對其精密度進(jìn)行測定評價，現(xiàn)報道如下：

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 材料6種甲胎蛋白試劑盒，每種選取3個批號。以上產(chǎn)品均為國內(nèi)常見的試劑盒。本文旨在討論國內(nèi)甲胎蛋白試劑盒的精密度現(xiàn)狀，為避免歧義，所使用的甲胎蛋白試劑盒均采用代碼標(biāo)示：A、B、G、K、S、W。質(zhì)控品采用BIORAD質(zhì)控品367#。

1.1.2 試驗設(shè)備全自動加樣器：e-Lisa；洗板機(jī)：iWO-960；酶標(biāo)儀（高靈敏寬范圍）：PHomo。

1.2 方法

選取A、B、G、K、S、W 6個廠家甲胎蛋白試劑盒，每個廠家選定3個批號，共組成18個試劑盒。選取同一個BIORAD 367#質(zhì)控品（質(zhì)控血清），按照說明書進(jìn)行溶解備用。按照每個試劑盒的操作說明書進(jìn)行操作，分別用18個試劑盒測定選定質(zhì)控品的濃度值，每個試劑盒的測定重復(fù)10孔濃度值。綜上得到180個濃度數(shù)據(jù)，按照“1.3”的方法對這180個數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.3 對比評價

1.3.1 橫向比較每個廠家3個批號的甲胎蛋白試劑盒分別測定精密度，取其結(jié)果的平均值進(jìn)行評價。

1.3.2 縱向比較針對每個廠家3個批號的甲胎蛋白試劑盒測定同一質(zhì)控品的30個濃度值進(jìn)行精密度評價。

1.3.3 評價標(biāo)準(zhǔn)橫向比較和縱向比較采用相同的評價標(biāo)準(zhǔn)。精密度小于7%的甲胎蛋白試劑盒評價為優(yōu)，精密度在7%～10%之間的甲胎蛋白試劑盒評價為良，精密度在10%～15%之間的甲胎蛋白試劑盒評價為中，精密度大于15%的甲胎蛋白試劑盒評價為差。

2 結(jié)果

橫向比較，A、K兩個廠家的甲胎蛋白試劑盒精密度評為優(yōu)；W的甲胎蛋白試劑盒精密度評為良；B、S兩個廠家的甲胎蛋白試劑盒精密度評為中；G的甲胎蛋白試劑盒精密度評為差，超過國家標(biāo)準(zhǔn)22%。

縱向比較，A、K兩個廠家的甲胎蛋白試劑盒精密度評為優(yōu)；S、W兩個廠家的甲胎蛋白試劑盒精密度評為中；B、G兩個廠家的甲胎蛋白試劑盒精密度評為差分別超過國家標(biāo)準(zhǔn)22%和32%。

3 討論

橫向比較的結(jié)果反映批內(nèi)精密度性能。這種精密度主要體現(xiàn)同一批甲胎蛋白試劑盒連續(xù)測定結(jié)果的重復(fù)性。本研究中，兩種甲胎蛋白試劑盒性能優(yōu)，一種甲胎蛋白試劑盒性能良好，其他3種甲胎蛋白試劑盒性能一般，甚至出現(xiàn)不能滿足國家標(biāo)準(zhǔn)的情況?？v向比較的結(jié)果反映批間精密度性能。這種精密度主要體現(xiàn)不同批次甲胎蛋白試劑盒連續(xù)測定結(jié)果的重復(fù)性。綜合比較來看，兩家企業(yè)的甲胎蛋白試劑盒精密度性能優(yōu)越，可以滿足臨床輔助診斷需求；多數(shù)企業(yè)產(chǎn)品的批內(nèi)精密度優(yōu)于批間精密度，即他們生產(chǎn)的甲胎蛋白試劑盒批間精密度性能有所下降，產(chǎn)品B甚至出現(xiàn)了批內(nèi)合格而批間不能滿足國家標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)象。使用精密度性能較差的甲胎蛋白試劑盒進(jìn)行臨床測定，其結(jié)果是不準(zhǔn)確的，這樣的測定結(jié)果無法滿足臨床連續(xù)監(jiān)測同一患者病情變化的實際需求。

精密度是甲胎蛋白試劑盒的重要性能指標(biāo)之一。精密度不好的原因是多方面的，包括試劑盒的原材料、生產(chǎn)工藝、分析操作等[6]。建議各生產(chǎn)廠家從源頭入手，綜合控制生產(chǎn)全過程，為臨床提供更為可靠的診斷試劑。臨床檢驗實驗室在確定甲胎蛋白試劑盒品牌時，建議采用本文提供的方法對備選品牌進(jìn)行隨機(jī)抽樣，詳細(xì)測定比較其精密度。只有經(jīng)過充分的比較驗證才能選擇到優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品，才能提供更為可靠的檢驗數(shù)據(jù)。

為確保臨床檢測的長期準(zhǔn)確性，克服某些甲胎蛋白試劑盒精密度較差的現(xiàn)狀，各實驗室必須加強(qiáng)室內(nèi)質(zhì)控[7]。實驗室可以根據(jù)自身情況繪制質(zhì)控圖，建立一系列甲胎蛋白檢測質(zhì)量保證體系，加強(qiáng)實驗室管理，發(fā)現(xiàn)并找出試驗失控的原因，制定糾正措施并保證出具數(shù)據(jù)的科學(xué)性和可靠性[8]。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Taketa K. Alpha-Fetoprotein in the 1990s In：Sell SS Serological cancer markers[M]. New Jersey：Humana Press，1992：31-46.

[2]Stuart KE，Anand AJ，Jenkins RL. Hepatocellular Carcinoma in the United States[J]. Cancer，1996，77（11）：2217-2222.

[3]張春濤，黃穎，于婷，等. 2009 年度甲胎蛋白（AFP） 體外診斷試劑抽驗質(zhì)量分析[J]. 中國藥事，2010，24（8）：809-811.

[4]徐偉文. 體外診斷試劑研制常用技術(shù)指標(biāo)之分析性能評估[J]. 分子診斷與治療雜志，2010，2（2）：140-144.

[5]國家食品藥品監(jiān)督管理局. 中國生物制品規(guī)程[Z]. 2000-08-02.

[6]孫玉芬，秦國天. 國產(chǎn)ELISA試劑盒批間變異的分析[J]. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2003，19（7）：908-909.

[7]張艷. 做好室內(nèi)質(zhì)控[J]. 中國實用醫(yī)藥，2011，6（10）：243.

[8]邱明. EWMA控制圖在ELISA室內(nèi)質(zhì)控中的應(yīng)用[J]. 中外醫(yī)學(xué)研究，2011，9（20）：160-161.

（收稿日期：2012-04-17本文編輯：陳?。?/p>