Tanja Opriessnig（美國(guó)愛荷華州立大學(xué) 副教授）

藍(lán)耳病的致病性、診斷與防控

Tanja Opriessnig（美國(guó)愛荷華州立大學(xué) 副教授）

1987年，美國(guó)首次報(bào)道了豬繁殖障礙和呼吸綜合征（也稱藍(lán)耳病，PRRS）的發(fā)生。1991年，在荷蘭首次分離到藍(lán)耳病毒（PRRSV）。該病毒為單股正鏈RNA病毒，屬套式病毒目，動(dòng)脈炎病毒科，動(dòng)脈炎病毒屬。根據(jù)世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）統(tǒng)計(jì)，截至目前，澳大利亞、新西蘭、芬蘭、挪威、瑞典和瑞士等國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)過藍(lán)耳病病例。

1 PRRSV的致病特點(diǎn)

PRRSV可分為1型和2型兩種類型，1型為歐洲PRRSV lelystad，2型為北美PRRSV VR-2332。兩種類型的病毒在核苷酸序列上存在50%～70%的相似度。豬感染1型PRRSV后，肺部剖檢無明顯病變；感染2型PRRSV后，肺部出現(xiàn)病變。該病毒的主要作用對(duì)象為負(fù)責(zé)清除肺部和血液中的細(xì)菌和炎性殘留物的巨噬細(xì)胞，從組織學(xué)切片可以看出，PRRSV不只感染巨噬細(xì)胞，而且破壞該細(xì)胞，造成細(xì)胞凋亡。

不同年齡的豬感染PRRSV后表現(xiàn)出不同癥狀。成年母豬主要出現(xiàn)繁殖障礙；仔豬主要表現(xiàn)出腹瀉癥狀；生長(zhǎng)豬主要發(fā)生呼吸系統(tǒng)疾病，同時(shí)出現(xiàn)皮膚變紅的癥狀。哺乳仔豬感染PRRSV后，癥狀與傳染性腸胃炎、大腸桿菌引起的腹瀉相似。圖7為豬感染PRRSV后一段時(shí)間內(nèi)所發(fā)生的一系列機(jī)體反應(yīng)。在感染的最初階段，病毒在肺泡和其他組織的巨噬細(xì)胞中大量繁殖，在這些組織中可以存活長(zhǎng)達(dá)5個(gè)月；感染后12小時(shí)出現(xiàn)病毒血癥，大約持續(xù)1個(gè)月，在感染后的21～28天達(dá)到峰值；感染后7～9天利用ELISA可以檢測(cè)到大量的抗PRRSV IgG，在感染后1個(gè)月，抗體濃度達(dá)到峰值，平臺(tái)期持續(xù)4～5個(gè)月，整個(gè)抗體持續(xù)存在的時(shí)間大概一年左右；而預(yù)防藍(lán)耳病較重要的中和抗體反應(yīng)則出現(xiàn)較晚，在42天時(shí)達(dá)到峰值，保持的時(shí)間也較短，很快就會(huì)降下來。

2 PRRSV的流行病學(xué)分析

PRRSV在血液和組織中都存在，在很多排泄物和分泌物中也相應(yīng)存在，如鼻腔分泌物、唾液、精液、糞便、尿液等。生長(zhǎng)豬主要通過水平傳播途徑感染病毒，最重要的途徑是轉(zhuǎn)入豬只、運(yùn)輸者、員工、訪客等，還有一些次要傳播因素，如氣霧、飼料等。種豬主要通過垂直傳播途徑感染病毒，如母豬通過胚胎、子宮將病毒傳染給仔豬，以及引進(jìn)動(dòng)物和精液傳播等。

3 PRSSV與其他病原的相互作用

3.1 PRSSV與PCV2的相互作用

PRSSV與PCV2共感染會(huì)比感染單一病毒產(chǎn)生更為嚴(yán)重的臨床癥狀和組織損傷。其機(jī)制可能是PRSSV通過啟動(dòng)與PCV2共同靶細(xì)胞（巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞）的細(xì)胞周期，增加IFN-γ的濃度等途徑來增強(qiáng)PCV2病毒的復(fù)制。Sinha等（2011年）用實(shí)時(shí)定量PCR分析了單一感染PCV2a、PCV2b和并發(fā)感染PRRSV的豬血清中PCV2DNA的含量，發(fā)現(xiàn)兩種病毒并發(fā)感染可以促進(jìn)PCV2的復(fù)制，單一感染PCV2的豬達(dá)到峰值后很快會(huì)降下來，到接種后42、49天只是間歇性地發(fā)現(xiàn)PCV2的存在 （圖8）。 可見，PRRSV可以促進(jìn)PCV2感染和傳播，使得PCV2以較高水平持續(xù)存在，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)70天。這意味著控制藍(lán)耳病的同時(shí)，還要控制圓環(huán)病毒病和其它病毒的感染，以防止共感染。

3.2 PRSSV與豬肺炎支原體的相互作用

PRSSV與豬肺炎支原體是導(dǎo)致豬呼吸疾病復(fù)合癥（PRDC）的兩個(gè)最主要的病原，Thacker等（2004年）研究發(fā)現(xiàn)豬肺炎支原體可以加重PRRSV誘發(fā)的肺炎，與單獨(dú)感染PRSSV的豬相比，混合感染豬的肺部損傷更嚴(yán)重。其機(jī)制可能是共感染促進(jìn)了促炎因子的產(chǎn)生，進(jìn)而使得感染肺炎的機(jī)率增加。

4 藍(lán)耳病的診斷

藍(lán)耳病診斷的精確性和準(zhǔn)確性非常重要，尤其是針對(duì)種公豬。種公豬站的種公豬若診斷為藍(lán)耳病假陽(yáng)性，首先會(huì)導(dǎo)致這頭公豬的淘汰。只要有一頭檢出，還需要對(duì)所有豬進(jìn)行復(fù)查，尋找感染來源，產(chǎn)生一系列不必要的費(fèi)用。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果就必須馬上終止精液的銷售、輸送，精液的銷售中斷會(huì)影響整個(gè)種豬場(chǎng)的生產(chǎn)，波及下游系統(tǒng)，大約中斷1天后才能慢慢恢復(fù)生產(chǎn)。假陰性結(jié)果同樣會(huì)造成非常嚴(yán)重的后果，假陰性精液被當(dāng)成正常精液發(fā)送到?jīng)]有藍(lán)耳病感染的種豬群，造成種豬群藍(lán)耳病的大規(guī)模爆發(fā)，引起很大的損失。

藍(lán)耳病診斷方法有多種，如ELISA、PCR法、免疫組化試驗(yàn)等，目前主要采用血清學(xué)方法。ELISA要檢測(cè)抗體，而抗體的產(chǎn)生需要一定時(shí)間，該法的檢測(cè)時(shí)間至少需要7～14天，因而不能在急性發(fā)病情況下作出診斷；但由于價(jià)格較為低廉，應(yīng)用較為普遍。PCR法非常靈敏，可分析多種類型的樣本，如血清、血液涂樣、口腔液和精液，血清和血液涂樣的檢測(cè)一致性較好。使用PCR法時(shí)應(yīng)綜合臨床情況，如是否接種疫苗，因?yàn)橐呙鏒NA也會(huì)被擴(kuò)增出來，造成陽(yáng)性。免疫組化試驗(yàn)雖不如PCR法敏感，但因可以檢測(cè)出組織中的病毒性抗原，特異性更強(qiáng)，檢測(cè)周期為24～48小時(shí)。

5 藍(lán)耳病的防控

5.1 免疫接種

選用的疫苗應(yīng)能控制并縮短病毒造成病毒血癥的時(shí)間，進(jìn)而抑制病毒的排放和傳播，在此基礎(chǔ)上疫苗應(yīng)能盡早地激發(fā)出中和抗體反應(yīng)，并且能在較長(zhǎng)時(shí)間保持較高的水平。PRRSV的遺傳變異性和多樣性較大，豬場(chǎng)應(yīng)首先弄清楚所感染的毒株，然后針對(duì)性地選擇疫苗。

5.2 血清療法

血清療法即在豬群中找一頭感染PRRSV的豬，并確定其處于病毒血癥期間，采集血液，制備血清，將血清稀釋后注射給豬場(chǎng)的每一頭豬，讓每一頭豬都接觸到豬場(chǎng)正在爆發(fā)的毒株。研究證實(shí)，血清療法可為豬群提供一定的免疫保護(hù)，給接種和未接種異源PRRSV疫苗的豬接種了低劑量或高劑量的自家疫苗，5周之后再進(jìn)行PRRSV攻毒試驗(yàn)，攻毒14天后，發(fā)現(xiàn)無論之前是否感染過PRRSV，豬接種含有PRRSV的血清后，再次感染PRRSV病毒可以減輕其患病癥狀。在使用此法時(shí)，應(yīng)考慮得到的血清中可能含有已知和未知的病原。雖然存在這樣的風(fēng)險(xiǎn)，但在美國(guó)的豬場(chǎng)使用較普遍。為了減少此風(fēng)險(xiǎn)，可以將采集的血清采用PCR方法排除含有其它病原（如PCV2）后再進(jìn)行注射。

5.3 凈化

在沒有疫苗可用，也沒有很好的治療方法的情況下，應(yīng)考慮將藍(lán)耳病凈化。要凈化藍(lán)耳病，必須具備以下三個(gè)條件：一是更新的種豬為PRRSV陰性；二是提供精液的公豬站應(yīng)為PRRSV陰性；三是采取合理、有效、低成本的生物安全措施。另外，可以考慮使用空氣過濾器，雖然成本較高，但與藍(lán)耳病長(zhǎng)期反復(fù)發(fā)作帶來的損失相比，還是值得的。