陳華英，李秀芳，金若敏，符勝光，姚廣濤

（上海中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全評(píng)價(jià)研究中心，上海 201203）

主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn) (Active Systemic Anaphylaxis，ASA)是考察注射劑Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)要求進(jìn)行的試驗(yàn)項(xiàng)目之一?！端幬镅芯考夹g(shù)指導(dǎo)原則》(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“指導(dǎo)原則”)中推薦ASA的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般選用豚鼠，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)臨床前中藥注射劑安全性評(píng)價(jià)過(guò)敏反應(yīng)的高陰性率與臨床出現(xiàn)較多過(guò)敏反應(yīng)的結(jié)果有不一致的現(xiàn)象，促使思考如何提高臨床前過(guò)敏性試驗(yàn)的靈敏度。有學(xué)者建議在進(jìn)行中藥注射劑犬長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)時(shí)密切關(guān)注相關(guān)的致敏反應(yīng)出現(xiàn)情況，摸索能充分反映注射劑安全性的評(píng)價(jià)方法［1］。目前也有文獻(xiàn)報(bào)道豚鼠對(duì)某些中藥藥源性的致敏原敏感性較差［2］。

近年來(lái)，在進(jìn)行食品、蛋白質(zhì)等的致敏性評(píng)價(jià)以及過(guò)敏癥動(dòng)物模型 (如哮喘、過(guò)敏性休克等)的研究時(shí)常采用大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象［3-12］。這就提示在對(duì)中藥注射劑的致敏性研究的主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)中，如果能篩選出敏感性較高的大鼠品系作為ASA的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)于提高中藥注射劑臨床前致敏性潛力預(yù)測(cè)將具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

在前期研究中發(fā)現(xiàn)，不同品系大鼠與過(guò)敏相關(guān)的一些細(xì)胞因子及免疫球蛋白水平在未致敏狀態(tài)時(shí)已存在較大差異，鑒于此，課題組采用了 BN、F344、SD、Wistar 4種品系大鼠，以常用的陽(yáng)性藥卵白蛋白 (Ovalbumin，OVA)和天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)作為受試物，進(jìn)行了不同品系大鼠ASA的研究。同時(shí)對(duì)清開(kāi)靈注射液和注射用燈盞花素進(jìn)行了豚鼠和4種品系大鼠的主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)。

1 材料

1.1 動(dòng)物 Hartley豚鼠，清潔級(jí)，雌性，體質(zhì)量300～340 g，購(gòu)于上海生物制品研究所，許可證編號(hào):SCXK(滬)2004-0003；BN、F344、 SD、Wistar大鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，160～180 g，由上海西普爾－必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證編號(hào):Scxk(滬)2008－0016。動(dòng)物飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，SPF級(jí)環(huán)境。

1.2 藥物 卵白蛋白，Sigma產(chǎn)品，購(gòu)于北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號(hào):DHO15-4；天花粉蛋白 (1.2 mg/mL，1 mL/支)，上海金山制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào): 070901；清開(kāi)靈注射液 (10 mL/支)，由某制藥廠生產(chǎn)，批號(hào):711901A；注射用燈盞花素 (50 mg/支)，由某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào):20080905。

2 方法

2.1 卵白蛋白、天花粉蛋白對(duì)動(dòng)物的主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)［1］

2.1.1 給藥劑量 根據(jù)“指導(dǎo)原則”規(guī)定:陽(yáng)性對(duì)照組給予1～5 mg/只卵白蛋白或已知致敏陽(yáng)性物質(zhì)，激發(fā)劑量一般為致敏劑量的2～5倍量［1］。本實(shí)驗(yàn)在前期試驗(yàn)的基礎(chǔ)上選擇卵白蛋白的致敏劑量5 mg/只，天花粉蛋白致敏劑量0.6 mg/kg，激發(fā)劑量分別為致敏劑量的2倍。臨用前用生理鹽水配制。

2.1.2 致敏 分別取 Hartley豚鼠，BN、F344、SD、Wistar大鼠，按體質(zhì)量隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、卵白蛋白組、天花粉蛋白組，每組6～10只。分別腹腔注射致敏劑量的卵白蛋白和天花粉蛋白，隔日1次，連續(xù)3次。陰性對(duì)照組注射等容量生理鹽水。

2.1.3 激發(fā) 在末次致敏后第14天，動(dòng)物靜脈注射進(jìn)行激發(fā)，各組激發(fā)劑量為致敏劑量的2倍，靜脈快速注射。觀察豚鼠注射后即刻至30 min內(nèi)的過(guò)敏反應(yīng)情況，并對(duì)動(dòng)物過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生強(qiáng)度進(jìn)行判斷。豚鼠全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)［1］為:“－”，過(guò)敏反應(yīng)陰性 (癥狀:正常)；“+”，過(guò)敏反應(yīng)弱陽(yáng)性(癥狀:躁動(dòng)、豎毛、顫抖、搔鼻)；“++”，過(guò)敏反應(yīng)陽(yáng)性 (癥狀:噴嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排糞、流淚)； “+++”，過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)陽(yáng)性(癥狀:呼吸困難、哮鳴音、紫癜、步態(tài)不穩(wěn)、跳躍、喘息、痙攣、旋轉(zhuǎn)、潮式呼吸)；“++++”，過(guò)敏反應(yīng)極強(qiáng)陽(yáng)性 (癥狀:死亡)。計(jì)算過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率，根據(jù)過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率和發(fā)生程度進(jìn)行綜合判斷。大鼠在激發(fā)后，除了參照豚鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀表觀察外，還應(yīng)觀察比較給藥組與陰性對(duì)照組大鼠反應(yīng)的不同。

2.1.4 補(bǔ)充試驗(yàn) 激發(fā)注射后，若發(fā)現(xiàn)有過(guò)敏反應(yīng)癥狀時(shí)，取健康未致敏動(dòng)物2只，自靜脈快速注射激發(fā)劑量的受試物，觀察受試物是否會(huì)引起的類(lèi)似過(guò)敏反應(yīng)癥狀，供結(jié)果判斷時(shí)參考。

2.2 清開(kāi)靈注射液、注射用燈盞花素的主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)［1］

2.2.1 給藥劑量 卵白蛋白的致敏劑量及激發(fā)劑量同2.1.1項(xiàng)；清開(kāi)靈注射液的致敏劑量為2.5 mL/kg；注射用燈盞花素:豚鼠的致敏劑量為62.5 mg/kg，大鼠的致敏劑量為25 mg/kg，激發(fā)劑量均為致敏劑量的2倍。

2.2.2 致敏 分別取 Hartley豚鼠，BN、F344、SD、Wistar大鼠，按體質(zhì)量隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、卵白蛋白組、清開(kāi)靈注射液組、注射用燈盞花素組，每組6～8只。腹腔注射致敏，陰性對(duì)照組給予等容量生理鹽水，隔日1次，共3次。

2.2.3 激發(fā) 末次致敏后第14天，動(dòng)物靜脈注射進(jìn)行激發(fā)，各組激發(fā)劑量為致敏劑量的2倍。同2.1.3項(xiàng)，觀察豚鼠注射后即刻至30 min內(nèi)的過(guò)敏反應(yīng)情況，并對(duì)動(dòng)物過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生強(qiáng)度進(jìn)行判斷，計(jì)算過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率，根據(jù)過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率和發(fā)生程度進(jìn)行綜合判斷。大鼠在激發(fā)后，除了參照豚鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀觀察外，還應(yīng)觀察比較給藥組與陰性對(duì)照組大鼠反應(yīng)的不同。

2.2.4 補(bǔ)充試驗(yàn) 同2.1.4項(xiàng)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率采用卡方檢驗(yàn)，過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度采用秩和檢驗(yàn)。

4 結(jié)果

4.1 卵白蛋白、天花粉蛋白的主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)

4.1.1 過(guò)敏反應(yīng)癥狀、發(fā)生率、發(fā)生程度 結(jié)果顯示，豚鼠對(duì)卵白蛋白和天花粉蛋白的主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)癥狀以呼吸困難，步態(tài)不穩(wěn)、紫癜，痙攣，潮式呼吸為主，偶見(jiàn)搔鼻、咳嗽癥狀；大鼠對(duì)卵白蛋白和天花粉蛋白的主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)癥狀以呼吸急促或呼吸困難、步態(tài)不穩(wěn)、紫疳、四肢軟癱、活動(dòng)減少為主，偶見(jiàn)喘息、痙攣。4種品系大鼠對(duì)卵白蛋白和天花粉蛋白所致主動(dòng)全身過(guò)敏的陽(yáng)性反應(yīng)癥狀比較一致，且與豚鼠的癥狀大致相近。見(jiàn)表1。在試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)大鼠進(jìn)行解剖發(fā)現(xiàn)，不同品系大鼠的胃腸道均有不同程度的充血。

表1 卵白蛋白和天花粉蛋白致Hartley豚鼠和4種品系大鼠主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)癥狀Tab.1 Symptoms of Hartley guinea pig and four rat strains induced by ovalbumin or trichosanthin in ASA test

豚鼠和4種品系大鼠對(duì)卵白蛋白和天花粉蛋白過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，與正常組比較，有極顯著差異 (P＜0.01)，4種品系大鼠對(duì)卵白蛋白或天花粉蛋白的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率與豚鼠比較，未見(jiàn)明顯差異。見(jiàn)表2。根據(jù)豚鼠全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)卵白蛋白和天花粉蛋白的過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)價(jià)，豚鼠對(duì)卵白蛋白均有極強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)；對(duì)天花粉蛋白有3只豚鼠產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)，3只產(chǎn)生極強(qiáng)陽(yáng)性過(guò)敏反應(yīng)；4種品系大鼠在本研究所使用劑量下，對(duì)兩種抗原的主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)度未見(jiàn)明顯的差異，均表現(xiàn)為強(qiáng)陽(yáng)性。見(jiàn)表3。

表2 卵白蛋白和天花粉蛋白致Hartley豚鼠和4種品系大鼠主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率Tab.2 Incidence of allergic response induced by ovalbumin or trichosanthin in Hartley guinea pig and four rat strains

4.1.2 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn) 取健康未致敏豚鼠及4種品系大鼠各4只，均分為兩組，分別靜脈注射激發(fā)劑量卵白蛋白和天花粉蛋白，給藥后動(dòng)物未出現(xiàn)類(lèi)似過(guò)敏反應(yīng)癥狀。

4.1.3 初步制定大鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀表 以4種品系大鼠對(duì)兩種過(guò)敏原的過(guò)敏反應(yīng)癥狀為主要基礎(chǔ)見(jiàn)表4、表5，參照豚鼠ASA過(guò)敏反應(yīng)癥狀表對(duì)應(yīng)觀察，將大鼠的陽(yáng)性反應(yīng)歸納、匯總分析后，初步制定了大鼠ASA過(guò)敏反應(yīng)癥狀表6。由于本研究中使用的動(dòng)物樣本數(shù)及受試物種類(lèi)有限，故對(duì)大鼠ASA試驗(yàn)中過(guò)敏反應(yīng)癥狀評(píng)價(jià)表的初步制定是在豚鼠ASA癥狀表的基礎(chǔ)上補(bǔ)充了大鼠的活動(dòng)減少、 四肢軟癱等重要癥狀。

表3 卵白蛋白和天花粉蛋白致Hartley豚鼠和4種品系大鼠主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)程度Tab.3 Degree of allergic response induced by ovalbumin or trichosanthin in Hartley guinea pig and four rat strains

表4 卵白蛋白致4種品系大鼠主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)不同癥狀的發(fā)生率Tab.4 Positive ratio of each symptom induced by onalbumin of four rat strains in ASA test

表5 天花粉蛋白致4種品系大鼠主動(dòng)全身過(guò)敏反應(yīng)不同癥狀的發(fā)生率Tab.5 Positive ratio of each symptom induced by trichosanthin of four rat strains in ASA test

表6 大鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀Tab.6 Symptoms of rat in ASA test

4.1.4 初步制定大鼠全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 將豚鼠與大鼠ASA評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)及癥狀進(jìn)行排序?qū)Ρ?，在豚鼠評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，制定了大鼠全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表7。

表7 大鼠全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Tab.7 Evaluation criteria standard of rat in ASA test

4.2 清開(kāi)靈注射液、注射用燈盞花素ASA試驗(yàn)研究

4.2.1 過(guò)敏反應(yīng)癥狀、發(fā)生率、發(fā)生程度 以清開(kāi)靈注射液攻擊不同種類(lèi)動(dòng)物后，動(dòng)物的表現(xiàn)也稍有不同。Hartley豚鼠過(guò)敏癥狀主要為顫抖、偶見(jiàn)雙耳發(fā)紅，BN大鼠出現(xiàn)躁動(dòng)不安，SD大鼠偶見(jiàn)呼吸急促，F(xiàn)344和Wistar大鼠未見(jiàn)異常反應(yīng)；注射用燈盞花素攻擊動(dòng)物后，Hartley豚鼠無(wú)明顯過(guò)敏反應(yīng)癥狀，BN大鼠出現(xiàn)躁動(dòng)不安，F(xiàn)344大鼠出現(xiàn)搔鼻、躁動(dòng)不安、紫疳的過(guò)敏反應(yīng)癥狀，SD大鼠僅見(jiàn)活動(dòng)減少，Wistar大鼠未見(jiàn)異常。見(jiàn)表8。在試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)動(dòng)物解剖發(fā)現(xiàn)，清開(kāi)靈注射液組的SD大鼠見(jiàn)胃腸道輕微充血，注射用燈盞花素組的BN、F344大鼠均見(jiàn)不同程度的胃腸道充血。

表8 清開(kāi)靈注射液和注射用燈盞花素致Hartley豚鼠和4種品系大鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀Tab.8 Symptoms of Hartley guinea pig and four rat strains induced by Qingkailing Injection or Breviscapine Injection in ASA test

清開(kāi)靈注射液的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率從高到低依次為:BN大鼠 (100%)、Hartley豚鼠 (50%)、SD大鼠 (16.67%)、F344和Wistar大鼠 (0)；注射用燈盞花素的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率從高到低依次為:BN大鼠 (100%)和F344大鼠 (100%)、SD大鼠 (83.33%)、Hartley豚鼠和 Wistar大鼠 (0)。見(jiàn)表9。

表9 清開(kāi)靈注射液和注射用燈盞花素致Hartley豚鼠和4種品系大鼠過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率Tab.9 Incidence of allergic response induced by Qingkailing Injection or Breviscapine Injection in Hartley guinea pig and four rat strains

根據(jù)豚鼠和大鼠的全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)Hartley豚鼠和4種品系大鼠各組的過(guò)敏反應(yīng)程度進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)清開(kāi)靈注射液激發(fā)后，Hartley豚鼠、BN大鼠出現(xiàn)弱陽(yáng)性過(guò)敏反應(yīng)，SD大鼠僅有一只出現(xiàn)呼吸急促，判斷為陰性，F(xiàn)344和Wistar大鼠均呈陰性反應(yīng)；注射用燈盞花素激發(fā)后，F(xiàn)344大鼠出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性過(guò)敏反應(yīng)，BN大鼠過(guò)敏反應(yīng)程度明顯低于F344大鼠，為弱陽(yáng)性過(guò)敏反應(yīng)，SD大鼠也為弱陽(yáng)性反應(yīng)，而Hartley豚鼠和Wistar大鼠均呈陰性反應(yīng)。見(jiàn)表10。

4.2.2 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn) 對(duì)動(dòng)物出現(xiàn)陽(yáng)性過(guò)敏反應(yīng)的注射劑，取健康未致敏BN大鼠4只，分兩組，分別尾靜脈注射激發(fā)劑量清開(kāi)靈注射液和注射用燈盞花素，另取健康未致敏F344大鼠2只，尾靜脈注射激發(fā)劑量注射用燈盞花素，給藥后動(dòng)物均未出現(xiàn)類(lèi)似過(guò)敏反應(yīng)癥狀。

5 討論

大量資料顯示［13-15］，在中藥注射劑所引發(fā)的不良反應(yīng)中，以免疫毒性最為常見(jiàn)，變態(tài)反應(yīng)為其主要毒性特征。在中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)中1979年—2010年的相關(guān)文獻(xiàn)的檢索中發(fā)現(xiàn)，共有50多種已上市的中藥注射劑在臨床使用時(shí)有過(guò)敏反應(yīng)的報(bào)道。雖然引起中藥注射劑過(guò)敏反應(yīng)的因素很多，如患者的過(guò)敏性體質(zhì)，注射劑成分的復(fù)雜，原藥材質(zhì)量及生產(chǎn)工藝的不同，注射劑中相關(guān)物質(zhì)如鞣質(zhì)等的含有量以及藥物的溶媒等都有可能導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)。考慮到中藥注射劑上市前均做過(guò)過(guò)敏性安全評(píng)價(jià)，這從另一方面提示，現(xiàn)行的過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)對(duì)于全面評(píng)價(jià)中藥注射劑的潛在致敏性可能存在一定的不足。

對(duì)表10 清開(kāi)靈注射液和注射用燈盞花素致Hartley豚鼠和4種品系大鼠過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度Tab.10 Degree of allergic response induced by Qinghailing Injection or Breviscapine Injection in Hartley guinea pig and four rat strains

目前， “指導(dǎo)原則”中推薦ASA試驗(yàn)的動(dòng)物“通常選用體質(zhì)量為300～400 g的豚鼠”。但有文獻(xiàn)報(bào)道，豚鼠模型在評(píng)價(jià)中藥注射劑過(guò)敏反應(yīng)中敏感性較差，郭姍姍等［16-17］用豚鼠和BN大鼠分別評(píng)價(jià)了雙黃連注射液和清開(kāi)靈注射液的過(guò)敏性，在ASA試驗(yàn)中，BN大鼠各組過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率均等于或高于豚鼠各組。Li Zhonggang等［18-19］使用BN大鼠評(píng)價(jià)了不同劑量雙黃連注射液的致敏性，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了初步研究，認(rèn)為BN大鼠較好的模擬了雙黃連注射液的過(guò)敏反應(yīng)，是一個(gè)理想的動(dòng)物模型。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于大鼠用于ASA的報(bào)道越來(lái)越多。

為了進(jìn)一步考察大鼠用于ASA試驗(yàn)的可行性，從以下幾個(gè)方面進(jìn)行了探討。

首先，關(guān)于大鼠是否可以用于主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn):本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，在較大劑量時(shí)，4種品系大鼠對(duì)兩種陽(yáng)性藥的過(guò)敏反應(yīng)癥狀、過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率基本一致，品系間未見(jiàn)明顯差異，且與豚鼠相近，而過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度4種品系大鼠間也基本一致，但略弱于豚鼠，未出現(xiàn)極強(qiáng)陽(yáng)性的反應(yīng)死亡。從陽(yáng)性藥定性的角度分析，初步認(rèn)為大鼠也可以作為ASA的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

關(guān)于大鼠與豚鼠對(duì)致敏原敏感性的分析:陽(yáng)性藥劑量較大時(shí)，4種品系大鼠與豚鼠用于主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)時(shí)，過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率和發(fā)生程度未見(jiàn)明顯區(qū)別；在同樣致敏和激發(fā)條件下的清開(kāi)靈注射液，BN大鼠的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率高于豚鼠，BN大鼠和豚鼠過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度沒(méi)有顯著差異；對(duì)于注射用燈盞花素，豚鼠用大于大鼠的劑量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈陰性，而B(niǎo)N、F344、SD大鼠則出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)。

其次，大鼠的不同品系對(duì)預(yù)測(cè)中藥注射劑潛在致敏性的影響:課題組從動(dòng)物遺傳背景、T細(xì)胞尤其是輔助性T細(xì)胞1與輔助性T細(xì)胞2(Th1/Th2)細(xì)胞因子分布格局［20］、國(guó)內(nèi)易得和前期研究結(jié)果等方面綜合考慮，挑選了兩個(gè)近交系大鼠 BN、F344和兩個(gè)封閉群大鼠 SD、Wistar。結(jié)果顯示，對(duì)于清開(kāi)靈注射液，4種品系大鼠的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率從高到低依次為:BN大鼠＞SD大鼠＞F344、Wistar大鼠；對(duì)于注射用燈盞花素，過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率為F344、BN大鼠＞SD大鼠＞W(wǎng)istar大鼠，而且F344大鼠對(duì)注射用燈盞花素表現(xiàn)出了強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，發(fā)生程度顯著高于其余3個(gè)品系大鼠。以上結(jié)果顯示，不同中藥注射劑對(duì)不同品系動(dòng)物的敏感性存在差異，因此在選用大鼠評(píng)價(jià)中藥注射劑的潛在致敏性時(shí)，應(yīng)注意大鼠的品系。

本研究對(duì)結(jié)果判斷中著重注意了對(duì)類(lèi)過(guò)敏的排除:凡是在藥物激發(fā)注射后，動(dòng)物出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)癥狀時(shí)，均按“指導(dǎo)原則”推薦的方法，進(jìn)行了補(bǔ)充試驗(yàn)，排除了由于受試物作用引起的類(lèi)似過(guò)敏反應(yīng)癥狀。

本實(shí)驗(yàn)為大鼠用于主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)評(píng)價(jià)中藥注射劑提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究初步提示，不同品系大鼠對(duì)不同中藥注射劑潛在致敏能力的敏感性不同，可能與中藥注射劑的復(fù)雜體系有關(guān)。對(duì)此我們將優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)，增加更多的中藥注射劑，進(jìn)一步深入研究不同品系大鼠對(duì)注射劑敏感性不同的現(xiàn)象。

綜合分析，主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)中補(bǔ)充大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物能進(jìn)一步提高對(duì)中藥注射劑過(guò)敏反應(yīng)評(píng)價(jià)的靈敏性與全面性，有助于更全面的預(yù)測(cè)藥物潛在的致敏性。

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