高旭紅

（廣東醫(yī)學(xué)院附屬南山醫(yī)院，廣東 深圳 518052）

目前，全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀在我院已開始應(yīng)用，為了能更準(zhǔn)確地了解、認(rèn)識(shí)和使用全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀，故將其VCS分類技術(shù)和外周血片血細(xì)胞形態(tài)學(xué)技術(shù)進(jìn)行比較，評(píng)估兩種分類技術(shù)對(duì)正常WBC有無顯著性差異。

1 資料與方法

1.1 一般資料

100例健康體檢人群，均為我院2010年1～3月份體檢者，其中男性62例，女性38例，年齡22～61歲。

1.2 儀器與試劑

BECKMAN COULTER Hmx 全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀。OLYMPUSCH2顯微鏡，溶血素、分類包、清洗液、稀釋液等試劑均由貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司提供。

1.3 方法

采集100例檢測(cè)對(duì)象靜脈血3ml。經(jīng)EDTA-K2抗凝，利用BECKMAN COULTER Hmx 全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀對(duì)100例各自進(jìn)行5次重復(fù)測(cè)定，分別求算出100例的各自成熟中性粒細(xì)胞（N）、淋巴細(xì)胞（L）、單核細(xì)胞（M）、嗜酸性粒細(xì)胞（E）、嗜堿性粒細(xì)胞（B）、百分比值的平均值（Nc、1c、Mc、Ec、Bc）：標(biāo)準(zhǔn)差值（SDNC、SDLC、SDMC、SDEC、SDBC）和變異百分?jǐn)?shù)（CVNC、CVLC、CVMC、CVEC、CVBC）。再用100例抗凝血各自制成五張外周血片，經(jīng)染色后，油鏡下分類500個(gè)，分別求出100例各自的成熟中性粒細(xì)胞（N）淋巴細(xì)胞（L）單核細(xì)胞（M）嗜酸性粒細(xì)胞（E）嗜堿性粒細(xì)胞（B）百分比值的平均值（N、L、M、E、B），標(biāo)準(zhǔn)差值（SDN、SDL、SDM、SDE、SDB）百分變異數(shù)（CVN、CVL、CVM、CVE、CVB）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

通過BECKMAN COULTER Hmx全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀VCS技術(shù)與外周血血細(xì)胞形態(tài)學(xué)對(duì)100例正常WBC分類后，對(duì)兩種技術(shù)分類出的5類百分比以（C±S）-（±s）表示，采用t檢驗(yàn)以P＞0.05為無顯著性差異，具有可比性。

2 結(jié) 果

經(jīng)BECKMAN COULTER Hmx全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀VCS技術(shù)對(duì)100例正常WBC各自5次重復(fù)分類每例CVNC均＜2%、CVLC均＜3.4%、CVMC均＜5%。結(jié)果均可接受CVEC和CVBC＞10%，經(jīng)外周血片細(xì)胞形態(tài)學(xué)技術(shù)對(duì)100例正常WBC各自5次重復(fù)分類，每例CVN均＜3.7%、CVL＜3.65%、CVM＜5%，結(jié)果均可接受，CVE和CVB均＞10%。鑒于嗜酸性粒細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞在WBC分類中所占百分比及小，百分變異數(shù)不可接受，故只對(duì)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞進(jìn)行比較。VCS技術(shù)和細(xì)胞形態(tài)學(xué)技術(shù)對(duì)100例正常WBC分類比較見表1。

由表1可見，經(jīng)兩種技術(shù)對(duì)100例正常WBC進(jìn)行比較，其中性粒細(xì)胞（N）無顯著性差異（P＞0.05），淋巴細(xì)胞（L）無顯著性差異（P＞0.05），單核細(xì)胞（M）無顯著性差異（P＞0.05）。

3 討 論

全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀VCS技術(shù)的檢測(cè)原理：

3.1 應(yīng)用電阻抗原理測(cè)量細(xì)胞體積（V）技術(shù)，應(yīng)用電導(dǎo)性（C）技術(shù)。檢測(cè)原理是：根據(jù)細(xì)胞壁能產(chǎn)生高頻電流的性能，采用高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，即以細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的比例、細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度，來辨別體積相同、但性質(zhì)不同的兩個(gè)細(xì)胞群體，但當(dāng)高頻電流檢測(cè)時(shí)，可根據(jù)兩種細(xì)胞的核漿比例不同而呈現(xiàn)不同檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行區(qū)分。

表1 VCS技術(shù)與細(xì)胞形態(tài)學(xué)技術(shù)對(duì)正常WBC分類比較

3.2 應(yīng)用光散射（S）技術(shù)。原理是：來自激光源的單色光直接掃描進(jìn)入計(jì)數(shù)敏感區(qū)的每一個(gè)細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞產(chǎn)生的不同角度的散射光，可提供細(xì)胞形態(tài)、核結(jié)構(gòu)等光散射信息，并能鑒別細(xì)胞顆粒的構(gòu)型和質(zhì)量：光散射可區(qū)別粒細(xì)胞的類型。而細(xì)胞形態(tài)學(xué)原理是對(duì)WBC胞膜、胞漿、胞核的結(jié)構(gòu)及組成成分進(jìn)行組化染色后在顯微鏡下進(jìn)行分類，由于正常白細(xì)胞的理化性質(zhì)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)等大致相似。因而兩種技術(shù)對(duì)正常WBC的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞分類無顯著性差異，具有可比性。