范偉全 韓 靜 譚 鵬 王春國 鄔瑞光 劉鵬鵬 劉永剛 于廣池
(內(nèi)蒙古民族大學(xué),內(nèi)蒙古 通遼 028000)
長白山紅景天是生長于長白山脈的一種珍稀野生植物,味甘、澀、寒,紅景天苷為其主要活性成分,具有顯著的抗輻射、抗衰老、抗缺氧和免疫調(diào)節(jié)的功效,對心血管系統(tǒng)、肝、腎、神經(jīng)細(xì)胞有保護(hù)作用〔1,2〕。本實驗研究長白山紅景天抗疲勞作用,為進(jìn)一步開發(fā)和利用長白山紅景天提供實驗基礎(chǔ)。
1.1 材料 清潔級健康雄性昆明種小鼠,體重18~22 g,由內(nèi)蒙古民族大學(xué)實驗動物中心提供。標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物飼料喂食,實驗動物分籠飼養(yǎng),每籠10只,自由飲食、飲水,適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d。標(biāo)準(zhǔn)室溫,室內(nèi)照明控制在12 h/12 h光暗周期節(jié)律。長白山紅景天購于長春華迪生物制品有限公司,褐色粉末,紅景天苷純度為5%。乳酸(LD)、肝糖原、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)、血清尿素氮(BUN)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。
1.2 實驗動物分組與用藥 選小鼠80只,實驗前稱小鼠體重,按體重隨機(jī)分為8組,每組10只。運(yùn)動對照組和安靜對照組灌胃生理鹽水。第1~6長白山紅景天組每天灌胃的劑量分別為:2、6、10、14、18、22 g/kg。各組每次灌胃量均為 0.3 ml,每天1次,持續(xù)4 w。各組按上述順序分別用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ表示。
1.3 方法
1.3.1 運(yùn)動耐力實驗 除安靜組外,取每組半數(shù)小鼠末次給藥30 min后,放置于水溫(26±1)℃,水深20 cm的游泳槽內(nèi),記錄小鼠自游泳開始至力竭死亡的時間。
1.3.2 標(biāo)本采集 小鼠末次灌胃后30 min,放入(26±1)℃的水中游泳90 min,出水后,立即眼球取血,肝素抗凝,用于測定全血LD濃度。小鼠末次灌胃后30 min,放入(26±1)℃的水中游泳90 min,出水后休息60 min,眼球采血,肝素抗凝,用于測定LDH活力及血清BUN濃度。取肝組織約200 mg,用冰生理鹽水洗去血漬,置于冰箱中冷凍保存?zhèn)溆?,用于測定小鼠血清SOD活力、肝糖原等指標(biāo)。均按試劑盒使用說明進(jìn)行測定。
1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件處理,多組間比較采用方差分析,兩組間比較采用t檢驗。
2.1 對小鼠生長發(fā)育的影響 各組小鼠活潑,精神狀態(tài)好,皮毛光滑,食欲佳,大便正常,體重正常增加,無死亡。
2.2 對力竭游泳時間、LD、肝糖原、LDH、SOD、血清BUN水平的影響 見表1。各劑量組各指標(biāo)間與安靜對照組、運(yùn)動對照組相比存在差異。第6組在力竭游泳時間、LD、LDH、肝糖原水平上差異顯著(P<0.05),第7組SOD、血清BUN水平上差異顯著(P<0.05),其他劑量組間無顯著差異(P>0.05)。
表1 各用藥劑量對運(yùn)動后小鼠力竭游泳時間、LD、肝糖原、LDH、SOD、血清BUN水平的影響( s ,n=10)
表1 各用藥劑量對運(yùn)動后小鼠力竭游泳時間、LD、肝糖原、LDH、SOD、血清BUN水平的影響( s ,n=10)
與Ⅰ、Ⅱ組比較:1)P<0.05
組別 力竭游時(min)LD(mmol/L)LDH(U/L)肝糖原(mg/g)SOD(U/mg)BUN(mmol/L)Ⅰ7.43±2.05Ⅱ 112±14.6 12.74±1.97 427.6±82.9 8.73±1.76 376.7±32.65 9.53±1.57Ⅲ 128±12.7 8.13±1.22 864.9±124.5 8.96±2.05 412.6±26.81 9.27±1.32Ⅳ 167±21.4 7.51±1.23 876.8±110.6 9.17±1.89 456.3±28.43 9.04±1.68Ⅴ 188±18.9 6.81±1.43 789.6±102.7 9.51±2.22 472.9±31.36 8.64±1.42Ⅵ 201±16.31) 6.57±1.371) 648.3±104.91) 10.26±1.671) 491.7±31.47 8.72±1.74Ⅶ 190±18.6 6.72±1.44 679.7±125.4 9.85±2.32 495.9±26.651) 8.32±1.561)Ⅷ 192±14.7 6.83±1.89 700.5±111.8 10.11±2.26 4 0 6.45±1.04 510.8±65.7 8.21±1.98 348.4±28.54 87.88±26.78 8.58±1.46
疲勞的發(fā)生與人體某些生化指標(biāo)密切相關(guān)〔3〕。因此,可以應(yīng)用與疲勞產(chǎn)生有關(guān)的生物化學(xué)指標(biāo)來評價食品和藥品的抗疲勞作用。運(yùn)動耐力的提高是抗疲勞能力加強(qiáng)最直接的表現(xiàn),游泳時間的長短可以反映動物的疲勞程度。本實驗結(jié)果顯示長白山紅景天能夠顯著延長小鼠力竭游泳時間,降低血清LD含量和血清BUN含量,提高肝糖原含量,升高SOD活力和LDH活力。證明長白山紅景天具有明顯的抗疲勞活性。
疲勞的發(fā)生是個極其復(fù)雜的過程。從能量物質(zhì)代謝以及血清酶學(xué)變化等角度分析抗疲勞機(jī)制是最有效的辦法〔4,5〕。本實驗結(jié)果顯示,長時間運(yùn)動,糖異生加快,運(yùn)動肌不斷吸收血糖,肝、肌糖原含量代償性升高,這是機(jī)體糖儲備對長期運(yùn)動的適應(yīng)性變化,因此提高糖儲備對提高運(yùn)動能力有重要意義。血LD是糖酵解的主要代謝產(chǎn)物,血LD的堆積是引起疲勞的重要原因,當(dāng)能量平衡遭到破壞后,機(jī)體運(yùn)動負(fù)荷的適應(yīng)性降低及蛋白質(zhì)和含氮化合物的分解代謝作用加強(qiáng),血清尿素氮增加越明顯。本實驗可見,長白山紅景天具有增加機(jī)體肝糖原儲備的加快運(yùn)動后血LD水平恢復(fù);減少血清BUN產(chǎn)生的作用。長白山紅景天還可以通過增加SOD活力、加速自由基的清除,從而減少細(xì)胞損傷,延緩疲勞發(fā)生。
1 吳 丹.紅景天的臨床功效和藥理作用研究進(jìn)展〔J〕.中藥臨床學(xué)雜志,2010;2(4):6-7.
2 滕靜如,熊任鵬,肖 誠,等.紅景天的現(xiàn)代藥理學(xué)研究進(jìn)展〔J〕.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2006;40(12):319-20.
3 王瑞元.運(yùn)動生理學(xué)〔M〕.北京:人民體育出版社,2002:112-3.
4 Castell LM,Newsholme EA.The relation between glutamine and the immunodepression observed in exercise〔J〕.Amino Acids,2001;20(1):49-61.
5 Maria L.Oxidative stress,exercise and antioxidant supplementation〔J〕.Toxicology,2003;189:41-4.