陸 宇 陳 瑜 周 希

（1.江蘇省無錫市惠山區(qū)錢橋街道畜牧獸醫(yī)站，無錫 214000；2.江蘇省無錫市惠山區(qū)畜牧獸醫(yī)站，無錫 214000）

高致病性禽流感（HPAI）是當前世界范圍內對養(yǎng)禽業(yè)及公共衛(wèi)生威脅最大的A類烈性動物傳染病。近幾年來，該病在全球范圍擴散蔓延，據(jù)報道已有60多個國家和地區(qū)發(fā)生疫情或分離到病毒。2004年以來，我國部分地區(qū)也出現(xiàn)了疫情，造成重大經濟損失和社會影響。采取疫苗免疫是我國目前防控HPAI的主要措施之一。為了解雛雞禽流感（AI）母源抗體和免疫雞AI抗體產生的消長情況，合理制定有效免疫程序，提高免疫效果，我們于2011年5月起，選用禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗，對免疫雞進行了HI抗體消長跟蹤監(jiān)測，現(xiàn)報告如下：

1 材料與方法

1.1 試驗動物

在無錫惠山區(qū)某小型封閉養(yǎng)雞場，選定300只1日齡苗雞（種雞經過禽流感疫苗免疫），在一獨立雞舍，分5個試驗組，每組60只分隔飼養(yǎng)，飼料、日常管理不變。

1.2 標準試劑

均由青島異邦生產。禽流感H5N1（Re-5）抗原，批號20110328；禽流感H5N1（Re-5）陽性血清，批號20110328；禽流感H5N1（Re-5）陰性血清，批號20110328；禽流感H5N1（Re-4）抗原，批號20110328；禽流感H5N1（Re-4）陽性血清，批號20110328；禽流感H5N1（Re-4）陰性血清，批號20110328。

1.3 疫苗

禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗，由青島異邦生產，批號2010125。

1.4 母源抗體測定

分別于1、3、7、14、28日齡隨機每次選苗雞30只，心臟或翅靜脈采血，分離血清備用。

1.5 疫苗2免后抗體產生情況及維持時間觀察

根據(jù)一免后抗體的消長規(guī)律，確定2免時間，采用肌注進行2免，然后觀察其抗體消長規(guī)律。

1.6 不同免疫劑量免疫效果試驗

選取3個實驗組，分別肌內注射禽流感H5N2疫苗0.3ml、0.5ml、0.7ml，然后分別于第3、7、14、21、28、56 d翅靜脈采血進行血清抗體檢測，觀察其抗體產生消長情況。

1.7 HA和HI試驗

按常規(guī)法在96孔110°的V型微量反應板上進行。

2 結果

2.1 雞禽流感母源抗體消長情況

試驗雞禽流感母源抗體消長情況詳見圖1。

圖1 禽流感母源抗體水平消長情況曲線圖

2.2 禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗免疫后抗體消長情況

試驗雞只注射禽流感疫苗后抗全消長情況詳見圖2。

圖2 禽流感免疫后抗體水平消長曲線圖

2.3 不同免疫劑量免疫后抗體檢測情況

對不同免疫劑量免疫后的抗體情況進行檢測，結果詳見表1。

表1 不同免疫劑量對H5 HI抗體的檢測 （log2）

3 結論與討論

（1）試驗表明，苗雞AI母源抗體在3日齡達到最高值，基本接近母體水平，隨后迅速下降，7日齡接近母體的一半，14日齡時母源抗體大多在2Log2以下，28日齡基本檢不到母源抗體，提示有較高母源抗的苗雞應在14日齡左右首免比較好。

（2）從圖2可看到，禽流感免疫抗體平均水平在首免后第18 d達到高峰5.3 log2，以后開始下降，第35 d回落到4 log2的保護臨界值，而在一免后第3～4周進行加強免疫后，抗體水平能一直保持在保護值以上，且能維持相當長一段時間，免疫效果確實。因此，在不能通過免疫監(jiān)測指導免疫的地區(qū)，為確保AI免疫質量，應在首免后3～4周再加強免疫1次，實施2次免疫。

（3）從表1可以看出，禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗劑量較大的試驗組產生免疫抗體的速度和滴度都要高于劑量較少的組，通過對不同時期部分雞的剖檢也未發(fā)現(xiàn)因免疫劑量加大而發(fā)生肉眼可見的吸收障礙。因此，我們可推廣應用在平常免疫時使用推薦劑量，而在緊急免疫時使用加大劑量的免疫方法。