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不同消毒劑的殺菌效果試驗(yàn)觀察

2012-11-23 07:06:48郝智慧王英俊劉元元龐云露
中國獸醫(yī)雜志 2012年10期
關(guān)鍵詞:稀釋液懸液消毒劑

邱 梅,郝智慧,沈 巍,王英俊,劉元元,龐云露

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)化學(xué)與藥學(xué)院,山東 青島266111;2.青島康地恩藥業(yè)股份有限公司,山東 青島266061)

目前,畜禽業(yè)應(yīng)用較多的是化學(xué)消毒劑,主要分為鹵素類(氯制劑、碘制劑、溴制劑)、醛類、酚類、醇類、氧化劑類、表面活性劑類、酸堿類等。其作用機(jī)理就是改變微生物賴以生存的環(huán)境,致使微生物的內(nèi)外結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,主要代謝機(jī)能出現(xiàn)障礙,生長(zhǎng)發(fā)育受阻,從而喪失活性,失去致病力[1]。其中,過氧化物類消毒劑在畜禽養(yǎng)殖過程中應(yīng)用較多,效果突出。

過硫酸氫鉀復(fù)合物是一種新型過氧化物類消毒劑,具有很強(qiáng)的氧化能力,其水溶液接近中性,比較適合各種水體消毒,溶解后產(chǎn)生各種高活性小分子自由基、活性氧等衍生物[2],在水體中很少會(huì)形成有毒副產(chǎn)物[3]。因其具有非常強(qiáng)大而有效的非氯氧化能力,使用和處理過程符合安全和環(huán)保要求,因而被廣泛的應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)和消費(fèi)領(lǐng)域。通常狀態(tài)下比較穩(wěn)定,當(dāng)溫度高于65℃時(shí)易發(fā)生分解反應(yīng),比較活潑,易于參與多種化學(xué)反應(yīng),可作為氧化劑、漂白劑、催化劑、消毒劑、蝕刻劑等。

新型消毒劑-衛(wèi)克,其主要成分為過硫酸氫鉀復(fù)合物、氯化鈉等。為了解其殺菌性能,以杜邦衛(wèi)可消毒劑為對(duì)照,進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室殺菌效果觀察。

1 材料與方法

1.1 藥物 試驗(yàn)藥物:衛(wèi)克(含量25%,批號(hào):20110312,由青島康地恩藥業(yè)股份有限公司提供);對(duì)照藥物:衛(wèi)可(含量25%,批號(hào):VKNS100704,美國杜邦)。

1.2 菌株 大腸桿菌,為本實(shí)驗(yàn)室臨床分離菌株。

1.3 消毒劑溶液的配制 衛(wèi)克消毒劑:按推薦使用方法,用硬水配制成濃度為1∶200、1∶400、1∶600、1∶800的試驗(yàn)用溶液;衛(wèi)可消毒劑:按推薦使用量,用硬水配制成1∶400、1∶600、1∶800的試驗(yàn)用溶液。

1.4 方法

1.4.1 懸液定量殺菌試驗(yàn)[3]取消毒試驗(yàn)用無菌小瓶,先加入0.5mL試驗(yàn)用菌懸液,再加入0.5 mL有機(jī)干擾物質(zhì)(20%牛血清白蛋白),混勻,置20℃±1℃水浴中2、5、10、30min后,用無菌吸管吸取上述濃度消毒液(1.3項(xiàng)下配制的不同濃度消毒液)4.0mL注入其中,迅速混勻并立即記時(shí)。待試驗(yàn)菌與消毒劑相互作用至各預(yù)定時(shí)間,分別吸取0.5mL試驗(yàn)菌與消毒劑混合液加于4.5mL經(jīng)滅菌的中和劑中,混勻。各管試驗(yàn)菌與消毒劑混合液經(jīng)加中和劑作用10min后,分別吸取0.2mL樣液,按活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)方法測(cè)定存活菌數(shù),每管樣液接種2個(gè)平皿即可。如平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)較多時(shí),可進(jìn)行系列10倍稀釋后,再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。同時(shí)用稀釋液代替消毒液,進(jìn)行平行試驗(yàn),作為陽性對(duì)照。

所有試驗(yàn)樣本均在37℃溫箱中培養(yǎng),對(duì)細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)24h觀察最終結(jié)果。

1.4.2 有機(jī)物干擾殺菌試驗(yàn) 采用懸液定量殺菌法,在20℃±1℃水浴中,不同濃度消毒劑溶液(衛(wèi)克:1∶200、1∶400、1∶600、1∶800,衛(wèi)可:1∶400)分別對(duì)含0%、25%、50%滅菌牛奶的菌液作用10、30min,觀察、計(jì)算其殺菌效果。

1.4.3 溫度對(duì)殺菌效果影響試驗(yàn) 采用懸液定量殺菌法,不同濃度消毒劑溶液(衛(wèi)克:1∶200、1∶400、1∶600、1∶800,衛(wèi)可:1∶400)在不同溫度(13℃±0.3℃、22℃±2℃、30℃±2℃)水浴中對(duì)菌液作用10、30min,觀察、計(jì)算其殺菌效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 懸液定量殺菌結(jié)果 見表1。

表1 殺菌試驗(yàn)結(jié)果

3次綜合試驗(yàn)結(jié)果由表1可知,衛(wèi)克1∶200稀釋液分別作用2、5、10、30min均可將菌全部殺滅,達(dá)100.0%殺菌率;1∶400稀釋液作用10、30min可全部殺滅菌液;1∶600和1∶800稀釋液殺菌效果較差。衛(wèi)可1∶400作用10、30min可達(dá)100.0%殺菌率。通過1∶600和1∶800稀釋液的殺菌效果可以看出,衛(wèi)克和衛(wèi)可殺菌效果基本一致。

2.2 有機(jī)物干擾殺菌結(jié)果 見表2。

綜合3次試驗(yàn)結(jié)果由表2可知,衛(wèi)克1∶200稀釋液作用10、30min對(duì)不同濃度有機(jī)物干擾菌懸液均能全部殺滅,1∶400稀釋液作用30min也能達(dá)到100.0%的殺菌率。各消毒劑稀釋液對(duì)含25%干擾物的菌懸液消毒效果比含0%和50%的差。

2.3 溫度對(duì)殺菌效果的影響試驗(yàn)結(jié)果 見表3。

表3結(jié)果顯示,衛(wèi)克消毒劑1∶200稀釋度作用10、30min在高中低溫度下均能達(dá)到100.0%的殺菌率;1∶400作用30min均能全部殺滅;1∶600稀釋液在30℃±2℃下作用30min可達(dá)100.0%的殺菌率。衛(wèi)可1∶400稀釋液在22℃±2℃和30℃±2℃下作用10、30min殺菌率均為100.0%。兩種消毒劑不同作用濃度在22℃±2℃和30℃±2℃下的殺菌效果均好于13℃±0.3℃。

表2 有機(jī)物干擾殺菌試驗(yàn)結(jié)果

表3 不同溫度對(duì)消毒劑殺菌效果影響

3 討論與結(jié)語

近年來隨著工業(yè)研制方法的改進(jìn),過硫酸氫鉀復(fù)合鹽的應(yīng)用逐漸受到人們的關(guān)注。過硫酸氫鉀復(fù)合鹽分解后的產(chǎn)物硫酸鹽可通過人及動(dòng)物的肝臟及泌尿系統(tǒng)排出體外,對(duì)環(huán)境無任何有害殘留。與過氧化氫、過氧乙酸等消毒劑相比,過硫酸氫鉀復(fù)合鹽晶體穩(wěn)定,易于保存和運(yùn)輸,在任何使用場(chǎng)合均可現(xiàn)場(chǎng)配制,且對(duì)水質(zhì)無嚴(yán)格要求[4]。

其作用機(jī)制:與靶物接觸后釋放高活性過氧化自由基,進(jìn)而破壞微生物膜的通透性,使蛋白質(zhì)變性,酶失活,DNA和RNA結(jié)構(gòu)斷裂,同時(shí)生成的硫酸鹽具有協(xié)助滲透作用,可作為皮膚消毒及治療的輔助藥劑。過硫酸氫鉀復(fù)合鹽不僅可以通過其氧化作用殺滅微生物,而且可以清除水中的有機(jī)物。

陽艷林等(2008)[5]研究顯示,以含過硫酸氫鉀1 250mg/L的該復(fù)合消毒劑溶液,對(duì)溶血性鏈球菌和多殺性巴桿菌作用2.5min,殺滅對(duì)數(shù)值>5.00。用含過硫酸氫鉀1 250mg/L該消毒液,對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作用5min,殺滅對(duì)數(shù)值>5.00。用含過硫酸氫鉀835mg/L該消毒液作用15min,對(duì)大腸桿菌可達(dá)到完全殺滅。用含過硫酸氫鉀1 000 mg/L該消毒劑溶液作擦拭消毒并作用10min,對(duì)模擬現(xiàn)場(chǎng)物體表面上人工污染的大腸桿菌殺滅對(duì)數(shù)值>3.0。將過硫酸氫鉀復(fù)合消毒劑密封儲(chǔ)存于37℃60d,其有效成分含量下降率為6.09%。

張躍華等(2005)[2]研究結(jié)果,其濃度為10~60 mg/L過硫酸氫鉀復(fù)合鹽對(duì)不同種類微生物懸液的作用5min,對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的殺滅率均為100%,對(duì)白色念珠菌的殺滅率大于99.5%,此作用條件下未觀察到其對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢的殺滅作用;160mg/L過硫酸氫鉀復(fù)合鹽作用30 min,未見對(duì)乙肝病毒表面抗原的滅活作用。在一定作用條件下過硫酸氫鉀復(fù)合鹽對(duì)細(xì)菌繁殖體有良好的殺滅作用,對(duì)真菌也有一定的殺滅作用,但未見其對(duì)細(xì)菌芽孢及乙肝病毒表面抗原的滅活作用。

嚴(yán)曉玲(2007)[6]研究顯示,5%過硫酸氫鉀復(fù)合鹽水溶液25℃時(shí)有良好的殺菌作用,殺滅細(xì)菌的繁殖體需2min,作用15min可將細(xì)菌芽孢全部殺滅。作用30min可將HBsAg完全滅活。

研究結(jié)果表明,衛(wèi)克消毒劑1∶200(相當(dāng)于1 250mg/L)稀釋液在室溫下作用2min即可將細(xì)菌全部殺滅,殺菌效果不受有機(jī)物和溫度影響;1∶400(相當(dāng)于625mg/L)稀釋液在室溫下作用10min殺菌率可達(dá)100.0%,30min殺菌效果不受有機(jī)物和溫度影響;1∶600(相當(dāng)于約416.7mg/L)稀釋液在室溫下作用30min殺菌率達(dá)99.8%,30℃±2℃下作用30min可達(dá)100.0%的殺菌率。同濃度(1 250 mg/L)下殺菌時(shí)間比陽艷林等(2008)的研究短。本產(chǎn)品具有很好的殺菌效果,高濃度消毒時(shí)不受有機(jī)物和環(huán)境溫度的影響,低濃度使用時(shí)可通過提高其作用時(shí)間和環(huán)境溫度來提高其消毒效果。

[1]馬賢坤,車娟娟.消毒滅源 健康養(yǎng)殖[J].山東畜牧獸醫(yī),2007(5):70-72.

[2]張躍華,趙永勛.過硫酸氫鉀復(fù)合鹽消毒作用實(shí)驗(yàn)研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2005,9(1):40.

[3]Virender S K .Potassiumfemate(VI):an environmentally friendly oxidant[J].Advances in Environmental Reserch,2002,2:143.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部,消毒技術(shù)規(guī)范(2002版)[M].2002.

[5]陽艷林,于洪忠,徐輝.過硫酸氫鉀復(fù)合消毒劑殺菌效果觀察[J].中國消毒學(xué)雜志,2008,25(2):150-152.

[6]嚴(yán)曉玲.消毒劑過硫酸氫鉀復(fù)合鹽性能的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2007,11(4):631,679.

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