張騫
潰瘍性結腸炎是臨床上的一種常見病癥,往往伴隨有腹痛、便秘,粘連血便等,在病理機理上屬于非特異性的,痢疾中也可能發(fā)生,在治療的過程中容易反復發(fā)作,本次研究針對這一病癥從中藥白術黃芩湯及有效部位組方中提取藥液進行試驗,觀察其對潰瘍性結腸炎的使用效果,試驗對象為小鼠,通過建模、灌模的方式進行觀察,研究其臨床應用效果。
1.1 一般資料 本次研究選取SPE級NIH雄性小鼠,小鼠在4~5周左右的生長時間,屬于人工飼養(yǎng)的實驗小鼠。
1.2 器材和材料 藥物材料:研究中使用的白術、黃芩選自中藥藥店,白術黃芩湯按照1∶8的比例對比蒸餾水進行配置,組方與白術黃芩配伍甘草,白術黃芩配比甘草為10∶7∶3的比例進行,通過水煎法進行蒸煮,之后冷卻沉淀4 h左右,使用紗布進行3次過濾,最后按1∶6及1∶4的比例完成實驗用藥的濃度比例調配。實驗過程中的三硝基苯磺酸(TNBS),十六烷基三甲基溴化胺和鄰聯(lián)二茴香胺選自Sigma公司生產(chǎn)的產(chǎn)品,本次研究中所用的藥物經(jīng)過實驗檢測,證實其藥用效果符合臨床需要,為合格產(chǎn)品。
器材:研究過程中使用到的儀器器材主要有紫外可見光分光光度計、D型水浴鍋、電子分析天平、電熱恒溫真空干燥箱。
1.3 方法 實驗進行的過程中需要首先制作小鼠模型,其次就是藥物的配伍,使用的藥物主要為蒸餾水、柏樹黃芩湯、有效組方等,其中有效組房為3次提取之后的結晶物。在實驗的過程中主要有3個方面的內(nèi)容,第一步為實驗所需的小鼠建模,抽取40只小鼠,將40只小鼠分為4組,每組10只:正常組、模型組、白術黃芩湯組、有效成分組。在配伍的過程中,正常組的小鼠為正常健康小鼠,其數(shù)據(jù)指標可以作為正常參考,而其他3小的小鼠通過動物造模的方法使其形成潰瘍性結腸炎。小鼠禁食24 h之后使用1%戊巴比妥鈉(45 mg/kg)進行腹腔注射麻醉,正常組和模型組的小鼠在實驗的過程中為其注入蒸餾水;白術黃芪組的小鼠灌入實驗中制作的水煎劑藥液,通過灌腸的方法將藥液灌入小鼠的胃部;有效成分組的小鼠在實驗的過程中灌入其提取物0.4/kg,通過肝門插入,灌入小鼠的腸胃道,灌入次數(shù)為1次/d,7 d為1個觀察療程。
2.1 檢測 本次研究中,對潰瘍性結腸炎的實驗研究標準主要依據(jù)MPO活性檢測,在個小組小鼠灌藥完成后,抽取100 mg小鼠的結腸組織,在切碎之后置入2 ml十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)緩沖液中,用力搖勻之后,凍溶3次,4000 r/min離心15 min,取上清液0.1 ml,加入50 mmol/L的PBS2.9 ml中于460 nm處測吸光率A值,3 min后再次測定,取其兩次差值。差值等比3之后為其MPO活性值。
在實驗完成之后,4組小鼠的活性差別較大,其中正常組和模型組的小鼠在治療之后的活性升高,特別是模型組小鼠的MOP活性升高顯著,P<0.01,而白術黃芩組和有效成分小組的小鼠在實驗完成后的MOP活性明顯降低,從臨床應用的效果來看,使用白術黃芩組和有效成分組的藥物效果明顯,特別是有效成分組的小鼠的藥物實驗結果最為明顯,具體的實驗研究中的結果對比比較見表1。
表1 4組小鼠見的MOP活性對比結果(±s)
表1 4組小鼠見的MOP活性對比結果(±s)
注:**與正常組相比,模型組MOP活性明顯升高,P<0.01,有統(tǒng)計學意義,##與模型組相比,MOP活性明顯降低,P<0.01,有統(tǒng)計學意義
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潰瘍性結腸炎在臨床上治療的主要目的就是使其MOP活性降低,進而達到患者的藥物效果,恢復正常指數(shù),在臨床當中,這種病癥的藥物治療非常困難,主要有兩個方面的因素,一個是其MOP活性降低,另一個就是病癥的反復發(fā)作[1]。針對這一病癥,重要柏樹黃芩湯從起藥物機理來看具有泄瀉、通便、治療脾虛的效果,從中醫(yī)角度來看,這種病癥也就是結腸受阻,患者的脾胃受傷,導致其谷反而滯,白術黃芩可以進行治療[2]。
從實驗當中我們可以看出,對比正常組和建模組、白術黃芩湯、有效成分組的效果不一,建模組小鼠的MOP活性增長速度較快,超過了正常標準的4倍左右,在臨床效果上來看是沒有任何作用的,而其他兩種方法當中,對小鼠的病癥都起到了一定的作用,有效成分組的小鼠在治療1周之后,其MOP活性已經(jīng)恢復到與正常標準相差不大的指標[3]。
從臨床應用效果看,白術黃芩湯及有效部位組方都可以治療患者的病癥[4],實驗研究也表明這種藥物治療的效果還是非常顯著的,在臨床上可以進行研究推廣,配伍適合患者使用的比例和藥物,達到治療的目的。
[1]李茹柳.白術黃芪湯及其單藥提取成分組方對潰瘍性結腸炎的治療作用 .2007,21(3):223-228.
[2]孫洪鳳.中藥氧灌腸治療潰瘍性結腸炎.當代醫(yī)學,2010,1(625):146-147.
[3]陳江.潰瘍性結腸炎中醫(yī)病機演變特點探析.遼寧中醫(yī)學院學報,2005,7(3):197.
[4]石忠峰.白術黃芪湯及其有效成分組方對小鼠潰瘍性結腸炎的療效觀察.中藥新藥與臨床藥理,2007,18(2):87-89.